王騰宇 ， 翟 帥 ， 王 強(qiáng) ， 林 洋 ， 毛曉偉 ， 呼和巴特爾 ， 王文龍

(1. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院 農(nóng)業(yè)部動(dòng)物疾病臨床診療技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 ， 內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018 ； 2. 內(nèi)蒙古自治區(qū)科右翼前旗動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 ， 內(nèi)蒙古 科右翼前旗 137705)

綿羊消化道線蟲是一種分布范圍極廣、致病性較強(qiáng)的寄生性線蟲，在我國流行較為普遍，嚴(yán)重影響了家畜的生長發(fā)育，給養(yǎng)羊業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[1-2]。然而有關(guān)科右翼前旗地區(qū)綿羊消化道線蟲感染情況以及對常用驅(qū)蟲藥物耐藥性研究為之甚少，因此本試驗(yàn)于2019年7—9月，在該地區(qū)的11個(gè)蘇木鄉(xiāng)鎮(zhèn)、2個(gè)國營農(nóng)牧場選取1 334只綿羊進(jìn)行消化道線蟲流行病學(xué)調(diào)查，并選取234只高感染率[每克糞便蟲卵數(shù)(EPG)≥800]綿羊進(jìn)行耐藥性監(jiān)測，旨在調(diào)查該地區(qū)綿羊消化道線蟲的流行情況以及耐藥性情況，研究成果可為該地區(qū)綿羊消化道線蟲的有效防治提供科學(xué)依據(jù)，進(jìn)而提高養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益，對當(dāng)?shù)剞r(nóng)牧民的增產(chǎn)增收以及地區(qū)養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 主要試劑和藥品 阿苯達(dá)唑片[生產(chǎn)批號(hào)：獸藥字(2016)220381196]，購自四川恒通動(dòng)物制藥有限公司；伊維菌素注射液[生產(chǎn)批號(hào)：獸藥字(2016)020161128]，購自天津市保靈動(dòng)物保健品有限公司；氯氰碘柳胺鈉注射液[生產(chǎn)批號(hào)：獸藥字(2018)221381481]，購自四川恒通動(dòng)保生物科技有限公司；飽和食鹽水自配。

1.2 試驗(yàn)儀器 4 ℃冰箱、NIKON光學(xué)顯微鏡、電子天平、網(wǎng)篩、麥克馬斯特氏計(jì)數(shù)板、青霉素瓶、鑷子等。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品采集 按行政區(qū)域劃分13個(gè)采樣點(diǎn)，2019年7—9月隨機(jī)選取1 334只綿羊，每只綿羊直腸采糞約20 g,對采集糞樣按順序編號(hào)并詳細(xì)記錄采樣地點(diǎn)、驅(qū)蟲時(shí)間以及用藥情況，之后置于4 ℃冰箱待檢。

1.3.2 糞便蟲卵檢查 稱取2 g糞便樣品于燒杯中，加入58 mL飽和食鹽水，將糞樣打碎并均勻混合，經(jīng)篩網(wǎng)過濾后收集濾液，將濾液倒入干凈的青霉素小瓶，倒入濾液量稍高于瓶口且隆起，靜置20～25 min，用蓋玻片輕蘸隆起液面后置于載波片上，于顯微鏡下鏡檢。

1.3.3 驅(qū)蟲試驗(yàn) 根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果，選取234只高感染率(EPG≥800)的綿羊進(jìn)行耐藥性檢測，隨機(jī)分為伊維菌素組、阿苯達(dá)唑組、氯氰碘柳胺鈉組、空白對照組，其中伊維菌素組、阿苯達(dá)唑組均為2倍劑量給藥，氯氰碘柳胺鈉組正常劑量給藥，空白對照組不給藥。給藥8 d后直腸采糞，采用飽和鹽水漂浮法和麥克馬斯特氏計(jì)數(shù)法進(jìn)行蟲卵計(jì)數(shù)，比較給藥前后EPG并計(jì)算蟲卵減少率。

1.3.4 感染強(qiáng)度測定 稱取2 g糞樣并加入58 mL飽和食鹽水，用鑷子將糞便樣品打碎并攪拌均勻，經(jīng)篩網(wǎng)過濾至燒杯中，用吸管將濾液混勻并吸取中層液體于麥克馬斯特氏計(jì)數(shù)板，靜置2 min，于顯微鏡下鏡檢計(jì)數(shù)，并參照蟲卵圖譜[3]進(jìn)行蟲卵鑒定。

1.3.5 耐藥性判定 根據(jù)世界獸醫(yī)寄生蟲學(xué)促進(jìn)協(xié)會(huì)(WAAVP)推薦驅(qū)蠕蟲藥耐藥性判定標(biāo)準(zhǔn)[4]，判定該地區(qū)綿羊消化道線蟲對3種驅(qū)蟲藥的耐藥性，具體計(jì)算公式如下：蟲卵減少率=(給藥前糞便平均EPG-給藥后糞便平均EPG)/給藥前糞便平均EPG×100%。

2 結(jié)果

2.1 科右翼前旗地區(qū)綿羊消化道線蟲感染種類、感染率及感染強(qiáng)度 該地區(qū)綿羊消化道線蟲感染種類多樣化，其中捻轉(zhuǎn)血矛線蟲為感染優(yōu)勢蟲種，感染率為90.4%(1 206/1 334)，最大感染強(qiáng)度為36 900個(gè)/g；夏伯特線蟲感染率為27.7%(369/1 334)，最大感染強(qiáng)度為1 200個(gè)/g；奧斯特線蟲感染率為19.1%(255/1 334)，最大感染強(qiáng)度為1 500個(gè)/g； 食道口線蟲感染率為14.5%(194/1 334)， 最大感染強(qiáng)度為800個(gè)/g；毛圓線蟲感染率為9.0%(121/1 334)，最大感染強(qiáng)度為700個(gè)/g；細(xì)頸線蟲感染率為8.1%(109/1 334)，最大感染強(qiáng)度為6 400個(gè)/g；仰口線蟲感染率為6.5%(87/1 334)， 最大感染強(qiáng)度為500個(gè)/g。

2.2 科右翼前旗地區(qū)不同行政區(qū)域綿羊消化道線蟲分類感染情況 該地區(qū)綿羊消化道線蟲多為混合感染，其中捻轉(zhuǎn)血矛線蟲感染極為普遍且感染率占比較大；夏伯特線蟲、奧斯特線蟲、食道口線蟲、毛圓線蟲雖有感染但感染率相對偏低；細(xì)頸線蟲僅在察爾森鎮(zhèn)、大石寨鎮(zhèn)、歸流河鎮(zhèn)、俄體鎮(zhèn)、阿力得爾蘇木鄉(xiāng)有所發(fā)現(xiàn)，感染率分別為14.9%、13.0%、27.7%、27.0%和8.6%；仰口線蟲僅在居力很鎮(zhèn)、德佰斯鎮(zhèn)、大石寨鎮(zhèn)、歸流河鎮(zhèn)、俄體鎮(zhèn)、烏蘭毛都蘇木、阿力得爾蘇木有所發(fā)現(xiàn)，感染率分別為32.5%、13.2%、2.0%、27.0%、6.5%、3.0%和3.6%。

2.3 不同飼養(yǎng)環(huán)境綿羊消化道線蟲的流行情況 由表1可知，在不同的飼養(yǎng)環(huán)境下，綿羊消化道線蟲感染現(xiàn)象仍十分普遍，其中捻轉(zhuǎn)血矛線蟲為感染優(yōu)勢蟲種，在農(nóng)區(qū)、半農(nóng)半牧區(qū)、牧區(qū)感染率依次為90.9%、91.7%和88.4%；其次牧區(qū)綿羊消化道線蟲的感染率均低于農(nóng)區(qū)和半農(nóng)半牧區(qū)。

表1 不同飼養(yǎng)環(huán)境綿羊消化道線蟲的感染情況Table 1 Infection of digestive tract nematodes in sheep in different feeding environments

2.4 耐藥性檢測 根據(jù)WAAVP推薦耐藥性判定標(biāo)準(zhǔn)，科右翼前旗地區(qū)綿羊消化道線蟲對常用驅(qū)蟲藥伊維菌素和阿苯達(dá)唑均產(chǎn)生了不同程度的耐藥性，僅對氯氰碘柳胺鈉相對敏感。其中阿苯達(dá)唑在2倍劑量給藥后，蟲卵減少率范圍為11.2%～62.2%，平均蟲卵減少率為36.8%；伊維菌素在2倍劑 量給藥后，蟲卵減少率范圍為10.7%～72.9%，平均蟲卵減少率為39.1%；氯氰碘柳胺鈉正常劑量給藥后，蟲卵減少率范圍為95.0%～100%，平均蟲卵減少率為98.2%，見表2～4。

表2 伊維菌素耐藥性的檢測結(jié)果Table 2 Ivermectin resistance test results

表3 阿苯達(dá)唑耐藥性檢測結(jié)果Table 3 Albendazole resistance test results

表4 氯氰碘柳胺鈉耐藥性檢測結(jié)果Table 4 Closantel sodium resistance test results

3 討論

本次調(diào)查結(jié)果顯示，科右翼前旗地區(qū)綿羊消化道線蟲感染較為嚴(yán)重且多呈混合感染，共檢出7種消化道線蟲，分別為捻轉(zhuǎn)血矛線蟲、夏伯特線蟲、奧斯特線蟲、細(xì)頸線蟲、食道口線蟲、毛圓線蟲、仰口線蟲，其中捻轉(zhuǎn)血矛線蟲為優(yōu)勢蟲種。

該調(diào)查結(jié)果與2015年韓天龍對蒙東地區(qū)的消化道線蟲流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果基本一致[5]。其次調(diào)查還發(fā)現(xiàn)，雖然農(nóng)區(qū)、牧區(qū)、半農(nóng)半牧區(qū)的捻轉(zhuǎn)血矛線蟲的感染率較高，但是牧區(qū)的綿羊消化道線蟲感染率相比農(nóng)區(qū)和半農(nóng)半牧區(qū)而言總體偏低，其中原因可能與其放牧環(huán)境、飼養(yǎng)管理方式以及驅(qū)蟲頻率有關(guān)。

經(jīng)耐藥性檢測發(fā)現(xiàn)，伊維菌素和阿苯達(dá)唑在2倍劑量給藥后，蟲卵減少率均低于95%，而氯氰碘柳胺鈉正常劑量給藥后，蟲卵減少率均在95%以上，部分地區(qū)可達(dá)到100%。根據(jù)WAAVP推薦耐藥性判定標(biāo)準(zhǔn),科右翼前旗地區(qū)綿羊消化道線蟲已對常用驅(qū)蟲藥物伊維菌素和阿苯達(dá)唑產(chǎn)生了不同程度的耐藥性，僅對氯氰碘柳胺鈉相對敏感。該檢測結(jié)果與敖登高娃(2016年)對放牧綿羊胃腸道線蟲對常用驅(qū)蟲藥物的耐藥性檢測結(jié)果保持一致[6]。結(jié)合地方養(yǎng)殖戶驅(qū)蟲用藥情況分析，大部分養(yǎng)殖戶常年單一品種用藥，為了達(dá)到更好的驅(qū)蟲效果，給藥劑量常為正常劑量的2～3倍，進(jìn)而使消化道線蟲對常用驅(qū)蟲藥物逐漸產(chǎn)生了耐藥性。

針對該地區(qū)綿羊消化道線蟲流行現(xiàn)狀以及對常用驅(qū)蟲藥物的耐藥性情況，提出以下建議，在加強(qiáng)飼養(yǎng)管理的同時(shí)，在羊群放養(yǎng)以及畜產(chǎn)品流通過程中，更應(yīng)注意在畜群買賣以及放牧環(huán)節(jié)可能存在的疏漏，針對引進(jìn)羊群，需了解羊群的既往驅(qū)蟲史，若羊群消化道線蟲感染嚴(yán)重，在所用驅(qū)蟲藥物合理有效的前提下進(jìn)行給藥驅(qū)蟲，保證在合群之前羊群處于健康狀態(tài)；其次在放牧過程中，盡可能不共用草場資源，減少羊群之間消化道線蟲交叉感染的機(jī)率。加大對常用驅(qū)蟲藥物耐藥性的監(jiān)測力度，盡可能選擇敏感以及相對敏感的驅(qū)蟲藥物，例如：氯氰碘柳胺鈉，在一定程度上既避免了驅(qū)蟲藥物的浪費(fèi)，又提高了養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益，而且一定程度上延緩了驅(qū)蟲藥物耐藥性的產(chǎn)生。