李 穎 董長興 劉志勇

1.河北省唐山市動物疫病預防控制中心，河北唐山063000；2.河北省唐山市豐南區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河北唐山063300

奶牛子宮內(nèi)膜炎與普通的子宮炎癥不同，對于奶牛自身的健康不會造成較大的影響。但由于該病的病原體具備特殊性（如胎兒彎曲桿菌性病亞種以及胎兒毛滴蟲等），能夠?qū)е履膛２辉胁挥?，嚴重影響奶牛群體的繁衍質(zhì)量，使養(yǎng)殖戶遭受較大的經(jīng)濟損失。目前，我國獸醫(yī)行業(yè)針對該病提出了一些新的治療方案。

1 臨床癥狀和診斷過程

奶牛子宮內(nèi)膜炎是奶牛子宮器官的一種常見病，其臨床診斷難點在于如果病變的程度較輕，則無論是養(yǎng)殖人員還是經(jīng)驗豐富的獸醫(yī)均很難及時發(fā)現(xiàn)并確診；如果癥狀處于“隱性”狀態(tài)，則成功發(fā)現(xiàn)的可能性更是微乎其微。

1.1 奶牛群體中引發(fā)該病的主要原因

1）產(chǎn)房的衛(wèi)生條件沒有達到相應的標準。如臨產(chǎn)母牛的外陰處、尾根部長期沾染糞便且未能得到有效清洗；人工助產(chǎn)、剝離牛犢胎衣的過程中未曾消毒的器具、工作人員的手臂或其他物品接觸到了奶牛下陰，導致胎衣無法剝離、腐敗分解、惡露停滯等，均會在奶牛產(chǎn)后引發(fā)子宮內(nèi)膜炎[1]。

2）奶牛患有該病的初期，相關(guān)癥狀尚不明顯，但化膿性放線菌、壞死梭桿菌、溶血性鏈球菌、梭狀芽孢桿菌等病原在奶牛生產(chǎn)期間均已“潛伏”在奶牛子宮處，如果產(chǎn)后未能及時治療或長期無法好轉(zhuǎn)，則癥狀將會轉(zhuǎn)入慢性。

1.2 奶牛子宮內(nèi)膜炎的臨床癥狀

1）產(chǎn)后1 周左右，如果癥狀較輕，則奶牛全身沒有明顯跡象，但此后無法受孕；如果癥狀較重，則奶牛的機體溫度會顯著提升，伴隨呼吸頻率增加、精神萎靡不振、缺乏食欲、反芻現(xiàn)象明顯減少。

2）患牛的拱腰、舉尾等常見動作與正常狀態(tài)下的差別較大，其陰道內(nèi)經(jīng)常流出較大量、較濃的黃褐色黏稠狀分泌物，伴隨強烈的腥臭味，甚至經(jīng)常出現(xiàn)絮狀物或牛犢的胎衣碎片，附著在尾根處，漸漸形成結(jié)痂。

1.3 奶牛子宮內(nèi)膜炎的實驗室診斷方法

奶牛出現(xiàn)上述癥狀之后，為了進一步確認是否患有子宮內(nèi)膜炎，可以圍繞以下要點展開實驗室診斷。

1）對子宮的分泌物進行鏡檢，制作成涂片后，經(jīng)過顯微鏡觀察，能夠明顯發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜上皮細胞、白細胞等。

2）對奶牛發(fā)情時的子宮分泌物進行化學檢測，采用濃度為4%氫氧化鈉溶液（劑量為2 mL），與等量分泌物混合后，加熱沸騰，待其冷卻后，如果顏色從無色逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)闄幟庶S（微弱），則表明子宮內(nèi)膜炎檢測呈陽性。

2 奶牛子宮內(nèi)膜炎的新型治療方式

2.1 針對不同區(qū)域奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌的分離鑒定

在不同的地區(qū)，引發(fā)奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌不盡相同，為了確定，需要針對細菌展開分離培養(yǎng)、純化、鑒定，具體流程如下。

1）收集患牛子宮分泌物（劑量50 μL 為1 份），接種到常規(guī)的肉湯培養(yǎng)基，濃度為10%的綿羊血瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基等，在溫度達到37 ℃的溫箱內(nèi)累計培養(yǎng)24 h。在此期間，實驗人員應該對病原菌的單菌落進行劃線純化分離操作，重點審查細菌的生長情況、是否溶血、具體形態(tài)、顏色等。該過程結(jié)束的標志在于得到完全純化的菌種，并加入營養(yǎng)肉湯（內(nèi)含濃度為20%的甘油）培養(yǎng)基中，以-80 ℃的溫度冷藏保存。

2）為了明晰引發(fā)奶牛子宮內(nèi)膜炎的確切病原種類，分離鑒定操作必須采用“引物”。其中，上游引物序列為5’-AGAGTTTGATCCT-GGCTCAG-3’，下游引物序列為5’-AAGGAGGTGATC-CAGCC-3’。若要獲取最佳效果，菌種擴增片段的長度需要達到至少1 500 bp。具體方式為，將100～150 μL 的菌種液涂抹到普通的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，在37 ℃的環(huán)境下培養(yǎng)18～24 h，待復蘇培養(yǎng)3 代后，制備成待測菌液。

3）對菌液的DNA 序列進行檢測，將結(jié)果與細菌庫中的標準化樣本進行對照，最終確定誘發(fā)奶牛子宮內(nèi)膜炎的細菌，進而“對癥下藥”。

2.2 采用甲硝唑治療奶牛子宮內(nèi)膜炎的探索

經(jīng)過檢測，如果發(fā)現(xiàn)引發(fā)奶牛子宮內(nèi)膜炎的病菌為葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌等，則奶牛多患有漿液性、卡他性、慢性子宮內(nèi)膜炎。面對此種情況，獸醫(yī)可以采用甲硝唑與青霉素聯(lián)合的方式，對患牛進行治療，具體過程如下。

1）將0.5 g 甲硝唑、80 萬國際單位青霉素放入250 mL 葡萄糖溶液中，均勻混合后，對患牛的子宮進行全面清洗（必須等到患牛癥狀相對穩(wěn)定時方可進行）。

2）選用甲硝唑注射液（根據(jù)患牛癥狀的輕重，最少劑量為500 mL，最大劑量為1 000 mL），采用靜脈注射的方式完成治療。通常情況下，每天需要注射2 次，如果癥狀較輕，則連續(xù)注射3 d 即可；如果癥狀較重，可適當延長，以7～10 d 為最佳。

3）基于甲硝唑的抗厭氧菌功效，其能夠在無氧環(huán)境下經(jīng)由氧化還原反應生成氨基，達到防止細菌感染的目的。將上述2 種方法聯(lián)合使用，對于治療奶牛子宮內(nèi)膜炎能夠起到十分有效的作用。

2.3 采用雙聯(lián)益母液等中草藥治療急性奶牛子宮內(nèi)膜炎的效果觀察

如果奶牛確診為急性子宮內(nèi)膜炎，則常規(guī)的西藥治療起到的效果有限，故可以采用雙聯(lián)益母液或其他中成藥進行干預。雙聯(lián)益母液的主要成分為熟地、當歸、木香、赤芍、雞冠花、益母草、連翹、雙花等，制備成藥業(yè)后，可以直接注射進病牛的子宮內(nèi)。除此之外，獸醫(yī)及養(yǎng)殖人員還可以選用柴胡、白芍、當歸、陳皮、山藥等藥物各60 g，配以白術(shù)、甘草、艾葉40 g，搭配茯苓、魚腥草75 g，益母草、肉桂、杜仲50 g[2]，充分混合后，加入3 000 mL 清水，煎成藥液后，清除所有殘渣，喂食患牛（每次0.5 kg 劑量，每天服用2 次）。此種借助中醫(yī)藥治療奶牛子宮內(nèi)膜炎的方式，經(jīng)臨床觀察，有效率超過95%，患牛使用后，子宮收縮反應完全恢復正常，分泌物不再黏稠，不孕不育癥狀完全消失。

3 結(jié) 語

引發(fā)奶牛子宮內(nèi)膜炎癥狀的病原多種多樣，故治療方式應有所區(qū)分。實踐表明，為了提升治療成效，不同地區(qū)的獸醫(yī)防疫站應該配備全套的實驗室檢測設備，目的在于針對病原菌進行分離鑒定，從而找到治療該病的最佳方式。本文介紹的甲硝唑、雙聯(lián)益母液等藥物效果良好，均為可行性較高的治療干預方式。