王懷樹(shù)，白銀鎖，王建國(guó)，任 佳，卓 娜，高如軍，武玉平，梁建勇，4

（1.鄂爾多斯市杭錦旗綠美農(nóng)牧業(yè)開(kāi)發(fā)有限責(zé)任公司，內(nèi)蒙古 杭錦旗 017400；2.內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院，內(nèi)蒙古呼和浩特 010031；3.鄂爾多斯市杭錦旗農(nóng)牧技術(shù)推廣中心，內(nèi)蒙古 杭錦旗 017400；4.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，甘肅 蘭州

730070）

苜蓿含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)及微量元素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，是家畜的優(yōu)質(zhì)蛋白飼料［1］。 苜蓿也含有較大比例的膳食纖維， 能夠提高母豬生產(chǎn)性能，改善腸道微生物區(qū)系，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收，提升母豬營(yíng)養(yǎng)水平［2］。 研究表明，在母豬妊娠期日糧中添加苜蓿能顯著降低刻板行為和便秘的發(fā)生次數(shù)，顯著提升繁殖性能［3］，提高仔豬初生重和斷奶時(shí)體重［4-5］。 另外，在妊娠母豬日糧中添加不同比例的紫花苜蓿鮮草和苜蓿青貯， 可改善母豬生產(chǎn)性能以及血液和初乳理化指標(biāo)［6］。 苜蓿纖維可增加采食的日糧體積，提高母豬飽食感［7］，減少異常行為［8］，高纖維對(duì)母豬腸道微生物菌群變化及其代謝物的組成有積極影響， 從而改善腸道功能［9］，減少疾病，在一定程度上提高母豬的繁殖性能和養(yǎng)殖效益［10］。 生產(chǎn)上通常通過(guò)提高麩皮比例和添加青綠飼料改變?nèi)焉锬肛i日糧的纖維水平［11-12］，緩解妊娠母豬因過(guò)度飼喂產(chǎn)生的異常行為。

苜蓿草粉中的粗蛋白質(zhì)含量接近蛋白質(zhì)飼料要求，且氨基酸平衡，賴氨酸含量高。在養(yǎng)豬業(yè)中，關(guān)于苜蓿飼喂效果的研究多集中在生長(zhǎng)肥育豬方面［13-17］，對(duì)苜蓿草粉在妊娠母豬飼糧中的應(yīng)用研究較少。為此，該試驗(yàn)在母豬妊娠后期飼糧中添加不同比例的苜蓿草粉， 研究對(duì)母豬繁殖性能以及血清生化、抗氧化和免疫指標(biāo)的影響，為苜蓿在妊娠母豬生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)

該試驗(yàn)在內(nèi)蒙古鄂爾多斯市杭錦旗綠美農(nóng)牧業(yè)開(kāi)發(fā)有限責(zé)任公司養(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用苜蓿草由該養(yǎng)殖場(chǎng)種植， 在花前期刈割，經(jīng)自然干燥，加工成草粉，營(yíng)養(yǎng)成分含量為干物質(zhì)87.5%， 粗蛋白18.0%， 粗纖維23.0%，鈣1.65%，磷0.35%。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，根據(jù)胎次（1胎）、體況、預(yù)產(chǎn)期等基本相近原則，選擇40 頭妊娠后期的大長(zhǎng)母豬作為試驗(yàn)動(dòng)物。 將試驗(yàn)?zāi)肛i隨機(jī)分為4 組，每組10 頭，每頭母豬及其產(chǎn)仔代表一個(gè)生物學(xué)重復(fù)。 4 組母豬日糧中分別添加0（對(duì)照組）、5%（5%苜蓿草粉組）、10%（10%苜蓿草粉組）和15%（15%苜蓿草粉組）的苜蓿草粉。 母豬配種后確定妊娠85 d 進(jìn)入試驗(yàn)期， 分娩后試驗(yàn)結(jié)束。

1.4 試驗(yàn)日糧及營(yíng)養(yǎng)水平

試驗(yàn)期間飼喂的日糧參考《豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 65—2004）配制，滿足妊娠后期母豬和哺乳母豬的營(yíng)養(yǎng)需要，飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.5 試驗(yàn)?zāi)肛i飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)?zāi)肛i從入選試驗(yàn)當(dāng)天開(kāi)始飼喂試驗(yàn)飼糧，每日2 次（8：00、17：00 各1 次），自由飲水。 在妊娠后期日飼喂量為3.2 kg/頭。

1.6 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.6.1 繁殖性能指標(biāo)仔豬出生12 h 內(nèi)記錄每頭母豬的產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)，測(cè)定仔豬初生窩重、初生個(gè)體重［18］。

1.6.2 血清生化、抗氧化、免疫指標(biāo)

1.6.2.1 血樣采集及血清制備在妊娠第111 天，晨飼前每組隨機(jī)選取5 頭母豬，前腔靜脈采血10mL，將新鮮血液移入5 mL 采血管，靜置30 min，待析出血清時(shí)3 000 r/min 離心10 min， 然后吸取上清液，用2 mL 離心管分裝，立即放入-20 ℃冰箱保存待測(cè)。

1.6.2.2 測(cè)定指標(biāo)測(cè)定的血清生化指標(biāo)包括總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）含量，計(jì)算白蛋白與球蛋白比值（白/球比）；谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）活力。 測(cè)定的血清抗氧化指標(biāo)包括總抗氧化能力 （T-AOC）、丙二醛（MDA）含量、過(guò)氧化氫酶（CAT）活力、超氧化物歧化酶 （SOD） 活力、 谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活力。 測(cè)定的血清免疫指標(biāo)包括免疫球蛋白IgA、IgG、IgM 含量。

1.6.2.3 測(cè)定方法血清生化、 抗氧化和免疫指標(biāo)均按照試劑盒（購(gòu)自中生北控股份有限公司和北京華英生物技術(shù)研究所） 說(shuō)明書(shū)提供的方法進(jìn)行測(cè)定。 測(cè)定儀器為邁瑞B(yǎng)S-420 全自動(dòng)生化儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司產(chǎn)品）和華衛(wèi)德朗DR-200BS 酶標(biāo)分析儀 （無(wú)錫華衛(wèi)德朗儀器有限公司產(chǎn)品）。

1.7 數(shù)據(jù)分析

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 統(tǒng)計(jì)表格進(jìn)行匯總整理，利用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，應(yīng)用Duncan 氏法進(jìn)行多重比較。 試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”的形式表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加苜蓿草粉對(duì)母豬繁殖性能的影響

由表2 可知，10%苜蓿草粉組的仔豬初生窩重顯著（P＜0.05）高于對(duì)照組以及5%和15%苜蓿草粉組， 產(chǎn)仔數(shù)和產(chǎn)活仔數(shù)高于對(duì)照組以及5%和15%苜蓿草粉組 （P＞0.05）；3 個(gè)苜蓿草粉處理組的仔豬初生個(gè)體重高于對(duì)照組（P＞0.05）。

表2 日糧中添加不同比例苜蓿草粉對(duì)母豬產(chǎn)仔性狀的影響

2.2 添加苜蓿草粉對(duì)妊娠后期母豬血清生化指標(biāo)的影響

由表3 可知， 日糧中添加不同比例的苜蓿草粉對(duì)妊娠后期母豬血清總蛋白和球蛋白含量無(wú)顯著（P＞0.05）影響，但3 個(gè)苜蓿草粉添加組母豬的血清球蛋白含量與對(duì)照組相比有所提高。 10%苜蓿草粉組母豬的血清白蛋白含量顯著（P＜0.05）低于對(duì)照組，白/球比也顯著（P＜0.05）低于對(duì)照組，2項(xiàng)指標(biāo)與5%和10%苜蓿草粉組差異不顯著 （P＞0.05）。 添加不同比例的苜蓿草粉降低了妊娠后期母豬的血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活力（P＞0.05），提高了谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力（P＞0.05）。 添加不同比例的苜蓿草粉對(duì)妊娠后期母豬血清總膽固醇、 甘油三酯和尿素氮含量無(wú)顯著（P＞0.05）影響，但10%苜蓿草粉組的血清總膽固醇含量低于其他組， 甘油三酯含量高于其他處理組。 5%和10%苜蓿草粉組母豬的血清葡萄糖含量顯著 （P＜0.05） 高于對(duì)照組，與15%苜蓿草粉組差異不顯著（P>0.05）。

表3 日糧中添加不同比例苜蓿草粉對(duì)妊娠后期母豬血清生化指標(biāo)的影響

2.3 添加苜蓿草粉對(duì)妊娠后期母豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表4 可知，10%苜蓿草粉組母豬的血清總抗氧化能力顯著（P<0.05）高于對(duì)照組和15%苜蓿草粉組，與5%苜蓿草粉組差異不顯著（P>0.05）；5%苜蓿草粉組母豬的血清總抗氧化能力顯著（P<0.05）高于對(duì)照組，與15%苜蓿草粉組差異不顯著（P>0.05）。10%苜蓿草粉組母豬的血清丙二醛含量顯著（P<0.05）低于對(duì)照組以及5%和15%苜蓿草粉組，后三者的血清丙二醛含量無(wú)顯著（P>0.05）差異。 10%苜蓿草粉組母豬的血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活力顯著（P<0.05）高于對(duì)照組，與5%和15%苜蓿草粉組差異不顯著（P>0.05）。10%苜蓿草粉組母豬的血清超氧化物歧化酶活力顯著 （P<0.05）高于對(duì)照組以及5%和15%苜蓿草粉組，5%和15%苜蓿草粉組母豬的血清超氧化物歧化酶活力顯著（P<0.05）高于對(duì)照組，5%苜蓿草粉組母豬的血清超氧化物歧化酶活力與15%苜蓿草粉組差異不顯著（P>0.05）。 各處理組母豬的血清過(guò)氧化氫酶活力差異均不顯著（P>0.05）。

表4 日糧中添加不同比例苜蓿草粉對(duì)妊娠后期母豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.4 添加苜蓿草粉對(duì)妊娠后期母豬血清免疫指標(biāo)的影響

由圖1 可知，10%苜蓿草粉組母豬的血清免疫球蛋白IgA 和IgG 含量高于其他處理組， 但差異均不顯著（P>0.05）；10%苜蓿草粉組母豬的血清免疫球蛋白IgM 含量顯著（P<0.05）高于5%苜蓿草粉組， 與對(duì)照組和15%苜蓿草粉組差異不顯著（P>0.05）。

圖1 日糧中添加不同比例苜蓿草粉對(duì)妊娠后期母豬血清免疫指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 妊娠后期日糧中添加苜蓿草粉對(duì)母豬產(chǎn)仔性狀的影響

目前，在規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)，為了控制妊娠母豬體況和限制營(yíng)養(yǎng)儲(chǔ)備過(guò)剩（特別是脂肪過(guò)度儲(chǔ)備）而對(duì)其進(jìn)行限飼，通過(guò)調(diào)整妊娠后期的飼料攝入量，最大限度地緩解分娩前的負(fù)能量平衡， 并提高哺乳早期的飼料攝入量和初生仔豬的體重［19］。 研究發(fā)現(xiàn)，在母豬妊娠后期飼喂高纖維日糧，能改善母豬腸道功能［20］，增加采食和休息時(shí)間，減少刻板行為和攻擊行為［21］，有助于降低維持能量需要，增加孕體生長(zhǎng)的能量供應(yīng)［22］。 這可能是該試驗(yàn)中10%苜蓿草粉組的仔豬初生窩重顯著（P<0.05）高于對(duì)照組的原因。而15%苜蓿草粉組的試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，該組仔豬初生窩重低于對(duì)照組和5%及10%苜蓿草粉組，可能是該組苜蓿草粉的添加比例過(guò)高，這與廉紅霞［5］的研究結(jié)果類似。

近年來(lái)，母豬飼養(yǎng)中高纖維日糧的應(yīng)用引起了越來(lái)越多的關(guān)注，這主要是由于其對(duì)母豬生產(chǎn)和繁殖性能有潛在益處。 在該試驗(yàn)中，妊娠后期母豬日糧添加苜蓿草粉提高繁殖性能，這可能與苜蓿草粉中含有豐富的纖維素有關(guān)。 該研究發(fā)現(xiàn)，苜蓿草粉處理組母豬的仔豬初生個(gè)體重有所提升， 但未達(dá)到顯著水平（P>0.05），這與其他學(xué)者［5-6，23］的研究結(jié)果相似。

3.2 日糧中添加不同比例苜蓿草粉對(duì)妊娠后期母豬血清生化指標(biāo)的影響

母豬的血清生理生化指標(biāo)主要反映體內(nèi)代謝及健康狀況。 血清總蛋白主要由白蛋白和球蛋白組成， 總蛋白含量的高低取決于動(dòng)物機(jī)體蛋白質(zhì)的代謝功能強(qiáng)弱， 能反映動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)水平和蛋白質(zhì)在體內(nèi)的沉積狀況。當(dāng)血清總蛋白含量升高時(shí)，提示機(jī)體蛋白質(zhì)合成功能加強(qiáng)， 有助于促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)［6］。 該研究結(jié)果表明，日糧添加苜蓿草粉對(duì)妊娠后期母豬血清總蛋白含量無(wú)顯著影響 （P>0.05），說(shuō)明妊娠后期日糧中添加苜蓿草粉對(duì)母豬機(jī)體蛋白質(zhì)合成水平?jīng)]有影響。 球蛋白主要參與機(jī)體的體液免疫，白蛋白與球蛋白比值（白/球比）的高低反映了動(dòng)物對(duì)疾病抵抗能力的強(qiáng)弱， 比值越小說(shuō)明球蛋白的含量越高，機(jī)體的免疫功能越強(qiáng)。該研究中， 添加不同比例苜蓿草粉的母豬與對(duì)照組相比，血清球蛋白含量有一定上升（P>0.05），而10%苜蓿草粉組的血清白蛋白含量顯著（P<0.05）低于對(duì)照組，使其白/球比顯著（P<0.05）低于對(duì)照組。結(jié)合血清免疫球蛋白指標(biāo)測(cè)定結(jié)果，10%苜蓿草粉組免疫球蛋白IgA 和IgG 含量均高于其他處理組（P>0.05），IgM 含量顯著（P<0.05）高于5%苜蓿草粉組， 說(shuō)明添加10%苜蓿草粉對(duì)妊娠母豬的免疫功能有一定的改善作用。

該研究中， 添加不同比例的苜蓿草粉降低了母豬血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活力， 提高了谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力，但與對(duì)照組相比差異均不顯著（P>0.05），說(shuō)明在日糧中添加苜蓿草粉不會(huì)影響妊娠母豬的肝臟功能，這一結(jié)果與呂先召［24］報(bào)道一致。血清中的谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力是反映動(dòng)物機(jī)體應(yīng)激程度、蛋白質(zhì)合成與分解狀況、肝臟和心臟受損程度的敏感指標(biāo)［25］。該研究中，添加不同比例苜蓿草粉母豬的血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活力與對(duì)照組相比有所降低（特別是10%苜蓿草粉組），可能與苜蓿草粉中的抗氧化活性成分有關(guān)， 提高了機(jī)體的抗應(yīng)激能力。

血清中的總膽固醇含量是評(píng)價(jià)動(dòng)物脂質(zhì)代謝的重要指標(biāo)。 總膽固醇是血液中各種脂蛋白所含膽固醇的總和。 廉紅霞［5］研究表明，在妊娠母豬飼糧中添加苜蓿草粉顯著（P<0.05）降低了母豬血清總膽固醇含量， 而該研究中添加苜蓿草粉組母豬的血清總膽固醇含量也呈現(xiàn)降低的趨勢(shì) （P>0.05）。 這主要是由于苜蓿中含有多種營(yíng)養(yǎng)活性物質(zhì)（如苜蓿皂苷），能改善動(dòng)物機(jī)體脂類代謝，降低血清膽固醇含量。 王彥華［26］研究了日糧中添加苜蓿草粉和苜蓿皂苷對(duì)育肥豬血清生化指標(biāo)的影響，結(jié)果表明，添加苜蓿草粉能顯著（P<0.05）降低血清膽固醇含量， 而添加苜蓿皂苷能極顯著（P<0.01）降低血清膽固醇含量。 原因可能是哺乳動(dòng)物消化道不能吸收皂苷， 但皂苷能與膽固醇結(jié)合排到體外，從而增加膽固醇的排泄量，降低動(dòng)物血清中膽固醇的含量［27］。另一種原因可能是，纖維素中的可溶性多糖增加消化物黏度， 從而增加膽固醇和膽汁酸的排泄量，反過(guò)來(lái)影響肝臟膽固醇代謝，導(dǎo)致血清膽固醇濃度降低，從而起到降脂效果［5］。Shang 等［28］研究了飼糧中添加甜菜渣和麥麩對(duì)妊娠后期母豬血清膽固醇含量變化的影響， 得到了相似的結(jié)果。

尿素氮是蛋白質(zhì)代謝的主要產(chǎn)物， 直接反映蛋白質(zhì)在體內(nèi)的吸收利用情況。 該試驗(yàn)中各處理組之間血清尿素氮含量沒(méi)有顯著差異 （P>0.05），說(shuō)明日糧中添加苜蓿草粉對(duì)妊娠后期母豬的蛋白質(zhì)代謝沒(méi)有影響且母豬肝腎功能正常。 該試驗(yàn)結(jié)果表明，添加5%和10%苜蓿草粉能顯著（P<0.05）提高妊娠母豬血清中的葡萄糖含量， 而隨著苜蓿草粉添加比例的增加，15%苜蓿草粉組的血清葡萄糖含量降低，與對(duì)照組差異不顯著（P>0.05），說(shuō)明添加適當(dāng)比例的苜蓿草粉能提高血清中葡萄糖的含量， 而苜蓿草粉添加過(guò)量會(huì)減弱母豬腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。綜上說(shuō)明，添加10%苜蓿草粉有利于妊娠母豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。

3.3 添加苜蓿草粉對(duì)妊娠后期母豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

苜蓿是多年生草本植物，含有苜蓿皂苷、黃酮類物質(zhì)、多糖類物質(zhì)及抗氧化肽等，具有提高動(dòng)物抗氧化性能的作用。 王彥華等［1］研究表明，在日糧中添加苜蓿草粉和苜蓿皂苷對(duì)育肥豬的抗氧化性能有一定的改善作用。 總抗氧化能力可直接反映機(jī)體抗氧化酶的活力， 間接反映機(jī)體所受脂質(zhì)過(guò)氧化損傷的程度。該研究結(jié)果表明，不同比例苜蓿草粉添加組的血清總抗氧化能力均高于對(duì)照組，5%和10%苜蓿草粉組顯著高于對(duì)照組（P<0.05），提示在日糧中添加適當(dāng)比例的苜蓿草粉， 可改善妊娠后期母豬的機(jī)體抗氧化能力。

超氧化物歧化酶、 過(guò)氧化氫酶和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶在清除機(jī)體活性氧中起到重要作用，其活力直接反映機(jī)體的抗氧化性能， 間接反映機(jī)體清除自由基的能力。 丙二醛是生物膜脂質(zhì)過(guò)氧化的重要產(chǎn)物，能加劇膜的損傷，可通過(guò)測(cè)定丙二醛含量衡量組織膜脂過(guò)氧化的程度。 該試驗(yàn)結(jié)果表明，添加10%苜蓿草粉可顯著（P<0.05）提高妊娠后期母豬血清中的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活力，這與陳越等［29］報(bào)道的持續(xù)飼喂苜蓿干草可以顯著（P<0.05）提高乳牛全血中谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活力的研究結(jié)果類似。 此外， 該研究中，5%、10%、15%苜蓿草粉組母豬的血清超氧化物歧化酶活力顯著（P<0.05）高于對(duì)照組；10%苜蓿草粉組母豬的血清丙二醛含量顯著（P<0.05）低于對(duì)照組。 綜合來(lái)看，10%苜蓿草粉在提升母豬機(jī)體抗氧化能力方面表現(xiàn)最佳。

4 結(jié)論

在妊娠后期日糧中添加不同比例的苜蓿草粉，對(duì)母豬繁殖性能和血清生化、抗氧化和免疫指標(biāo)具有一定的改善作用， 且添加比例為10%時(shí)綜合效果最佳。