張夢(mèng)鴿

（山西省運(yùn)城市畜牧獸醫(yī)發(fā)展中心 044000）

布魯氏桿菌病又被稱為布氏桿菌病，是一種由布氏桿菌引起的慢性人畜共患傳染病，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織將其稱作B 類動(dòng)物疫病，很大程度上阻礙奶牛業(yè)的發(fā)展[1]。而且需要注意的是，奶牛布魯氏桿菌病同樣可以傳染人類，進(jìn)而對(duì)人類健康造成威脅，同樣需要引起廣泛重視。

1 奶牛布魯氏桿菌病的基本分析

1.1 布魯氏桿菌病病因分析

布魯氏桿菌病（Brucellosis）是由布魯氏桿菌（Brucella）引起的具有傳染性人畜共患病。普通家畜均為其易感動(dòng)物。在我國(guó)流行的菌株中主要以牛種、羊種布魯氏菌為主，其中牛種布魯氏菌病對(duì)奶牛業(yè)危害最為嚴(yán)重。該病具有極高致病性，通常呈現(xiàn)地方流行性。布魯氏桿菌病的傳染源主要在于患病奶牛及其他帶菌動(dòng)物，敏感性強(qiáng)，但對(duì)溫度十分敏感，沸水即可殺死布魯氏桿菌。同時(shí)，布魯氏桿菌病轉(zhuǎn)移性極強(qiáng)。布魯氏桿菌病主要通過(guò)消化道進(jìn)行傳播，當(dāng)奶牛接觸患病奶?；虮黄湮廴镜娘暳稀⑷橹?、分泌物甚至地面土壤后均可能會(huì)造成一定的程度感染。而人類如果缺乏必要的消毒防護(hù)措施，貿(mào)然接觸患病奶?；蛳嚓P(guān)動(dòng)物源性食品，布魯氏桿菌會(huì)透過(guò)人類皮膚黏膜侵入呼吸道及結(jié)膜等，促使人類感染布魯氏桿菌病[2]。對(duì)于奶牛而言，布魯氏桿菌病的主要特征在于母牛流產(chǎn)，產(chǎn)出死胎或脆弱犢牛。

1.2 布魯氏桿菌病臨床表現(xiàn)

布魯氏菌病主要侵害奶牛自身生殖系統(tǒng)，引發(fā)一系列繁殖障礙等疾病。懷孕母畜經(jīng)常以發(fā)生流產(chǎn)現(xiàn)象為主，引起關(guān)節(jié)炎、子宮炎、腹膜炎等炎癥，甚至可能會(huì)造成奶牛不孕等情況。對(duì)于感染布魯氏桿菌病奶牛所出現(xiàn)流產(chǎn)問(wèn)題，可能會(huì)出現(xiàn)在其中任何環(huán)節(jié)，孕育奶牛流產(chǎn)前期便會(huì)出現(xiàn)無(wú)法正常休息、食欲不振等情況；新生犢牛一般可以見(jiàn)到肺炎病灶；公牛也可被感染，公牛感染后會(huì)出現(xiàn)睪丸炎等情況，一般不易被發(fā)現(xiàn)。人類如果感染上布魯氏桿菌病一般表現(xiàn)為渾身無(wú)力、低燒、生殖系統(tǒng)障礙等疾病，嚴(yán)重者可終身喪失勞動(dòng)力甚至死亡，需要引起重視，及時(shí)預(yù)防。

2 奶牛布魯氏桿菌病的診斷方法

2.1 細(xì)菌學(xué)診斷

通過(guò)分離布魯氏桿菌培養(yǎng)、涂片染色進(jìn)行診斷的試驗(yàn)方法。其中標(biāo)本采集是重中之重。選取適宜的抗生素在合適的部位按照相關(guān)試驗(yàn)要求完成采集工作，采樣結(jié)束接種于培養(yǎng)基培養(yǎng)。對(duì)比所形成的菌落與布魯氏桿菌的生物特性進(jìn)行鑒別；涂片染色通常是將血液等組織制作成涂片，采取沙黃、亞甲藍(lán)鑒別法進(jìn)行染色，顯微鏡下觀察染色情況，如果被染成紅色，那么證明檢驗(yàn)的細(xì)菌為布魯氏桿菌，如果呈現(xiàn)藍(lán)色，則證明所檢驗(yàn)細(xì)菌為其他細(xì)菌。細(xì)菌學(xué)診斷準(zhǔn)確性高，但存在潛在的感染風(fēng)險(xiǎn)，因此，要求相關(guān)人員有一定的專業(yè)基礎(chǔ)。

2.2 虎紅平板凝聚試驗(yàn)

虎紅平板凝聚試驗(yàn)（RBPT）又被稱為班氏孟加拉紅平板凝集試驗(yàn)，是一種較為簡(jiǎn)單便捷的檢測(cè)方式，常常應(yīng)用于陽(yáng)性牛的初步篩選[3]。檢測(cè)布魯氏桿菌病所使用的抗原是經(jīng)過(guò)虎紅染料染色后懸浮于乳酸緩沖液中制備而成，所以呈現(xiàn)粉紅色。通過(guò)血清對(duì)照進(jìn)行判斷，如果受檢血清在4min 內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)凝集現(xiàn)象則判為陽(yáng)性；如果無(wú)凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色則判為陰性?；⒓t平板凝聚試驗(yàn)雖然會(huì)出現(xiàn)假陰性等缺點(diǎn)，但有靈敏性高、操作簡(jiǎn)單、成本低的優(yōu)勢(shì)，是布魯氏桿菌病常用的監(jiān)測(cè)手段之一。

2.3 試管凝集反應(yīng)

試管凝集反應(yīng)主要適用于實(shí)驗(yàn)室操作，是一種較為快速的診斷方法。試管凝集反應(yīng)經(jīng)常用于定量試驗(yàn)。通過(guò)將抗原與受稀釋的奶牛待測(cè)血清混合放置，觀察凝集現(xiàn)象，以此來(lái)確定血清中是否存在該抗體和該抗體的含量。該方法易受外界因素的影響，容易出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性的結(jié)果。

2.4 奶牛布病快速診斷試紙條

奶牛布病快速診斷試紙條又被稱為膠體金法快速診斷試紙，是當(dāng)前我國(guó)用于檢測(cè)布魯氏桿菌病的一種新型診斷方法。經(jīng)常用于奶牛場(chǎng)隨時(shí)初次檢驗(yàn)，奶牛場(chǎng)防疫工作人員可以通過(guò)奶牛布病快速診斷試紙條對(duì)牛群布魯氏桿菌病患病情況進(jìn)行初步檢驗(yàn)，簡(jiǎn)單快速，而且試管凝聚方法的符合率很高，是現(xiàn)階段進(jìn)行布魯氏桿菌病檢測(cè)的常用方法。

2.5 ELISA 反應(yīng)法

ELISA 反應(yīng)法通常采用固相載體表面抗原與抗體的特異結(jié)合，在酶的作用下底物發(fā)生顏色變化。測(cè)定對(duì)象可以是抗體也可以是抗原。ELISA 反應(yīng)法包括間接法、雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、競(jìng)爭(zhēng)法、阻斷法等。ELISA 反應(yīng)法的優(yōu)勢(shì)在于其準(zhǔn)確率高，出錯(cuò)率低且判定簡(jiǎn)單。

2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR

實(shí)時(shí)熒光定量PCR 技術(shù)是在分子水平上對(duì)病原進(jìn)行鑒定，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)，較細(xì)菌學(xué)、血清學(xué)相比有更高的安全性，可以同時(shí)對(duì)大批樣品進(jìn)行檢測(cè)。隨著非洲豬瘟的流行，分子病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)已普及到縣（市、區(qū)）級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，在未來(lái)實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)會(huì)成為主流監(jiān)測(cè)手段。

3 奶牛布魯氏桿菌病的防控措施

3.1 確保衛(wèi)生，定期消毒檢查

需要明確的是，奶牛布魯氏桿菌病病因復(fù)雜，近年來(lái)，發(fā)病率也在逐漸上升，對(duì)畜牧業(yè)造成極大威脅，而人類一旦患病，嚴(yán)重時(shí)可危及生命，對(duì)畜牧業(yè)和公共衛(wèi)生安全造成不可估量的經(jīng)濟(jì)損失，所以必須引起重視。當(dāng)前對(duì)布魯氏桿菌病缺乏切實(shí)有效的藥物，主要以預(yù)防為主。衛(wèi)生是第一大關(guān)，保證養(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)境安全衛(wèi)生才能保證奶牛健康成長(zhǎng)，避免因環(huán)境問(wèn)題加劇布魯氏桿菌病。

對(duì)于奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)而言，應(yīng)設(shè)立獨(dú)立的消毒通道，確定無(wú)菌空間。工作人員進(jìn)出奶牛場(chǎng)需進(jìn)行消毒；對(duì)奶牛場(chǎng)養(yǎng)殖環(huán)境定期消毒；應(yīng)科學(xué)合理的喂食奶牛飼料提高奶牛自身免疫力；每天清理奶牛糞便，如果需要積累肥料，也應(yīng)做好糞便無(wú)害化處理，搞好衛(wèi)生消毒，提供安全的奶牛生活環(huán)境。

3.2 管理嚴(yán)格，避免交叉感染

在保證奶牛安全的生活環(huán)境基礎(chǔ)上，應(yīng)對(duì)奶牛進(jìn)行定期免疫，同時(shí)進(jìn)行血清學(xué)監(jiān)測(cè)監(jiān)督奶?？贵w水平，抗體不達(dá)標(biāo)時(shí)應(yīng)注意加強(qiáng)免疫等工作。定期進(jìn)行布魯氏桿菌病檢測(cè)工作，避免染病奶牛進(jìn)入奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)。布魯氏桿菌病對(duì)奶牛自身傷害極大，而且具有極強(qiáng)污染性，所以應(yīng)定期進(jìn)行分子病原學(xué)檢測(cè)，確保沒(méi)有布魯氏桿菌病原。對(duì)已感染布魯氏桿菌病的奶牛，由于很容易進(jìn)行傳染，必須采取撲殺方式，并進(jìn)行消毒處理，確保凈化可靠，只有保證安全無(wú)菌的奶牛生活環(huán)境，嚴(yán)格管控奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)，才能避免患病奶牛發(fā)生交叉感染情況，將布魯氏桿菌病進(jìn)一步擴(kuò)大。

奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)工作人員應(yīng)確保自身健康，定期進(jìn)行體檢，布魯氏桿菌病不僅能傳染動(dòng)物，也能傳染人類，所以在整個(gè)奶牛養(yǎng)殖過(guò)程必須做好自身防護(hù)工作，奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)避免非工作人員進(jìn)入奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)。

3.3 強(qiáng)化根除，科學(xué)飼養(yǎng)奶牛

奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)工作人員確保衛(wèi)生消毒，以及奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)境確保定期檢查的基礎(chǔ)上，奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)適當(dāng)采取科學(xué)飼養(yǎng)方式，提高奶牛自身免疫力，同時(shí)避免引進(jìn)外部奶牛，而是采取自繁自養(yǎng)，從源頭處防控布魯氏桿菌病。對(duì)奶牛進(jìn)行科學(xué)合理的疫苗接種，一般奶牛在牛犢出生后6 個(gè)月就可以采取一次疫苗接種，18 個(gè)月可以進(jìn)行二次接種疫苗，切實(shí)確保安全健康。

4 結(jié)論

綜上所述，預(yù)防奶牛布魯氏桿菌病對(duì)保障奶牛健康和人類安全十分重要。對(duì)現(xiàn)階段布魯氏桿菌病診斷方法應(yīng)針對(duì)不同情況用以試驗(yàn)檢測(cè)，奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)工作人員也應(yīng)予以重視，做到科學(xué)養(yǎng)殖，嚴(yán)格消毒，確保環(huán)境安全衛(wèi)生，全方位防控布魯氏桿菌病，提升奶牛布魯氏桿菌病自身防控水平。