劉應(yīng)科 任昕昕 李天鑫 楊 曄 王秋莉 張 辰

1.北京市和平里醫(yī)院兒科，北京 100013；2.北京中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，北京 100029

肥胖癥已經(jīng)成為一個(gè)全球的公共衛(wèi)生熱點(diǎn)問題，近年在我國尤其凸顯。目前最新監(jiān)測結(jié)果顯示，我國成年居民肥胖率達(dá)11.9%，超重率則有30.1%，兩者總和為42.0%[1]。截止至2012 年統(tǒng)計(jì)，中國約有4.4 億成年人超重，其中1.3 億人肥胖，我國學(xué)齡兒童、青少年中超重和肥胖已經(jīng)達(dá)到16%[2]。肥胖癥有巨大的隱形危害，是萬病之源，成年人超重和肥胖可以增加死亡和疾病的危險(xiǎn)性，導(dǎo)致預(yù)期壽命的減損和過早死亡率的增加[3]。本病的具體發(fā)生機(jī)制尚不明確[4]。對本病多為行為、飲食干預(yù)，成年人有藥物干預(yù)，但各類藥物均有一定的不良反應(yīng)[5]。兒童尚無藥物可用。肥胖癥已經(jīng)成為一種常見病、疑難病，且藥物治療有限。尋求綠色、安全、有效的干預(yù)方法顯得非常必要。中醫(yī)藥對肥胖早有認(rèn)識，對病因病機(jī)、治療原則、治療方劑亦有一定的認(rèn)識及經(jīng)驗(yàn)積累[6-7]。筆者師從國醫(yī)大師孫光榮教授，秉承中和的學(xué)術(shù)思想，根據(jù)“調(diào)氣血、平升降、衡出入”“中和辨證、中和組方、中和用藥”的指導(dǎo)原則[8]，自擬了參芪消脂方，臨床驗(yàn)之有效[9]，并進(jìn)行了基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)[10]，提示具有明確的糾正脂代謝紊亂的作用，尤其在兒童肥胖癥中療效凸顯，并且發(fā)現(xiàn)了患者攝食量主動(dòng)下降?；诖爽F(xiàn)象，特從基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)角度加以驗(yàn)證，為本病的治療累積更多經(jīng)驗(yàn)及數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 雄性SPF 級ICR 小鼠（鼠齡8 周），體重（250±10）g，均購自北京維通利華生物科技有限公司，許可證號：SCXK（京）2019-0016，飼養(yǎng)于北京中醫(yī)藥大學(xué)屏障環(huán)境動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)過程中動(dòng)物采取自由攝食及飲水，其中飼料予普通飼料及高脂飼料（24%脂肪、41%碳水化合物、24%蛋白質(zhì)），室溫均保持在22～24℃，相對濕度（40±10）%，日光照時(shí)間為12 h，合格證號：SYXK（京）2019-0042。

1.1.2 儀器 電子天平（0.001 g）（上海精天電子儀器有限公司），Echo MRI 身體成分分析儀（匯佳生物股份有限公司）。

1.1.3 藥物“參芪消脂方”制劑，主要組成包括太子參10 g、生黃芪10 g、丹參10 g、廣陳皮12 g、生山楂12 g、玉米須15 g 組成。規(guī)格為100 ml/瓶，1.56 g/ml。由北京市和平里醫(yī)院提供制劑。

1.2 研究方法

1.2.1 動(dòng)物模型制備及分組 ICR 小鼠50 只，按體重從1～50 編號，適應(yīng)性飼養(yǎng)1 周，從隨機(jī)數(shù)字表中抽取8 個(gè)編號數(shù)字，與之相應(yīng)的小鼠設(shè)為正常組，予普通飼料，其他小鼠予高脂飼料。飼養(yǎng)12 周后，大于正常組體重10%提示肥胖癥造模成功[11-13]，造模成功的小鼠，按照隨機(jī)數(shù)字表法分成模型組和給藥組，每組再抽取8 只用于實(shí)驗(yàn)。隨后，各組均給予普通飼料喂養(yǎng)。

1.2.2 給藥方法 給藥組予參芪消脂方制劑灌胃干預(yù)，給藥體積為0.2 ml/10 g，其他兩組給予等量蒸餾水灌胃。各組均灌胃12 周，每天灌胃1 次。

1.2.3 體脂檢測方法 灌胃6 周和12 周時(shí)，分別對正常組、模型組、給藥組進(jìn)行體脂成分檢測，并計(jì)算體脂比。具體方法：啟動(dòng)身體成分分析儀Echo MRI 軟件，將實(shí)驗(yàn)小鼠放入合適Holder，插入機(jī)器側(cè)面圓形體腔內(nèi)；將標(biāo)準(zhǔn)品放入機(jī)器腔體內(nèi)5～15 min進(jìn)行系統(tǒng)校正及測試；點(diǎn)擊Folder 選項(xiàng)創(chuàng)建新文件夾并重命名；點(diǎn)擊Start scan 按鈕輸入實(shí)驗(yàn)小鼠編號，實(shí)驗(yàn)時(shí)間及體重等相關(guān)，并在掃描結(jié)束后，保存并導(dǎo)出數(shù)據(jù)。

1.2.4 實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測 灌胃6 周和12 周時(shí)，記錄各組進(jìn)食量和體重。計(jì)算方法：體重凈增加（g）=實(shí)驗(yàn)?zāi)w重-實(shí)驗(yàn)初體重；體脂比（%）=體脂總重/實(shí)驗(yàn)?zāi)w重×100%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，采用t 檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P ＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 參芪消脂方對肥胖小鼠進(jìn)食量的影響

與模型組比較，給藥組灌胃6 周及12 周進(jìn)食量明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。見表1。

表1 參芪消脂方對肥胖小鼠進(jìn)食量的影響（g，）

表1 參芪消脂方對肥胖小鼠進(jìn)食量的影響（g，）

注：與模型組同期比較，aP ＜0.05

2.2 參芪消脂方對肥胖小鼠體重凈增加的影響

與正常組比較，模型組灌胃12 周后體重凈增加顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）；與模型組比較，給藥組灌胃6 周及12 周體重凈增加均顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。模型組與給藥組灌胃12 周體重凈增加與灌胃6 周比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。見表2。

表2 參芪消脂方對肥胖小鼠體重凈增加的影響（g，）

表2 參芪消脂方對肥胖小鼠體重凈增加的影響（g，）

注：與模型組同期比較，aP ＜0.05；與正常組同期比較，bP ＜0.05；與本組灌胃6 周比較，cP ＜0.05

2.3 參芪消脂方對肥胖小鼠體脂比的影響

與正常組比較，模型組灌胃6 周及12 周體脂比增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。灌胃12 周，模型組體脂比高于灌胃6 周，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。見表3。

表3 參芪消脂方對肥胖小鼠體脂比的影響（%，）

表3 參芪消脂方對肥胖小鼠體脂比的影響（%，）

注：與正常組比較，aP ＜0.05；與本組灌胃6 周比較，bP ＜0.05

3 討論

肥胖癥的一個(gè)重要病因就是營養(yǎng)過剩導(dǎo)致了脂肪蓄積，造成脂肪細(xì)胞增多、脂肪細(xì)胞體積增大而變成肥胖。其中進(jìn)食量過多、進(jìn)食速度過快、不能及時(shí)預(yù)警飽食中樞、造成營養(yǎng)過多、飲食結(jié)構(gòu)不合理等多種因素屬于跟食物密切相關(guān)。減少、控制食量是確切防止體重過增，甚至降低體重的良好舉措[14]。然而，管控飲食，尤其在兒童患者中，顯得非常困難，對于食物的欲望及自控力差大大降低了患者的治療依從性[15]。

探究肥胖癥的食欲調(diào)節(jié)通路，進(jìn)而進(jìn)行干預(yù)調(diào)整顯得非常有意義。食欲的調(diào)控主要由神經(jīng)中樞或外周產(chǎn)生的食欲調(diào)節(jié)因子起作用，這些調(diào)節(jié)因子，具有促進(jìn)或抑制作用，并通過其在下丘腦形成的嚴(yán)密、精確而又復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，起到控制飲食的作用[16]。與瘦素通路[17]、食欲素通路和饑餓素通路等多條通路有關(guān)[18]。研究顯示[19]，瘦素神經(jīng)元功能異常往往和肥胖癥、心腦血管疾病和糖尿病等息息相關(guān)，是主要的致病機(jī)制之一。瘦素能夠通過外周和中樞的共同調(diào)節(jié)機(jī)制，使脂肪代謝率提高、進(jìn)食量減少，從而達(dá)到調(diào)節(jié)體重的目的[14,20]。食欲素能夠促進(jìn)細(xì)胞對葡萄糖的攝取并將多余能量轉(zhuǎn)化為脂肪儲存起來[21]，可增加大鼠神經(jīng)肽Y 的釋放從而增加食欲，饑餓素則可以抑制POMC mRNA 表達(dá)，促進(jìn)AGRP mRNA 的表達(dá)，從而增強(qiáng)大鼠食欲[22]。

本研究中發(fā)現(xiàn)，造模后的模型組小鼠灌胃6 周、12 周的進(jìn)食量與正常組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P >0.05），給予參芪消脂方后的給藥組小鼠其6周、12 周的進(jìn)食量較模型組小鼠均明顯減少（P ＜0.05），提示本方可以有效的抑制小鼠的食欲，當(dāng)中機(jī)制可能跟調(diào)節(jié)瘦素、食欲素、饑餓素等調(diào)節(jié)因子的水平有關(guān)，尚可進(jìn)一步探尋當(dāng)中機(jī)制。在體重凈增量方面，給藥組小鼠給藥6 周、12 周體重凈增加較模型組均顯著降低（P ＜0.01），提示本方可顯著改善體重，進(jìn)而緩解肥胖。在體脂比例方面，給藥組小鼠較模型組小鼠體脂總重顯著下降[9]，體脂比雖也有下降趨勢，但數(shù)據(jù)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能與樣本量及觀察時(shí)間不夠有關(guān)，還有待進(jìn)一步的研究。

組內(nèi)比較顯示，干預(yù)6 周和12 周在進(jìn)食量上沒有變化，但是在體重凈增加量上有變化，模型組尚在持續(xù)增長體重，繼續(xù)肥胖，而給藥組繼續(xù)降低體重，并隨著時(shí)間的延長，降低體重效果越好，而正常體重保持穩(wěn)定，表明已經(jīng)接近成年鼠的體重。在體脂比方面，正常組和給藥組無組間差異，但模型組存在差異，提示隨著肥胖時(shí)間的延長，體脂含量有所增加。綜合來看，延長治療時(shí)間，有益與降低體重。

參芪消脂方是筆者根據(jù)指導(dǎo)老師國醫(yī)大師孫光榮教授“中和學(xué)術(shù)思想”擬定[23]，主要藥物包括太子參、黃芪、丹參、陳皮、生山楂、玉米須等，本方按照孫教授三聯(lián)藥組組方原則擬方。第一組即太子參、黃芪、丹參，三者共為君藥，主要行益氣活血之功，活血?jiǎng)t血行，氣足則津液行，使體內(nèi)氣血暢通，創(chuàng)立津液代謝的環(huán)境；第二組即陳皮、生山楂，二者共為臣藥，行健脾祛濕脾之功，健脾的關(guān)鍵在于運(yùn)而不在補(bǔ)，脾胃運(yùn)化功能正常，則津液代謝通暢，痰濕自去，其中溫燥之品半夏祛濕更佳；第三組主要為玉米須，有化濕醒脾之效。全方兼顧虛實(shí)、標(biāo)本，氣血共調(diào)，能益氣活血，健脾祛濕，消脂化濁，為筆者驗(yàn)之臨床的有效方。肥胖癥患者多有食欲亢進(jìn)，缺乏飽腹感的癥狀，蓋因濕濁困阻中焦，阻遏氣機(jī)，導(dǎo)致脾失健運(yùn)，食納增多，然后轉(zhuǎn)化能力又不足，導(dǎo)致痰、濁、濕進(jìn)一步釀生，造成惡性循環(huán)[24]。本方根據(jù)病機(jī)確立祛濕瀉濁的治則，選方用藥，精準(zhǔn)祛除痰濕，健運(yùn)脾胃，繼而恢復(fù)正常的食欲。

本研究尚存在一定的不足，在食欲觀測方面應(yīng)該更加精準(zhǔn)，可以細(xì)化到每一天、每一個(gè)階段，進(jìn)而反應(yīng)更加細(xì)致的進(jìn)食量。在食欲通路中，應(yīng)該設(shè)立觀察指標(biāo)，進(jìn)一步明確相關(guān)的作用機(jī)制。

綜上所述，參芪消脂方可以有效地控制ICR 肥胖小鼠的食欲并顯著降低其體重，作用機(jī)制可能與下丘腦食欲調(diào)控網(wǎng)絡(luò)有關(guān)，但具體藥物作用靶點(diǎn)及與各種食欲調(diào)節(jié)因子的關(guān)系仍不明確，有待于進(jìn)一步的深入探索。