馬文學(xué)
青海省西寧市大通回族土族自治縣城關(guān)鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站,青海大通810102
大通縣養(yǎng)羊業(yè)發(fā)展迅速,全縣羊只飼養(yǎng)量和飼養(yǎng)密度逐年增大,致使大腸桿菌病呈高發(fā)態(tài)勢,特別是在春產(chǎn)季節(jié),4 周齡內(nèi)羔羊25%以上出現(xiàn)劇烈腹瀉和敗血癥狀,發(fā)病急,病死率高達(dá)65%以上,羔羊致病性大腸桿菌病已在大通地區(qū)呈地方性流行,針對本病需做到早診斷、早治療,從而降低死亡率,避免牧民群眾遭受嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。
羔羊致病性大腸桿菌病一年四季均可發(fā)生,以冬春舍飼時(shí)期1~8 周齡羔羊多發(fā),發(fā)病率達(dá)25%~30%[1]。帶菌羊和病羔羊作為該病重要傳染源,健康羔羊飲用被致病菌(經(jīng)糞便排出后散布于外界)污染的飼料、水源或吮吸被致病菌污染的母畜乳頭,通過消化道感染。飼養(yǎng)擁擠、飼管不善、消毒不嚴(yán)格以及天氣突變等因素均能促使該病的發(fā)生與流行。
1 周齡內(nèi)的幼羔多發(fā),體溫升高達(dá)41.5 ℃,繼而下痢,排灰白色稀糊狀惡臭糞液,夾雜氣泡、凝乳塊,重癥病羔羊腸黏膜在毒素(致病性大腸桿菌在腸道大量繁殖而產(chǎn)生)作用下受損脫落,腸壁變薄,血管破裂,以致糞液混有血液。病畜腹痛、弓背顯著,精神萎靡,體弱、臥地,終因脫水、衰竭而死亡。剖檢病變可見尸體脫水嚴(yán)重,腸胃內(nèi)容物為半液狀呈黃灰色,腸系膜淋巴結(jié)腫大、充血,切面多汁。
2~6 周齡的羔羊多發(fā),病羔體溫升高達(dá)42 ℃,精神頹廢,拒食,頭歪向一側(cè),運(yùn)動(dòng)失調(diào),倒地后頭后仰、磨牙,四肢呈泳狀劃動(dòng),個(gè)別病畜關(guān)節(jié)腫脹、跛行,鼻流黏液、口吐白沫、呼吸急速,大多于發(fā)病后數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡。剖檢病死羊發(fā)現(xiàn)心包、胸腹腔大量積液;網(wǎng)胃和真胃發(fā)生不同程度的水腫;脾臟、腎臟、肝臟腫大出血,肺臟水腫淤血;腕關(guān)節(jié)和肘關(guān)節(jié)腫大,關(guān)節(jié)腔蓄積纖維素性液;腦膜充血、出血。
無菌采取病死羔羊肝臟、心包液和腸系膜淋巴結(jié)等組織作病料,將病料接種至鮮血營養(yǎng)瓊脂平板中,在37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)24 h 后觀察到明顯的溶血現(xiàn)象,灰白色圓形凸起菌落周圍形成溶血環(huán)(1~2 mm),挑選溶血菌株接種在麥康凱、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上繼續(xù)恒溫(37 ℃)培養(yǎng)24 h 發(fā)現(xiàn)2 種培養(yǎng)基上分別為紅色菌落(麥康凱培養(yǎng)基上)和帶金屬光澤的菌落(伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上)[2],將培養(yǎng)物革蘭氏染色鏡檢可見兩端鈍圓、無芽孢、無莢膜、紫紅色革蘭氏陰性短桿菌。
將分離純化菌接種至細(xì)菌微量生化反應(yīng)管,培養(yǎng)72 h 后觀察試驗(yàn)項(xiàng)目葡萄糖、吲哚、乳糖、麥芽糖、鼠李糖、阿拉伯糖、MR、VP、甘露醇、蛋白胨水結(jié)果均為陽性(+),枸鹽酸鹽、尿素、硫化氫、硝酸鹽還原、山梨醇、蔗糖、苯丙氨酸脫酸梅、精氨酸雙水解酶結(jié)果均為陰性(-),與大腸桿菌生化特性相符。
提取分離純化菌DNA,經(jīng)細(xì)菌16S rDNA 通用引物進(jìn)行PCR 擴(kuò)增,擴(kuò)增的PCR 產(chǎn)物膠回收測序,測序結(jié)果經(jīng)NCBI 進(jìn)行BLAST,結(jié)果判定該株分離菌為大腸桿菌[1]。
1)根據(jù)文獻(xiàn)[2]中所做的藥敏試驗(yàn)結(jié)果,致病菌對多粘菌素E、諾氟沙星、氧氟沙星、呋喃妥因、桿菌肽等藥物高度敏感,為臨床治療用藥提供了參考依據(jù),同時(shí)對臨床出現(xiàn)腦神經(jīng)癥狀或臥地不起的重癥病畜還需采取強(qiáng)心補(bǔ)液、預(yù)防酸中毒等措施。建議有條件的養(yǎng)殖戶自己進(jìn)行藥敏試驗(yàn),根據(jù)藥敏結(jié)果選用高敏感性藥物治療。
2)羊群飼養(yǎng)管理不當(dāng)、飼養(yǎng)密度過大、養(yǎng)殖環(huán)境消毒不嚴(yán)格,為各種病菌大量滋生繁殖提供了條件,加之春季氣候多變,羔羊營養(yǎng)不良,極易誘發(fā)大腸桿菌病。日常要做好妊娠母羊的營養(yǎng)管理和羔羊保暖工作,供給母羊全價(jià)飼料,羔羊及時(shí)吃足初乳,提早補(bǔ)飼,避免飼料突換,同時(shí)保持羊只飼養(yǎng)密度合理,羊舍清潔干燥。
3)堅(jiān)持嚴(yán)格的消毒制度,強(qiáng)化養(yǎng)殖場地、用具的消毒,羔羊吮乳前先使用0.1%高錳酸鉀溶液擦拭母羊乳頭;同時(shí)懷孕母羊產(chǎn)前30~50 d 接種大腸桿菌的多血清型制備的滅活疫苗,初生羔羊能夠有效獲得母源抗體的保護(hù),對羔羊致病性大腸桿菌病起到良好的預(yù)防效果。