梅 濤，李曉英，張 琳，朱榮平

(常州市婦幼保健院新生兒科，江蘇 常州 213000)

新生兒ABO溶血病(hemolytic disease of newborn，HDN)是新生兒常見(jiàn)的疾病之一，發(fā)病原因?yàn)槟阁w與新生兒血型不同而出現(xiàn)同族免疫性溶血反應(yīng)，HDN是新生兒血清總膽紅素(total bilirubin，TBIL)升高的主要原因之一[1]。血清TBIL水平過(guò)高會(huì)導(dǎo)致一系列臨床癥狀出現(xiàn)，常見(jiàn)有黏膜、皮膚、鞏膜黃染等，持續(xù)升高還會(huì)出現(xiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷，同時(shí)對(duì)患兒心、肝、肺、腎等多處臟器造成損傷，患兒出現(xiàn)壞死性小腸結(jié)腸炎(necrotizing enterocolitis，NEC)的可能性也會(huì)增大[2-3]。因此，改善新生兒溶血反應(yīng)，降低TBIL水平是臨床預(yù)防HDN相關(guān)并發(fā)癥的主要手段[4]。目前，臨床降低TBIL水平主要采用藍(lán)光療法、靜脈滴注白蛋白，其對(duì)病情較輕的患兒療效較好，但對(duì)病情危重、黃疸發(fā)生早的患兒治療耗時(shí)較長(zhǎng)[5]。為了盡快改善患兒臨床癥狀，降低并發(fā)癥發(fā)生率，臨床需要找到更多方法對(duì)患兒進(jìn)行干預(yù)治療。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，益生菌可以調(diào)節(jié)人體腸道菌群，對(duì)NEC具有預(yù)防作用，但目前臨床上關(guān)于益生菌對(duì)HDN患兒的預(yù)防作用研究結(jié)果較少[6]?；诖?，本研究采用病例對(duì)照的方法，對(duì)78例HDN新生兒進(jìn)行治療，探討其對(duì)HDN患兒的干預(yù)效果。

1資料與方法

1.1一般資料

本研究選取2019年9月至2020年9月于常州市婦幼保健院分娩的78例HDN新生兒為研究對(duì)象，將其隨機(jī)分為觀察組與對(duì)照組，各39例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①母兒血清學(xué)溶血檢查符合《小兒內(nèi)科學(xué)》HDN診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]：母親血型為O型，患兒血型為A型或B型，患兒伴有黃疸表現(xiàn)，血清學(xué)檢測(cè)抗體釋放試驗(yàn)陽(yáng)性、抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性或游離抗體試驗(yàn)陽(yáng)性；②監(jiān)護(hù)人自愿參加并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有消化道畸形、復(fù)雜性先天性心臟病等各種先天性畸形；②染色體改變者或先天性宮內(nèi)感染者；③藥物過(guò)敏者。本研究獲我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組HDN患兒基礎(chǔ)資料比較Table 1 Comparison of basic data between the two groups of HDN

1.2研究方法

對(duì)照組采用常規(guī)治療，包括糾正酸中毒、補(bǔ)液等退黃措施，藍(lán)光照射7d，靜脈注射10%人血白蛋白(進(jìn)口藥品注冊(cè)證號(hào)S20160018)，劑量為1g/kg，使用1～3d。觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上服用益生菌，益生菌制劑為培菲康(雙歧桿菌三聯(lián)活菌散，國(guó)藥準(zhǔn)字S10970104)，低于40℃沖服，或結(jié)合母乳、配方奶沖服，2.0g/袋，每次1/4袋，2次/d，持續(xù)治療7d。

1.3觀察指標(biāo)

①測(cè)定兩組治療前、治療7d后TBIL、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(red blood count，RBC)、血紅蛋白(hemoglobin，Hb)水平：采用OLYMPUS AU5400生化檢測(cè)儀測(cè)定TBIL水平，采用美國(guó)生產(chǎn)的COULTER ACT 5diff AL儀檢測(cè)RBC、Hb水平；②統(tǒng)計(jì)兩組NEC發(fā)生率，參考Bell標(biāo)準(zhǔn)診斷[8]；③測(cè)定兩組治療前后腸屏障功能：采用分光光度計(jì)法測(cè)定二胺氧化酶(diamine oxidase，DAO)、D-乳酸水平，其中DAO活力測(cè)定采用南京建成科技有限公司DAO試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)20120926)，D-乳酸水平測(cè)定采用成都博世生物技術(shù)提供的D-乳酸試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)BD0405)，測(cè)定時(shí)點(diǎn)同①；④測(cè)定兩組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群水平：采用流式細(xì)胞檢測(cè)法檢測(cè)CD4+、CD8+水平，并計(jì)算CD4+/CD8+比值，儀器為美國(guó)BD公司的流式細(xì)胞儀CantoⅡ。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

2.1兩組HDN患兒治療前后TBIL、RBC及Hb水平比較

治療前兩組TBIL、RBC及Hb水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，治療后兩組TBIL、RBC及Hb水平均低于治療前，且治療后觀察組TBIL水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.776，P<0.05)，治療后兩組RBC、Hb水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表2 兩組HDN患兒治療前后TBIL、RBC及Hb水平比較Table 2 Comparison of TBIL,RBC and Hb levels before and after treatmentin the two groups of HDN

2.2兩組HDN患兒NEC發(fā)生率比較

觀察組NEC發(fā)生1例(2.56%)，對(duì)照組發(fā)生7例(17.95%)，觀察組NEC發(fā)生率低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.014，P<0.05)。

2.3兩組HDN患兒治療前后腸屏障功能比較

治療前兩組DAO、D-乳酸水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，治療后觀察組DAO、D-乳酸水平低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t值分別為8.184、9.017，P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 兩組HDN患兒治療前后腸屏障功能比較Table 3 Comparison of intestinal barrier function between the two groups ofHDN children before and after

2.4兩組HDN患兒治療前后T淋巴細(xì)胞水平比較

治療前兩組CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，治療后觀察組CD4+、CD4+/CD8+高于對(duì)照組，CD8+低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t值分別為6.272、6.251、3.006，P<0.05)，見(jiàn)表4。

表4 兩組HDN患兒治療前后T淋巴細(xì)胞亞群水平比較Table 4 Comparison of T lymphocyte subsets before and after treatment between the two groups of

3討論

ABO血型不合是新生兒發(fā)生HDN的常見(jiàn)原因，HDN是患兒體內(nèi)TBIL升高的主要原因之一，TBIL升高會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)一系列并發(fā)癥，NEC是常見(jiàn)并發(fā)癥之一[9]。NEC作為一種炎癥性腸病，其發(fā)病率及死亡率均較高，臨床表現(xiàn)為腹脹、嘔吐等，嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)霈F(xiàn)暫時(shí)性休克，威脅患兒生命安全。因此，臨床需及時(shí)采取有效措施降低TBIL水平及HDN并發(fā)癥發(fā)生率[10]。

3.1益生菌治療HDN患兒可顯著改善患兒TBIL水平

本研究中，治療后兩組TBIL、RBC及Hb水平顯著低于治療前，治療后觀察組TBIL水平顯著低于對(duì)照組，治療后兩組RBC、Hb水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示益生菌治療HDN患兒可顯著改善患兒TBIL水平，但對(duì)RBC、Hb水平改善不明顯。其原因可能為益生菌可以調(diào)節(jié)人體胃腸道菌群構(gòu)成比例及數(shù)量，增加腸道內(nèi)厭氧類(lèi)菌群數(shù)量，降低有害菌群的數(shù)量，改善腸道微生態(tài)平衡，同時(shí)具有一定抗感染作用。另外，益生菌可通過(guò)減少結(jié)合TBIL分解來(lái)降低未結(jié)合TBIL數(shù)量，還可通過(guò)刺激腸道蠕動(dòng)來(lái)使TBIL從腸道內(nèi)排出，以此降低TBIL水平[11]。益生菌對(duì)RBC、Hb水平改善不明顯可能是樣本量較小、治療時(shí)間較短所致，還需要長(zhǎng)期的觀察。

3.2益生菌治療HDN患兒可顯著降低NEC發(fā)生率，改善患者腸屏障功能

本研究觀察組NEC發(fā)生率低于對(duì)照組，治療后觀察組DAO、D-乳酸水平低于本組治療前及對(duì)照組治療后，提示益生菌治療HDN患兒可顯著降低NEC發(fā)生率，改善患者腸屏障功能。有學(xué)者對(duì)817例新生兒HDN并發(fā)新生兒NEC的高危因素分析發(fā)現(xiàn)，未發(fā)生NEC的新生兒使用益生菌治療的占比顯著高于發(fā)生NEC的新生兒，表明益生菌對(duì)HDN患兒發(fā)生NEC具有較好預(yù)防作用，與本次研究結(jié)果相符[12]。其原因分析如下：益生菌可以補(bǔ)充腸道所需的正常菌群如雙歧桿菌、乳酸桿菌、酵母菌等，刺激其生長(zhǎng)與繁殖，同時(shí)抑制外源細(xì)菌定植和內(nèi)源致病菌如致病性大腸桿菌、葡萄球菌、腸球菌等過(guò)度繁衍，以此調(diào)節(jié)腸道內(nèi)菌群微生態(tài)平衡，提高腸屏障功能，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，恢復(fù)腸道吸收消化功能，降低NEC發(fā)生率[13]。同時(shí)益生菌在酸性環(huán)境和膽汁中穩(wěn)定，在腸黏膜定植并進(jìn)行黏附，使腸道產(chǎn)生抗微生物的物質(zhì)修復(fù)腸黏膜，還可通過(guò)促進(jìn)腸上皮細(xì)胞粘蛋白分泌來(lái)改善患者腸屏障功能[14]。

3.3益生菌治療HDN新生兒可顯著提高患兒機(jī)體免疫功能

本研究中，治療后觀察組CD4+、CD4+/CD8+高于本組治療前及對(duì)照組治療后，CD8+低于本組治療前及對(duì)照組治療后，提示益生菌治療HDN新生兒可顯著提高患兒機(jī)體免疫功能。益生菌主要通過(guò)對(duì)細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用來(lái)對(duì)T淋巴細(xì)胞免疫作用產(chǎn)生影響，一方面，益生菌可調(diào)節(jié)樹(shù)突狀細(xì)胞對(duì)T淋巴細(xì)胞的調(diào)控；另一方面，益生菌還可以通過(guò)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，影響細(xì)胞因子的產(chǎn)生，激活巨噬細(xì)胞，以此提高患兒機(jī)體適應(yīng)性免疫功能和固有免疫能力，改善CD4+/CD8+比值[15]。

綜上，益生菌治療HDN新生兒可顯著降低TBIL水平，降低新生兒NEC發(fā)生率，改善患兒腸屏障功能和機(jī)體免疫功能，值得臨床推廣。