張?jiān)?，宮志遠(yuǎn)，姚 強(qiáng)**，黃春燕，韓建東，司洪宇，梁曉輝，臧秀霞，李兆榮，李 瑾，謝紅艷，楊 鵬

（1.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所 農(nóng)業(yè)部廢棄物基質(zhì)化利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 濟(jì)南 250100 2.山東省科學(xué)院能源研究所 山東省生物質(zhì)氣化技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 濟(jì)南 250000；3.濟(jì)寧忠誠農(nóng)業(yè)科技股份有限公司，山東 濟(jì)寧 272000）

真姬菇 [Hypsizygus marmoreus（Peck） H.E.Bigelow]又名玉蕈、斑玉蕈、假松茸、蟹味菇等，隸屬擔(dān)子菌亞門（Basidiomycotina） 層菌綱（Hymenomycetes） 傘菌目 （Agaricales） 白蘑科 （Tricholomataceae） 玉蕈屬 （Hypsizigus）[1-3]。主要生長(zhǎng)在日本、歐洲、北美、西伯利亞等地，我國主要分布于山東、上海、福建等地，野生種秋天群生于闊葉樹朽木上[4-5]。真姬菇分為白色系品種和淺灰色系品種[6]，子實(shí)體形態(tài)具觀賞性、口感清脆細(xì)膩且獨(dú)特[7]。因其具有抗氧化功能，且富含多糖、蛋白質(zhì)及多種必需氨基酸[8-10]而深受消費(fèi)者青睞，是極具發(fā)展前景的珍稀食用菌[11]。

真姬菇傳統(tǒng)生產(chǎn)的栽培基質(zhì)主要以柞木屑、棉籽殼、麥麩等為主[12-15]，其中柞木屑是傳統(tǒng)栽培配方的主體原料，比例占總量的一半以上。因受環(huán)保和國內(nèi)原料市場(chǎng)價(jià)格波動(dòng)等因素的影響，生產(chǎn)成本逐年增加，影響企業(yè)的生產(chǎn)效益，限制食用菌產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。此外，大量的農(nóng)林生產(chǎn)廢棄物被隨意丟棄或焚燒造成資源浪費(fèi)和環(huán)境污染，利用農(nóng)林廢棄物代替木屑作為食用菌栽培基質(zhì)已成為工廠化生產(chǎn)發(fā)展趨勢(shì)[16-17]。研究表明，食用菌菌糠、作物秸稈、谷殼等廉價(jià)且具有栽培潛力的農(nóng)林廢棄物，已投入到金針菇（Flammulina velutiper）、平菇 （Pleurotus ostreatus） 等食用菌品種的工廠化生產(chǎn)[18-19]。真姬菇白色品系與淺灰色品系栽培條件存在一定差異，試驗(yàn)以真姬菇灰色品系為研究對(duì)象，通過原料替換及比例調(diào)整，篩選適宜山東地區(qū)真姬菇生產(chǎn)、降本增效的新型配方，旨在為真姬菇工廠化生產(chǎn)提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

試驗(yàn)所用真姬菇菌種X-12，由山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所保藏提供。

1.2 菌種培養(yǎng)基

母種培養(yǎng)基：PDA培養(yǎng)基；液體培養(yǎng)基：白砂糖0.3%、玉米粉0.3%、磷酸二氫鉀0.05%、硫酸鎂0.05%，水 1 L[20]。

1.3 試驗(yàn)配方

共設(shè)計(jì)8組配方，每組配方試驗(yàn)設(shè)3次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)24袋，具體配方及比例見表1。

表1 真姬菇栽培試驗(yàn)培養(yǎng)基配方Tab.1 Cultivation test medium formula of Hypsizygus marmoreus

依照表1配方比例稱取原料，加水混合攪拌均勻，含水量控制在62%?65%。栽培袋為17 cm×33 cm×0.005 cm的聚丙烯袋，通過裝料、壓實(shí)、打孔、封蓋、高壓滅菌等步驟進(jìn)行菌袋制作，冷卻后接種并移入發(fā)菌室。黑暗條件下恒溫22℃、濕度70%、CO2濃度為3 000 mL·m-3培養(yǎng)85 d?90 d，搔菌處理后移入出菇室。根據(jù)真姬菇出菇不同階段生長(zhǎng)特性進(jìn)行環(huán)境參數(shù)調(diào)控。發(fā)菌培養(yǎng)期間注意觀察并記錄菌絲生長(zhǎng)狀況，準(zhǔn)確記錄各配方菌絲滿袋時(shí)間；出菇階段記錄子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育情況，測(cè)量子實(shí)體產(chǎn)量、品質(zhì)等各項(xiàng)指標(biāo)。

1.4 菌絲生長(zhǎng)測(cè)定方法

記錄菌絲長(zhǎng)至袋肩、袋中間以及滿袋時(shí)間及菌絲生長(zhǎng)情況并進(jìn)行分析。平均生長(zhǎng)速度為長(zhǎng)至袋肩、袋中間及滿袋時(shí)生長(zhǎng)速度平均值，其公式為：

式中：V為菌絲生長(zhǎng)速度（mm·d-1）；S為菌絲長(zhǎng)度（cm）；D為菌絲生長(zhǎng)天數(shù)（d）。

菌絲生理成熟參考標(biāo)準(zhǔn)為菌袋有效積溫是否達(dá)到2 500℃?2 800℃。菌絲完成發(fā)菌階段所需要的有效積溫（K，℃）計(jì)算方法為：

式中：D為菌絲生長(zhǎng)天數(shù)（d）；T為菌絲生長(zhǎng)期間的平均溫度（℃）；C為真姬菇菌絲的生長(zhǎng)閾溫度（℃）。

1.5 子實(shí)體性狀測(cè)定

檢測(cè)各配方的真姬菇平均產(chǎn)量、子實(shí)體外觀性狀，并計(jì)算生物學(xué)效率（BE，%），公式為：

式中：Ffw表示食用菌子實(shí)體鮮重（g）；Sdw表示栽培基質(zhì)干重（g）。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試配方對(duì)真姬菇菌絲體生長(zhǎng)的影響

不同栽培配方真姬菇的菌絲生長(zhǎng)情況統(tǒng)計(jì)見表2。

表2 供試配方對(duì)真姬菇菌絲生長(zhǎng)情況Tab.2 Mycelium growth of Hypsizygus marmoreus with different formulas

由表2可知，配方1?配方3菌絲的發(fā)菌時(shí)間、菌絲生長(zhǎng)速度及菌絲外觀形態(tài)數(shù)據(jù)對(duì)比表明，以玉米芯、棉籽殼為主料及以木屑為主料栽培真姬菇的菌絲生長(zhǎng)速度及形態(tài)外觀表現(xiàn)相似，且玉米芯為主料栽培菌絲后熟期縮短3 d?5 d，菌絲生長(zhǎng)速度也有所提高。配方6的長(zhǎng)勢(shì)最優(yōu)，菌絲后熟期天數(shù)為85 d，菌絲平均生長(zhǎng)速度為8.41 mm·d-1，菌絲體潔白、粗壯、濃密、長(zhǎng)勢(shì)旺盛。配方5次之，菌絲后熟期天數(shù)為85 d，菌絲平均生長(zhǎng)速度為8.39 mm·d-1，菌絲表現(xiàn)與配方6相似。配方8效果最差，菌絲生長(zhǎng)速度雖然優(yōu)于其他組（8.48 mm·d-1），后熟期天數(shù)為84 d，但菌絲長(zhǎng)勢(shì)較弱，菌絲纖細(xì)且較稀疏，菌袋內(nèi)部有黃斑跡象。

2.2 供試配方對(duì)真姬菇產(chǎn)量、子實(shí)體性狀及生物學(xué)效率的影響

不同栽培配方真姬菇產(chǎn)量、子實(shí)體性狀及生物學(xué)效率統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表3。

表3 真姬菇產(chǎn)量、子實(shí)體性狀及生物學(xué)效率Tab.3 Fruit body traits and biological efficiency of Hypsizygus marmoreus

由表3可知，玉米芯代替木屑作為主料栽培真姬菇的產(chǎn)量略有提升，真姬菇綜合性狀最優(yōu)為配方6，平均單產(chǎn)為466.1 g/袋，生物學(xué)效率為103.58%；其次為配方5，平均單產(chǎn)為452.5 g/袋，生物學(xué)效率為100.56%；試驗(yàn)表現(xiàn)最差為配方8，平均單產(chǎn)為402.3 g/袋，生物學(xué)效率為89.4%。由各組子實(shí)體菌柄長(zhǎng)度、菌柄直徑、菌蓋直徑、菌蓋厚度等指標(biāo)可以看出，配方5、配方6子實(shí)體表現(xiàn)性狀明顯優(yōu)于其他配方。

2.3 供試配方對(duì)真姬菇商品性狀及長(zhǎng)勢(shì)的影響

不同配方真姬菇性狀及長(zhǎng)勢(shì)情況統(tǒng)計(jì)見表4。

表4 真姬菇長(zhǎng)勢(shì)及商品性狀Tab.4 Growth and commercial charactersof Hypsizygus marmoreus

由表4可知，不同的栽培基質(zhì)配方對(duì)真姬菇菌絲體的長(zhǎng)勢(shì)、吃料程度等會(huì)有影響。所有配方真姬菇采收期幾乎不開傘，菌蓋灰黑色、菌柄潔白，配方5、配方6試驗(yàn)結(jié)果表現(xiàn)優(yōu)異，商品性狀良好，口感脆嫩且菌叢致密；配方4、配方7，表現(xiàn)次之，配方3子實(shí)體口感稍有韌性；配方8菌袋內(nèi)出現(xiàn)黃斑，口感稍遜于其它配方。配方1?配方3對(duì)比可知玉米芯代替木屑做為栽培主料商品性狀表現(xiàn)相似。

3 小結(jié)

試驗(yàn)結(jié)果表明，以玉米芯代替?zhèn)鹘y(tǒng)柞木屑為主料栽培真姬菇可以獲得較優(yōu)的栽培效果。隨著玉米芯添加量的增加，菌絲萌發(fā)、子實(shí)體產(chǎn)量、外觀表現(xiàn)性狀等性狀差異不明顯。配方中適當(dāng)提高氮源，如甜菜渣、米糠、麩皮等的比例，可提高菌絲萌發(fā)速度，菌絲培養(yǎng)期可縮短3 d?5 d，產(chǎn)量和生物學(xué)效率提高約5%，基其中以配方6栽培效果最優(yōu)。真姬菇對(duì)培養(yǎng)基質(zhì)內(nèi)氮素營養(yǎng)要求較高，適合富營養(yǎng)栽培，此結(jié)果與賀立虎等[14]的研究結(jié)果相似。

工廠實(shí)際生產(chǎn)當(dāng)中，影響真姬菇產(chǎn)量、商品性狀的因素還有很多，如栽培料孔隙度大小、打孔深度、營養(yǎng)成分及比例細(xì)化、菌種等對(duì)其出菇效果皆有影響[21-22]。為提高食用菌生產(chǎn)效率，根據(jù)真姬菇生理機(jī)制和栽培基質(zhì)理化特性，進(jìn)一步細(xì)化真姬菇培養(yǎng)基養(yǎng)分調(diào)節(jié)比例，篩選真姬菇工廠化生產(chǎn)最適培養(yǎng)因素，還需進(jìn)一步探究。