張明曉，楊 艷，方 峰

（洛陽(yáng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河南 洛陽(yáng) 471000）

肝纖維化（liver fibrosis，LF）是肝臟對(duì)各種刺激造成的損傷進(jìn)行自我修復(fù)的結(jié)果。這些刺激包括患者過(guò)量飲酒、發(fā)生病毒感染、使用損害肝臟的藥物、接觸毒物、發(fā)生膽汁淤積、罹患寄生蟲(chóng)病或代謝性疾病等。肝臟在修復(fù)損傷的過(guò)程中，細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）的產(chǎn)生和降解失衡，可導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)過(guò)度沉積，進(jìn)而可引發(fā)LF。LF 是許多慢性肝病發(fā)展到肝硬化的中間階段。相關(guān)的研究結(jié)果顯示，有25% ～40% 的LF 患者病情最終會(huì)發(fā)展為肝硬化甚至肝癌[1]。近年來(lái)，臨床上對(duì)肝病的研究主要集中在逆轉(zhuǎn)LF 方面。本文主要是分析導(dǎo)致LF 發(fā)生和發(fā)展的分子機(jī)制。

1 導(dǎo)致LF 發(fā)生的中心靶細(xì)胞

相關(guān)的研究結(jié)果顯示，去除導(dǎo)致患者發(fā)生LF 的刺激后，其LF 有可能發(fā)生逆轉(zhuǎn)[2]。肝星狀細(xì)胞（hepatic stellate cell，HSC）是肝臟的非實(shí)質(zhì)細(xì)胞，過(guò)去又被稱為Ito 細(xì)胞、儲(chǔ)脂細(xì)胞及竇周細(xì)胞等。HSC 位于肝細(xì)胞與竇內(nèi)皮細(xì)胞之間的Disse 間隙內(nèi)，呈梭形或多邊形，胞漿內(nèi)有多個(gè)富含維生素A 的脂滴，能合成、分泌多種膠原和細(xì)胞外基質(zhì)[3]。在健康的肝臟組織中，HSC 處于相對(duì)靜止的狀態(tài)，其增殖活性低。HSC 的活化和增殖是導(dǎo)致LF 發(fā)生的中心環(huán)節(jié)。目前，HSC 已成為研究慢性肝病及LF 發(fā)病機(jī)制時(shí)醫(yī)學(xué)界重點(diǎn)關(guān)注的靶細(xì)胞[4]。

2 導(dǎo)致LF 發(fā)生的靶細(xì)胞調(diào)控因子

HSC 是導(dǎo)致LF 發(fā)生的主要效應(yīng)細(xì)胞，可與肝細(xì)胞、肝巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等相互作用，促進(jìn)LF 的發(fā)生和發(fā)展[5]。要激活HSC 并維持其存活需要一些信號(hào)的調(diào)控[3]。而這些信號(hào)又受到多種因子的調(diào)控。這些因子可來(lái)自HSC 本身，也可來(lái)自其他細(xì)胞。HSC 本身可提供特殊的趨化信號(hào)，從而調(diào)控它們與炎癥細(xì)胞之間的作用。這種信號(hào)調(diào)控作用既能發(fā)生在LF 期間，也能發(fā)生在LF 逆轉(zhuǎn)期。凋亡的肝細(xì)胞能促進(jìn)巨噬細(xì)胞分泌促炎性細(xì)胞因子和促纖維化細(xì)胞因子，使HSC 被激活[6]。巨噬細(xì)胞能維持激活的HSC 存活，從而增加肝臟內(nèi)HSC 的數(shù)量。巨噬細(xì)胞能分泌CC- 趨化因子配體2（C-C motif chemokines ligand2，CCL2）、CC-趨化因子配體3（C-C motif chemokines ligand3，CCL3）、CC-趨化因子配體4（C-C motif chemokines ligand4，CCL4）、CC-趨化因子配體5（C-C motif chemokines ligand5，CCL5）、CC-趨化因子配體7（C-C motif chemokines ligand7，CCL7） 及CC- 趨 化 因 子 配 體8（C-C motif chemokines ligand8，CCL8），從而促進(jìn)HSC 遷移。在肝臟纖維瘢痕附近常可發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞[7]。相關(guān)的研究結(jié)果顯示，內(nèi)皮細(xì)胞在激活HSC 及肝纖維化發(fā)生的過(guò)程中起著重要的作用[1]。在大多數(shù)器官中，內(nèi)皮細(xì)胞從血管遷移到組織內(nèi)不僅需要白細(xì)胞的配合，還會(huì)與周細(xì)胞形成功能性單位。HSC 是肝臟內(nèi)特殊的周細(xì)胞。內(nèi)皮細(xì)胞合成、分泌的部分細(xì)胞因子會(huì)激活HSC[8]。自然殺傷細(xì)胞（natural killer cell，NK）是人體內(nèi)抵抗病毒感染的免疫細(xì)胞之一。NK 可殺傷激活的HSC，從而起到抑制LF 的作用[9-10]。但發(fā)生乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染等會(huì)導(dǎo)致患者體內(nèi)的NK 減少，從而使NK 無(wú)法起到有效抑制LF 的作用。不同淋巴細(xì)胞亞型在HSC 的激活和LF 的發(fā)展中也起到一定的作用。相關(guān)的研究結(jié)果顯示，慢性肝損傷患者肝臟內(nèi)淋巴細(xì)胞和HSC 的位置相近[11]。這說(shuō)明，淋巴細(xì)胞和HSC 在功能上有交聯(lián)。2 型固有淋巴細(xì)胞（innate lymphoid cells2，ILC2）是固有淋巴細(xì)胞的一個(gè)亞群。LFU 患者肝臟內(nèi)的ILC2可 分 泌IL-13 等 輔 助 型T 細(xì) 胞（T helper cell，TH） 因子，激活信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄活化因子6（signal transducer and activator of transcription6，STAT6），從而激活HSC[12]。

在過(guò)去的幾十年中，有大量的文獻(xiàn)闡述了炎癥反應(yīng)、活性氧（reactive oxygen species，ROS）與LF 之間的關(guān)系。HSC 的活化受炎癥細(xì)胞和炎癥因子的影響。在肝臟受到損傷時(shí)，肝巨噬細(xì)胞被激活，釋放大量的炎癥介質(zhì)及趨化因子，將其他炎癥細(xì)胞聚集于損傷的部位，促使轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（transforming growth factor-β，TGF-β）、血小板源性生長(zhǎng)因子（platelet derived growth factor，PDGF）、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（fibroblast growth factor，F(xiàn)GF）及白細(xì)胞介素-6（interleukin6，IL-6）等細(xì)胞因子的水平升高，進(jìn)而導(dǎo)致HSC 活化[13]。此外，肝巨噬細(xì)胞釋放的ROS 可直接刺激HSC 活化、增殖。

HSC 具 有 完 整 的Toll 樣 受 體4（toll-like receptor 4，TLR4）信號(hào)通路。TLR4 信號(hào)的活化可上調(diào)炎癥因子和趨化因子的水平，使炎癥細(xì)胞聚集到肝臟中，從而使HSC 被激活。HSC 可通過(guò)TLR4 信號(hào)途徑下調(diào)骨形態(tài)發(fā)生蛋白激活素膜結(jié)合抑制劑（bone morphogenetic protein and activin membrane-bound inhibitor，BAMBI） 的 表 達(dá)，使HSC 對(duì)TGF-β 介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑更加敏感，增強(qiáng)TGF-β 激活HSC 的作用[12]。由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的白細(xì)胞介素1β（interleukin1β，IL-1β）是一種炎癥細(xì)胞因子。IL-1β 能參與毒性、酒精性、非酒精性誘導(dǎo)的LF。IL-1β能間接上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑1（tissue inhibitor of metalloproteinase1，TIMP1）的水平，下調(diào)BAMBI 的水平，從而激活HSC[14]。IL-1β 還能延長(zhǎng)HSC 存活的時(shí)間。

氧化應(yīng)激反應(yīng)可誘導(dǎo)HSC 活化。核因子-E2相關(guān)因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）是 細(xì)胞防御氧化應(yīng)激的重要轉(zhuǎn)錄因子，是維持細(xì)胞內(nèi)氧化還原穩(wěn)態(tài)的中樞調(diào)節(jié)因子。Nrf2 能與抗氧化反應(yīng)元件相結(jié)合，增加細(xì)胞的抗氧化能力，在細(xì)胞抵御外源性和內(nèi)源性氧化應(yīng)激反應(yīng)時(shí)起到重要的作用。在氧化應(yīng)激條件下，HSC 內(nèi)的Nrf2 會(huì)發(fā)生核轉(zhuǎn)位，發(fā)揮其抗氧化的作用。LF 患者肝臟內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)失衡，無(wú)法通過(guò)上調(diào)Nrf2 的水平起到抗氧化的作用，從而無(wú)法抑制HSC 的活化?；罨木奘杉?xì)胞可產(chǎn)生大量的ROS。ROS 是激活核轉(zhuǎn)錄因子κB（nuclear transcription factor-κB，NF-κB）的主要介質(zhì)，是調(diào)控炎癥和細(xì)胞死亡的關(guān)鍵因子。NF-κB 活化會(huì)加重四氯化碳誘導(dǎo)的HSC 活化[15]。高遷移率族蛋白（high mobility group protein，HMGB1）是Johns 在20 世紀(jì)60 年代發(fā)現(xiàn)的一種蛋白，因其在聚丙烯酰胺凝膠電泳中游動(dòng)較快而得名。HMGB1 可通過(guò)主動(dòng)和被動(dòng)兩種方式釋放到細(xì)胞外。巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞在受到脂多糖（Lipopoly saccharide，LPS）、白細(xì)胞介素1（interleukin，IL-1）及腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor,TNF）等致炎癥細(xì)胞因子刺激后，可主動(dòng)釋放HMGB1[14]。HMGB1 是一種炎癥介質(zhì)，可作用于炎癥細(xì)胞，使炎癥細(xì)胞分泌相關(guān)因子，導(dǎo)致HSC 活化。HMGB1可直接提高肝臟內(nèi)肌動(dòng)蛋白的水平，抑制基質(zhì)金屬蛋白酶2（matrix metallopeptidase 2，MMP2）的活性[15]。相關(guān)的研究結(jié)果顯示，原位肝移植患者在排斥移植物時(shí)，其體內(nèi)的HMGB1 會(huì)顯著增加HSC 的數(shù)量和細(xì)胞外基質(zhì)沉積，并可將HSC 轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞，促使LF 的發(fā)生。

3 小結(jié)

LF 在發(fā)生和發(fā)展的過(guò)程中有多種細(xì)胞和因子的參與。這些細(xì)胞和因子使LF 的發(fā)生和發(fā)展變得非常復(fù)雜。了解導(dǎo)致LF 發(fā)生的分子機(jī)制有利于相關(guān)學(xué)者發(fā)現(xiàn)逆轉(zhuǎn)LF 的方法，從而為臨床治療肝硬化、肝癌及肝衰竭提供參考。