鄧新為,毛 超,何亞蓉,齊向英
(延安大學 生命科學學院,陜西 延安 716000)
山丹丹學名山丹(Liliumpumilum.DC),是百合科百合屬多年生的野生植物[1]。2016年確認為延安市市花,其花形和花色具有較好的觀賞價值,廣泛用于城市美化和園林造景,其鱗莖富含淀粉、蛋白質、脂肪、生物堿、鈣、磷、鐵等成分,可供食用,也具備較高的藥用價值[2]。山丹丹繁殖方式主要有小鱗莖繁殖、鱗片繁殖、珠芽繁殖和種子繁殖等[3]。山丹丹具抗寒、抗病等優(yōu)良性狀,是百合抗性育種和品質改良的重要基因資源[4-6]。山丹丹作為觀賞、藥用性較高的植物,其種子具有休眠現(xiàn)象,且種子常攜帶大量微生物,故其采用種子繁殖成活率較低[7,8]。有研究表明,百合種子采用溫水浸泡有助于促進其萌發(fā)[9,10]。本文結合已有文獻報道,在種子收獲后設置不同環(huán)境,以自來水、蒸餾水浸泡種子,探究其吸水規(guī)律,為提高山丹丹種子發(fā)芽率提供理論依據。
選取飽滿、胚發(fā)育良好的成熟山丹丹種子作為試驗材料。試驗用材料由山丹生物科技有限公司提供,采于2020年10月上旬。試驗于10月下旬在延安大學進行。
由于10月下旬已經開始供暖,實測室內溫度為27℃,以該溫度為室內溫度,不考慮日夜變化。另外設計25℃和30℃為恒溫,在恒溫培養(yǎng)箱中實現(xiàn)。
取蒸餾水、自來水各500 mL。其中自來水蒸沸后放涼備用(煮沸的目的是為了防止水質在短時間內發(fā)生霉變)。
設計對照組和試驗組。
對照組在蒸餾水中進行,置于室溫下。對照組吸水結束以有部分種子露白為標志。
試驗組設置4個處理,其中試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組均在蒸餾水中進行,并分別置于室溫27℃、25℃和30℃恒溫培養(yǎng)箱中;試驗Ⅳ組在自來水中,置于室溫27℃下在凈化工作臺內進行。
試驗開始前每組分別精選3個1000粒種子作為研究材料。將選取好的材料置于塑料濾網合并稱重,試驗開始后將種子和濾網同時投入準備好的溶液中,在不同的時間點合并稱重,最終計算時以每次合并稱重量減去濾網重量為準。結果表示為千粒種子重量的平均值±標準差。
試驗組每隔2 h從水中取出,用濾紙吸干表面水分,用分析天平稱重,至重量不再增加為止,計算吸水量、吸水速率及平均吸水速率。
吸水速率(mg/min)=(M本次重量-M前一次重量)/H吸水時間;
平均吸水速率(mg/min)=(M最后一次稱重量-M第一次重量)/H吸水時間。
整個吸水過程在不同的水環(huán)境和不同試驗溫度條件下,均表現(xiàn)出三段式吸水現(xiàn)象。種子吸水速率>1 mg/min的時間均出現(xiàn)在10 h以前(見表1)。
對照組一直浸泡在蒸餾水中,在試驗進行到吸水30 h時,有部分種子已經露白。試驗組也有部分種子種皮漲破,最終確定為種子飽和吸水量時間為30 h。此時對照組千粒種子平均重量為7.351 g,增重4.595 g,增重系數為1.677。試驗Ⅳ組在自來水中,室溫下凈化工作臺內增重量為4.585 g,增重系數為1.807。其它各試驗組中增重量最大的是試驗Ⅲ組,在30℃恒溫培養(yǎng)箱中的吸水試驗,增重量達到5.424 g,增重系數為2.056。
室溫環(huán)境下,蒸餾水中浸沒的種子在0~4 h時,是其吸水量上升最快的階段,4~22 h期間其種子吸水量呈緩慢上升趨勢。浸沒至22 h以后趨向于穩(wěn)定。
在25℃恒溫培養(yǎng)箱環(huán)中,在0~4 h時,其吸水量上升最快,4~16 h期間其種子吸水量呈緩慢上升趨勢。浸沒至18 h以后,種子吸水量變化很小,至26 h后,種子幾乎不再吸水。
在30℃恒溫培養(yǎng)箱中,種子在0~8 h時,吸水量變化最快,浸沒14 h以后,其種子吸水量上升緩慢。浸沒至26 h以后,種子吸水量變化很小,幾乎不再吸水。
室溫環(huán)境下,煮沸的自來水中,種子在0~4 h時,其吸水量上升最快,4~10 h,其吸水量逐漸減緩,10 h以后,其種子吸水量上升很慢。浸沒至24 h以后,種子吸水量變化很小。
由于種子在萌發(fā)前的吸水過程主要是蛋白質的吸漲作用,所以種子吸水是一個持續(xù)的過程。第一階段是由于細胞內容物中親水物質所引起的吸漲作用,這是一個物理過程;在第二階段中,細胞利用已吸收的水分進行代謝作用;直到第三階段,由于胚的迅速長大和細胞體積的加大,重新吸水,這時的吸水是與代謝作用相連的滲透性吸水[11]。本試驗中,種子的吸水階段為快速上升、緩慢上升、不再明顯上升三個階段。風干的種子細胞中自由水含量較少,主要以結合水的形式存在[12]。風干的種子只有吸收足夠的水才能進行旺盛的代謝活動,使胚生長[13]。本試驗中,山丹丹種子在經過前2 h的快速吸水階段后,其自由水含量升高,種子代謝速率大大增加,為其萌發(fā)提供了必要的條件。百合種子的吸水力越好,其形態(tài)上表現(xiàn)得越飽滿,生理學上特征為代謝活動越強,越容易萌發(fā)。有研究表明,種子在適宜溫度范圍中,較高溫度可促進種子中的酶活性增強,從而促進其代謝,打破休眠開始萌發(fā)[14]。本試驗中,種子在0~2 h的快速吸水階段,處于同種水質下,30℃培養(yǎng)箱中種子吸水速度最快,這也說明較高的環(huán)境溫度有效促進了種子的吸水速率。其原因也可能是在較高溫度環(huán)境下,種子細胞由于受到環(huán)境溫度的脅迫,其代謝速度加快,而種子細胞為了適應這種環(huán)境,選擇吸收外界的水來補充自由水以保證其正常代謝。
山丹丹種子吸水過程可分為快速增長期、平緩期、飽和期。山丹丹種子完全浸沒在自來水和蒸餾水中,前2 h為其吸水速度峰值,吸水量上升最快,在2~14 h階段,其吸水速度逐漸趨于平緩。浸沒至14 h以后,其吸水量上升緩慢,不再快速增加,至24 h左右開始不再明顯增加,趨于吸水飽和狀態(tài)。在蒸餾水中,隨著培養(yǎng)溫度的逐漸升高,山丹丹種子總吸水量呈遞增趨勢。
整個研究過程中溫度對山丹丹吸水的總趨勢沒有影響,對吸水量有較大的影響。30℃恒溫培養(yǎng)條件下的山丹丹種子吸水量大于所有吸水量。