張璐瑤，汪麗鈺，陳乾，時(shí)建明

(南京醫(yī)科大學(xué)姑蘇學(xué)院 南京醫(yī)科大學(xué)附屬蘇州醫(yī)院 蘇州市立醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，江蘇 蘇州 215008)

惡性腫瘤是一種全身性的基因性疾病，在內(nèi)因及外因的共同作用下，正常細(xì)胞發(fā)生一系列基因突變，機(jī)體內(nèi)腫瘤細(xì)胞過(guò)度增殖導(dǎo)致腫瘤形成[1]。早在20世紀(jì)70年代，N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenine，m6A)甲基化修飾已被發(fā)現(xiàn)[2-4]，其是最普遍的RNA分子表觀遺傳修飾，但由于檢測(cè)技術(shù)的限制，m6A甲基化修飾的具體功能及作用機(jī)制仍不明確。有證據(jù)表明，m6A甲基化修飾在信使RNA(messenger RNA，mRNA)前體剪接、3′端加工、核輸出、翻譯調(diào)控、mRNA降解和微RNA加工中起關(guān)鍵作用[5]。m6A甲基化修飾調(diào)控紊亂可能影響mRNA的加工、降解以及翻譯過(guò)程，導(dǎo)致癌基因的激活及抑癌基因的失活，與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及耐藥的發(fā)生密切相關(guān)，因此m6A甲基化修飾迅速成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)之一。

目前，惡性腫瘤已進(jìn)入精準(zhǔn)治療時(shí)代，但消化道惡性腫瘤的治療手段仍較局限，尤其是缺乏靶向治療、免疫治療的有效治療靶點(diǎn)和生物標(biāo)志物，且患者5年生存率仍較低?，F(xiàn)對(duì)m6A甲基化修飾與消化道惡性腫瘤的相關(guān)研究進(jìn)展予以綜述，旨在為判斷腫瘤預(yù)后、尋求逆轉(zhuǎn)腫瘤放化療抗性和分子靶向治療的新策略提供新的線索。

1 m6A甲基化的概述

1.1m6A甲基化相關(guān)概念 據(jù)RNA修飾通路數(shù)據(jù)庫(kù)統(tǒng)計(jì)，截至2017年底，已在所有已知生物體中發(fā)現(xiàn)了約163種RNA化學(xué)修飾[6]。在這些化學(xué)修飾中，m6A甲基化修飾最普遍、豐度最高、最保守[2,7]，在最簡(jiǎn)單的細(xì)菌以及復(fù)雜動(dòng)物的幾乎所有類型的RNA中均存在m6A甲基化修飾。m6A甲基化修飾作為一種極其重要的RNA修飾，可調(diào)節(jié)關(guān)鍵的細(xì)胞過(guò)程，包括腫瘤干細(xì)胞更新以及細(xì)胞增殖、分化、對(duì)脫氧核糖核酸損傷的反應(yīng)等[8]，一旦相關(guān)細(xì)胞過(guò)程失調(diào)，則導(dǎo)致疾病發(fā)生，尤其是惡性腫瘤。

1.2m6A甲基化修飾相關(guān)酶 m6A甲基化修飾過(guò)程可逆，且有多種酶(腺苷甲基轉(zhuǎn)移酶、去甲基化酶和RNA結(jié)合蛋白)參與，此類酶可促進(jìn)、去除和識(shí)別m6A甲基化修飾位點(diǎn)，并傳遞m6A甲基化修飾信號(hào)至多個(gè)生物學(xué)過(guò)程[9]。參與m6A甲基化修飾的酶的異常，將導(dǎo)致一系列疾病(惡性腫瘤、血液系統(tǒng)疾病、神經(jīng)性疾病、肥胖、不孕、胚胎發(fā)育遲緩等)的發(fā)生[10-11]。參與m6A甲基化修飾的酶包括①腺苷甲基轉(zhuǎn)移酶，又稱寫入復(fù)合物，主要由甲基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(methyltransferase like protein，METTL)3[12]、METTL14[13]、RNA結(jié)合基序蛋白15/15B[14]、腎母細(xì)胞瘤1關(guān)聯(lián)蛋白[15]和vir-like甲基化轉(zhuǎn)移酶相關(guān)蛋白[16]組成，其中METTL3為催化核心，腎母細(xì)胞瘤1關(guān)聯(lián)蛋白為催化亞基，METTL14作為結(jié)構(gòu)支持，以穩(wěn)定METTL3-METTL14核心復(fù)合物，而RNA結(jié)合基序蛋白15/15B有助于將復(fù)合物募集到靶點(diǎn)，但目前對(duì)寫入復(fù)合物中vir-like甲基化轉(zhuǎn)移酶相關(guān)蛋白的作用尚未完全了解[17]。②去甲基化酶，又稱去除復(fù)合物，包括肥胖相關(guān)蛋白(fat mass and obesity-associated protein，F(xiàn)TO)[18]和烷基化修復(fù)同系物5(alkylation repair homolog 5，ALKBH5)[19]，它們能夠通過(guò)氧化作用選擇性地去除含m6A底物中的甲基，從而調(diào)節(jié)基因表達(dá)和細(xì)胞分化，使RNA甲基化成為一種可逆的動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)反應(yīng)。③讀取復(fù)合物，包括YT521-B同源(YT521-B homologous，YTH)結(jié)構(gòu)域蛋白[20]、真核起始因子3[14]、人胰島素樣生長(zhǎng)因子2 mRNA結(jié)合蛋白家族[21]和核不均一核糖核蛋白家族[22]，它們可以選擇性地識(shí)別mRNA的m6A位點(diǎn)，并參與下游翻譯，提高mRNA出核速度并介導(dǎo)mRNA的降解等[23]。

1.3m6A甲基化的檢測(cè)方法 在各種功能性RNA分子中存在大量的核苷酸修飾，其中最常見的內(nèi)部修飾包括m6A、N1-腺苷酸甲基化、5-甲基胞嘧啶等[24]。因此，特定位置RNA修飾的檢測(cè)十分必要，對(duì)后續(xù)鑒定影響RNA修飾的條件以及篩選負(fù)責(zé)修飾的相關(guān)基因和酶有關(guān)鍵作用。隨著高通量測(cè)序技術(shù)的出現(xiàn)，目前m6A甲基化檢測(cè)方法飛速發(fā)展。經(jīng)典的檢測(cè)技術(shù)主要有m6A甲基化RNA免疫共沉淀測(cè)序法[25-26]，它是應(yīng)用抗原抗體相結(jié)合的方法，利用m6A特異性抗體與帶有m6A的mRNA片段的結(jié)合、富集、純化進(jìn)行高通量測(cè)序，該方法操作簡(jiǎn)單、快速方便，僅能鑒定mRNA上m6A甲基化程度較高的區(qū)域，并且僅能將m6A定位在100～200 nt長(zhǎng)度，無(wú)法獲得單個(gè)堿基甲基化水平。隨后，m6A單核苷酸紫外交聯(lián)免疫共沉淀測(cè)序法出現(xiàn)[27]，該方法利用特異性抗體誘導(dǎo)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程中的突變和截?cái)?，從而鑒定單個(gè)核苷酸水平的甲基化修飾，但該方法涉及紫外交聯(lián)及P32同位素標(biāo)記，操作更加復(fù)雜，成本較高，故日常實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用相對(duì)較少。

基于以上兩種方法的局限性，目前m6A甲基化檢測(cè)新方法的研究仍在進(jìn)行。RNA修飾后核酸雙鏈體熔解特性發(fā)生改變，Golovina等[28]利用高分辨率熔解曲線分析并快速篩選出RNA中發(fā)生m6A甲基化修飾的特異性位點(diǎn)，該方法是一種簡(jiǎn)單、快速、低成本的聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增后檢測(cè)技術(shù)。此外，中山大學(xué)駱觀正教授團(tuán)隊(duì)與美國(guó)芝加哥大學(xué)何川教授領(lǐng)導(dǎo)團(tuán)隊(duì)合作開發(fā)了一種新型m6A甲基化水平鑒定方法，稱為m6A敏感性RNA內(nèi)切酶測(cè)序法，該方法突破了大樣本量的限制，且不需要依賴特異性抗原，僅通過(guò)特異性RNA內(nèi)切酶——毒素蛋白MazF，就能實(shí)現(xiàn)對(duì)m6A甲基化水平的檢測(cè)，且能夠精確到單堿基分辨率水平[29]。毒素蛋白MazF檢測(cè)RNA底物靈敏度、特異度均較高，在樣本量非常有限的前提下也能發(fā)揮作用，且實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)快速簡(jiǎn)化，不需要抗體富集，大大縮短了樣品制備時(shí)間，在很大程度上擴(kuò)大了m6A甲基化修飾的研究范圍。

2 m6A甲基化修飾與消化道腫瘤的關(guān)系

隨著m6A檢測(cè)方法的不斷優(yōu)化，m6A的相關(guān)研究范圍也不斷擴(kuò)大。最近的研究已經(jīng)證明，m6A甲基化修飾與多種消化道惡性腫瘤密切相關(guān)，如胃癌[30]、結(jié)直腸癌[31]、肝細(xì)胞癌[32]、胰腺癌[33]、食管癌[34]等，其相關(guān)修飾酶可作為癌基因或抑癌基因在惡性腫瘤的增殖[35]、分化、發(fā)生[36]、侵襲[36]和轉(zhuǎn)移[37]中起關(guān)鍵作用。

m6A甲基化修飾涉及多種修飾酶的作用，它們是調(diào)節(jié)癌變和腫瘤進(jìn)展的主要因素。然而，由于惡性腫瘤的高度異質(zhì)性，不同修飾酶在不同腫瘤中存在雙重作用(抑制或促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng))。當(dāng)m6A調(diào)控基因改變或與m6A甲基化相關(guān)酶的表達(dá)變化時(shí)，m6A靶向基因mRNA的水平將發(fā)生變化，從而導(dǎo)致惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展。通過(guò)系統(tǒng)性的回顧可了解m6A甲基化修飾對(duì)不同類型消化道腫瘤的調(diào)控作用。

2.1m6A甲基化修飾與胃癌 胃癌是第五大惡性腫瘤，據(jù)統(tǒng)計(jì)，2018年全球新發(fā)胃癌病例超過(guò)100萬(wàn)，死亡約78.3萬(wàn)[38]。近年來(lái)，胃癌病死率有所下降，但由于大多數(shù)患者確診時(shí)已為晚期，臨床治療效果較差。因此，胃癌發(fā)病的分子機(jī)制和治療靶標(biāo)仍需進(jìn)一步探索。

通過(guò)基因集富集系統(tǒng)性地分析m6A在胃癌中的生物學(xué)功能發(fā)現(xiàn)，寫入復(fù)合物以及讀取復(fù)合物是潛在的腫瘤抑制信號(hào)，而去除復(fù)合物則是胃癌的致癌信號(hào)。其中，可通過(guò)敲除METTL14的表達(dá)降低m6A水平激活Wnt和磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，以促進(jìn)胃癌細(xì)胞的增殖和侵襲，而通過(guò)敲除FTO表達(dá)增加m6A甲基化修飾則會(huì)逆轉(zhuǎn)分子信號(hào)通路，達(dá)到相反的效果[30]。然而，作為腺苷甲基轉(zhuǎn)移酶之一的METTL3基因則具有致癌作用，敲除METTL3基因可以降低B細(xì)胞淋巴瘤-2的表達(dá)，增加B細(xì)胞淋巴瘤-2相關(guān)X蛋白和胱天蛋白酶3的活性，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。此外，下調(diào)METTL3的表達(dá)可導(dǎo)致磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信號(hào)通路失活，從而抑制胃癌細(xì)胞的增殖和遷移[39]。由此可見，METTL3和METTL14均屬于腺苷甲基轉(zhuǎn)移酶，但在胃癌中的作用卻相反，這可能由腫瘤微環(huán)境的復(fù)雜性和高度的腫瘤異質(zhì)性所致，還值得進(jìn)一步探究。

2.2m6A甲基化修飾與結(jié)直腸癌 結(jié)直腸癌是全球高發(fā)的消化道惡性腫瘤之一，2018年全球結(jié)直腸癌新發(fā)病例超過(guò)180萬(wàn)，死亡88.1萬(wàn)[38]。由于多數(shù)結(jié)直腸癌患者就診時(shí)已為晚期，且疾病進(jìn)展快、易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，因此需要進(jìn)行廣泛深入的研究以提高結(jié)直腸癌的診斷和治療水平，并預(yù)測(cè)其復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。

Zhang等[31]研究發(fā)現(xiàn)，腎母細(xì)胞瘤1關(guān)聯(lián)蛋白與碳酸酐酶Ⅳ相關(guān)，其通過(guò)靶向腎母細(xì)胞瘤1結(jié)合蛋白-腎母細(xì)胞瘤1-轉(zhuǎn)導(dǎo)素β樣蛋白1軸抑制Wnt信號(hào)傳導(dǎo)，抑制腫瘤細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期停滯。Deng等[40]研究發(fā)現(xiàn)，METTL3陽(yáng)性表達(dá)與較長(zhǎng)的存活時(shí)間顯著相關(guān)，且METTL3過(guò)表達(dá)可抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，而METTL3下調(diào)則顯示出相反結(jié)果。此外，METTL3的下調(diào)可導(dǎo)致磷酸化-p38抗體和磷酸化-胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶的活化，p38或胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶抑制劑可以顯著逆轉(zhuǎn)METTL3基因敲除所誘導(dǎo)的遷移和侵襲。故推測(cè)，METTL3可能通過(guò)p38/胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶通路抑制結(jié)直腸癌的增殖、遷移和侵襲，因此，可將METTL3作為結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展新的標(biāo)志物。Liu等[41]分別對(duì)結(jié)腸腺癌標(biāo)本及直腸腺癌標(biāo)本進(jìn)行細(xì)化研究發(fā)現(xiàn)，在結(jié)腸腺癌標(biāo)本中，與正常組織相比，除METTL14、YTHDF3下調(diào)外，其他所有寫入復(fù)合物及讀取復(fù)合物均顯著上調(diào)；而直腸腺癌標(biāo)本與正常組織中的腎母細(xì)胞瘤1關(guān)聯(lián)蛋白、METTL16、核不均一核糖核蛋白C、YTHDC1比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Yang等[42]的研究證實(shí)，結(jié)腸腺癌和直腸腺癌標(biāo)本中去除復(fù)合物ALKBH5的表達(dá)均明顯弱于正常組織，但兩者中FTO的表達(dá)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Liu等[41]進(jìn)一步通過(guò)單因素Cox回歸分析發(fā)現(xiàn)，TNM分期及高M(jìn)ETTL3表達(dá)是結(jié)腸癌無(wú)復(fù)發(fā)生存期的重要預(yù)后因素，TNM分期和年齡是總生存期的預(yù)后因素，而TNM分期是直腸癌無(wú)復(fù)發(fā)生存期的唯一預(yù)后因素，年齡、TNM分期以及METTL14、METTL16和ALKBH5的表達(dá)對(duì)總生存期有重要影響；進(jìn)一步的多因素Cox回歸分析顯示，TNM分期是結(jié)腸癌患者總生存期的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，而METTL14、ALKBH5的表達(dá)以及TNM分期是直腸癌患者總生存期的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。可見，m6A相關(guān)基因表達(dá)失調(diào)在結(jié)直腸癌進(jìn)展中發(fā)揮重要作用，有望成為判斷結(jié)直腸癌患者預(yù)后的臨床生物標(biāo)志物。

2.3m6A甲基化修飾與肝細(xì)胞癌 肝癌是最常見的消化道惡性腫瘤之一，據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球每年新發(fā)肝癌病例約84.1萬(wàn)，死亡約78.2萬(wàn)[38]。目前肝癌的發(fā)病原因已明確，尤其在亞洲地區(qū)，乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒是肝癌發(fā)生發(fā)展的主要危險(xiǎn)因素。由于多數(shù)患者就診時(shí)已為中晚期，且處于肝硬化失代償狀態(tài)，治療效果欠佳。因此，從分子機(jī)制層面了解肝細(xì)胞癌發(fā)生、發(fā)展對(duì)于推進(jìn)診斷、治療及判斷預(yù)后至關(guān)重要。

通過(guò)綜合性分析m6A甲基化修飾相關(guān)酶在人類肝癌中的表達(dá)，Zhou等[32]發(fā)現(xiàn)，肝癌組織中的METTL3、YTHDF1、YTHDF2、YTHDF3和真核起始因子3均上調(diào)，且METTL3和YTHDF1是肝癌的獨(dú)立不良預(yù)后因素，均可調(diào)節(jié)肝癌細(xì)胞周期、RNA剪接、DNA復(fù)制、堿基切除修復(fù)和RNA降解。進(jìn)一步從分子機(jī)制層面分析發(fā)現(xiàn)，METTL3可促進(jìn)腫瘤抑制基因細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子2 mRNA 3′端的m6A甲基化修飾，從而通過(guò)YTHDF2依賴機(jī)制促進(jìn)細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子2 mRNA的降解，敲除METTL3的表達(dá)可以顯著降低肝癌細(xì)胞的增殖、遷移和集落形成[43]。此外，METTL14同樣作為腺苷甲基轉(zhuǎn)移酶，其下調(diào)是肝細(xì)胞癌無(wú)復(fù)發(fā)生存期的不良預(yù)后因素之一，下調(diào)METTL14可以減弱miR-126的表達(dá)，從而促進(jìn)肝癌轉(zhuǎn)移[37]。綜上分析，不同m6A 寫入復(fù)合物可能在肝癌進(jìn)展過(guò)程中起致癌(或抑癌)作用，METTL14作為肝癌的抑癌基因，與其他m6A寫入復(fù)合物的作用相反，這可能與肝癌細(xì)胞的異質(zhì)性有關(guān)，仍需進(jìn)一步研究。通過(guò)比較分析不同肝細(xì)胞癌患者的癌組織和正常組織發(fā)現(xiàn)，肝細(xì)胞癌細(xì)胞核中去甲基化酶FTO表達(dá)降低，且與AFP水平、腫瘤大小、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和脈管浸潤(rùn)相關(guān)，F(xiàn)TO表達(dá)降低患者的總生存期和無(wú)瘤生存期相對(duì)縮短[44]。在分子機(jī)制上，F(xiàn)TO通過(guò)M2型丙酮酸激酶的去甲基化，促進(jìn)翻譯產(chǎn)物產(chǎn)生，而敲除FTO基因表達(dá)可以抑制腫瘤增殖和體內(nèi)生長(zhǎng)，誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞G0/G1期阻滯[45]，表明FTO可能是肝細(xì)胞癌患者預(yù)后不良的重要預(yù)測(cè)因子。

2.4m6A甲基化修飾與胰腺癌 胰腺癌惡性程度較高，盡管多學(xué)科綜合治療不斷發(fā)展，但胰腺癌發(fā)現(xiàn)時(shí)往往已為晚期，患者的預(yù)后仍較差。因此，探索m6A甲基化修飾在胰腺癌中的機(jī)制至關(guān)重要。Xia等[33]對(duì)40例胰腺癌患者進(jìn)行系統(tǒng)性研究發(fā)現(xiàn)，METTL3高表達(dá)患者分期相對(duì)偏晚、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量較多、生存率偏低，且與癌旁組織相比，腫瘤組織標(biāo)本中的METTL3蛋白和mRNA水平明顯增高；敲除METTL3基因表達(dá)減少mRNA m6A甲基化修飾后，癌細(xì)胞增殖、侵襲和遷移減弱。因此，METTL3可能與胰腺癌發(fā)生有關(guān)，并可能作為胰腺癌預(yù)后指標(biāo)或治療靶點(diǎn)應(yīng)用于后續(xù)治療中。

去除復(fù)合物(如ALKBH5)也是胰腺癌總生存率的重要預(yù)測(cè)因子之一，ALKBH5高表達(dá)患者的總生存期相對(duì)較長(zhǎng)，說(shuō)明其對(duì)胰腺癌的發(fā)生、發(fā)展具有積極作用[46]。此外，Tang等[47]發(fā)現(xiàn)，通過(guò)吉西他濱建立的人源腫瘤組織異種移植模型的去甲基化酶ALKBH5表達(dá)下調(diào)，而沉默ALKBH5能顯著增加胰腺癌細(xì)胞在體內(nèi)外的增殖、遷移和侵襲，而ALKBH5過(guò)度表達(dá)則導(dǎo)致相反的結(jié)果。由此可見，腺苷甲基轉(zhuǎn)移酶高表達(dá)以及去甲基化酶低表達(dá)均在胰腺癌中占關(guān)鍵地位，而讀取復(fù)合物在胰腺癌中的作用仍有待研究。

2.5m6A甲基化修飾與食管癌 食管癌是最具侵襲性的惡性腫瘤之一，發(fā)病率位居全球惡性腫瘤的第七位，死亡率位居全球惡性腫瘤的第六位[38]。Yang等[34]分析食管癌鱗癌組織與鄰近正常組織的差異發(fā)現(xiàn)，腫瘤組織中YTHDC2表達(dá)下調(diào)，并通過(guò)細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，敲除YTHDC2基因可促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)，而YTHDC2過(guò)表達(dá)時(shí)效果則相反，說(shuō)明YTHDC2在食管鱗癌中發(fā)揮抑癌基因的作用；同時(shí)該研究從分子機(jī)制層面觀察到一些重要的癌癥相關(guān)通路被激活，包括p53、核因子κB、Janus激酶/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子等信號(hào)通路。進(jìn)一步對(duì)生存曲線的分析發(fā)現(xiàn)，ALKBH5、YTHDF2和METTL14的高表達(dá)與食管癌患者生存期延長(zhǎng)呈正相關(guān)，而核內(nèi)不均一核糖核蛋白C和WTAP的高表達(dá)則與總生存期呈負(fù)相關(guān)[48]，表明m6A 甲基化修飾相關(guān)酶在食管癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起重要作用，有望成為預(yù)測(cè)食管癌預(yù)后的重要分子標(biāo)志物。

3 m6A甲基化修飾與消化道腫瘤的治療

m6A甲基化修飾受到寫入復(fù)合物(METTL3、METTL14、WATP等)、讀取復(fù)合物(YTH結(jié)構(gòu)域蛋白、核不均一核糖核蛋白蛋白家族)和去除復(fù)合物(FTO、ALKBH5等)的調(diào)節(jié)，上述組成基因表達(dá)的變化將引起mRNA表達(dá)水平的改變，從而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲。因此，m6A甲基化修飾的相關(guān)調(diào)節(jié)劑或抑制劑可能是惡性腫瘤的潛在治療策略。

在靶向治療方面，碳酸酐酶Ⅳ可通過(guò)靶向腎母細(xì)胞瘤1結(jié)合蛋白-腎母細(xì)胞瘤1-轉(zhuǎn)導(dǎo)素β樣蛋白1軸抑制Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，進(jìn)而抑制結(jié)腸癌患者腫瘤細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期停滯[31]。METTL3通過(guò)p38/ERK通路抑制結(jié)直腸癌的增殖、遷移和侵襲[40]。此外，Huang等[49]研究發(fā)現(xiàn)了一種高度選擇性的FTO抑制劑——甲氯芬酸(一種非甾體抗炎藥)，其可與FTO結(jié)合位點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，增加m6A甲基化修飾，從而抑制腫瘤進(jìn)展。

在化放療方面，去甲基酶ALKBH5過(guò)表達(dá)可提高胰腺癌細(xì)胞對(duì)化療的敏感性[47]。而敲除胰腺癌細(xì)胞株METTL3基因表達(dá)的患者對(duì)吉西他濱、5-氟尿嘧啶和順鉑等抗腫瘤藥物以及放療的敏感性較高，提示METTL3是提高胰腺癌療效的有效靶點(diǎn)[50]。在食管癌中，METTL3表達(dá)與食管癌復(fù)發(fā)有關(guān)，提示METTL3過(guò)表達(dá)可能是食管癌患者鉑類藥物耐藥的關(guān)鍵因素，因此調(diào)節(jié)METTL3的表達(dá)可能是提高鉑類藥物療效的新方法[51]。

在免疫調(diào)節(jié)方面，通過(guò)敲除FTO基因表達(dá)可增加腫瘤細(xì)胞免疫治療敏感性[52]。Li等[53]發(fā)現(xiàn)，mRNA m6A甲基化修飾通過(guò)靶向白細(xì)胞介素-7/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子5/細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子通路調(diào)控T細(xì)胞穩(wěn)態(tài)，m6A甲基化修飾相關(guān)酶作為T細(xì)胞分化的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，在腫瘤免疫系統(tǒng)調(diào)控及腫瘤生長(zhǎng)和播散中發(fā)揮重要作用。

4 展 望

近年來(lái)，隨著m6A甲基化修飾檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，關(guān)于m6A甲基化修飾及其相關(guān)酶在腫瘤中作用的研究已經(jīng)取得實(shí)質(zhì)性進(jìn)展。m6A甲基化修飾是一把“雙刃劍”，一些基因的過(guò)度修飾可能改變RNA剪接和翻譯能力，導(dǎo)致惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展，而有些基因在缺乏m6A甲基化修飾時(shí)，可能導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。由于腫瘤的異質(zhì)性，相同寫入復(fù)合物、去除復(fù)合物、讀取復(fù)合物在不同腫瘤中的作用亦不同，可表現(xiàn)為癌基因或抑癌基因，但均通過(guò)蛋白質(zhì)表達(dá)的失調(diào)引發(fā)或促進(jìn)腫瘤進(jìn)展，這為腫瘤的治療指明了方向。針對(duì)m6A甲基化修飾的相關(guān)酶在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的調(diào)控機(jī)制仍需深入探索，未來(lái)關(guān)于m6A甲基化修飾功能的研究將有重大突破，其中恢復(fù)m6A甲基化的理想水平是治療的關(guān)鍵，更多m6A甲基化修飾相關(guān)酶的調(diào)節(jié)劑和競(jìng)爭(zhēng)性拮抗劑的發(fā)現(xiàn)，對(duì)精準(zhǔn)、有效的m6A靶向藥物的研發(fā)具有重要意義。