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        山東肉鴨主要細(xì)菌病調(diào)查與耐藥性分析

        2021-11-27 22:15:41魏中鋒樊祜卿王文秀朱峰亮姚靜
        家禽科學(xué) 2021年9期

        魏中鋒 樊祜卿 王文秀 朱峰亮 姚靜

        摘 要:為了解山東肉鴨主要細(xì)菌病流行情況,本試驗(yàn)從山東菏澤、臨沂、濰坊3個(gè)地區(qū)采取86個(gè)肉鴨養(yǎng)殖場發(fā)病病料進(jìn)行細(xì)菌分離鑒定和耐藥性進(jìn)行分析。結(jié)果顯示,大腸桿菌病陽性場68個(gè),占比79.1%;漿膜炎陽性場78個(gè),占比90.7%;沙門氏菌陽性場46個(gè),占比53.5%;從3個(gè)地區(qū)共分離出埃希氏菌64種、里默氏桿菌34種、沙門氏菌53種。耐藥性顯示主要病原菌對(duì)20種抗菌藥呈現(xiàn)多重耐藥現(xiàn)象,埃希氏菌、里默氏桿菌呈現(xiàn)14重以上耐藥,細(xì)菌性疾病控制愈發(fā)困難;沙門氏菌耐藥以5~9重耐藥為主。

        關(guān)鍵詞:肉鴨;細(xì)菌;耐藥性

        中圖分類號(hào):S858.32 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B文章編號(hào):1673-1085(2021)9-0052-05

        隨著鴨養(yǎng)殖業(yè)的規(guī)?;c集約化發(fā)展,鴨細(xì)菌病已成為阻礙養(yǎng)鴨業(yè)發(fā)展的重要因素[1],山東省作為中國肉鴨養(yǎng)殖大省,尤其是菏澤、臨沂和濰坊地區(qū)是山東肉鴨養(yǎng)殖較大地區(qū)之一。近年來,隨著集約化、高密度化的增加,肉鴨細(xì)菌病呈現(xiàn)高發(fā)和多發(fā)態(tài)勢(shì),并且抗生素治療效果較差,這給養(yǎng)殖場造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。引起養(yǎng)鴨場發(fā)生細(xì)菌性疾病的病原較多,如大腸埃希氏菌、沙門氏菌、葡萄球菌、里默氏桿菌等,但不同地區(qū)分離的病原菌有所不同,山東主要流行的為大腸桿菌、沙門氏菌和鴨傳染性漿膜炎。本研究擬通過對(duì)菏澤、臨沂和濰坊地區(qū)肉鴨場主要細(xì)菌進(jìn)行分離鑒定、耐藥性分析和耐藥基因檢測,以期為肉鴨養(yǎng)殖細(xì)菌病預(yù)防與控制提供科學(xué)的防控方法。

        1 材料與方法

        1.1 病料來源

        病料來自菏澤、臨沂和濰坊地區(qū)臨床具有典型癥狀的肉鴨,解剖有心包炎、肝周炎、腹膜炎、氣囊炎等明顯病變,無菌采取腦、肝臟、脾臟等病變組織。

        1.2 主要藥品和試劑

        麥康凱瓊脂、營養(yǎng)瓊脂、MH培養(yǎng)基、LB肉湯培養(yǎng)基、緩沖蛋白胨水( BPW) 、四硫磺酸鈉煌綠( TTB) 增菌液、亞硒酸鹽胱氨酸( SC) 增菌液、亞硒酸鹽煌綠( SBG) 增菌液、藥敏紙片均購自天津市英博生化試劑有限公司。

        1.3 方法

        1.3.1 細(xì)菌分離鑒定 無菌采集病死鴨的肝臟、脾臟、腎臟、氣囊等樣本,劃線接種于普通瓊脂培養(yǎng)基和鮮血瓊脂培養(yǎng)基。將普通瓊脂培養(yǎng)基于恒溫培養(yǎng)箱中37 ℃培養(yǎng)24 h;將鮮血瓊脂平板分成兩組,分別置于恒溫培養(yǎng)箱中有氧和厭氧條件下,37 ℃培養(yǎng)48 h,期間觀察細(xì)菌生長情況。然后挑取單個(gè)菌落進(jìn)行純化培養(yǎng),對(duì)純化培養(yǎng)物進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢和生理生化鑒定,分析致病菌種類。

        1.3.2 病原菌耐藥性分析 將鑒定完的細(xì)菌培養(yǎng)物接種于胰蛋白胨大豆肉湯培樣24 h,取100 μL細(xì)菌液體培養(yǎng)物,均勻涂布于鮮血瓊脂平板,待培養(yǎng)基表面菌液晾干后,將藥敏紙片貼于培養(yǎng)基上,恒溫培養(yǎng)箱37 ℃培養(yǎng)36 h,測定抑菌圈直徑,分析分離細(xì)菌的耐藥情況。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 菏澤、臨沂和濰坊地區(qū)肉鴨發(fā)病情況

        統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表1。

        本次調(diào)查共調(diào)查86個(gè)養(yǎng)殖場,采集了258個(gè)樣品,其中大腸桿菌病陽性場68個(gè),占比79.1%;漿膜炎陽性場場78個(gè),占比90.7%;沙門氏菌陽性場46個(gè),占比53.5%;大腸桿菌和漿膜炎混合感染場81個(gè),占比94.2%;大腸桿菌和沙門氏菌混合感染44個(gè),占比51.2%;漿膜炎和沙門氏菌混合感染43個(gè),占比50%;大腸桿菌、漿膜炎和沙門氏菌3種菌混合感染27個(gè)場,占比31.4% 。

        2.2 細(xì)菌分離鑒定結(jié)果

        取純培養(yǎng)的細(xì)菌接種細(xì)菌生化管,恒溫箱37 ℃培養(yǎng)48 h,觀察分離細(xì)菌發(fā)酵情況,并根據(jù)培養(yǎng)菌落形態(tài)特點(diǎn)和菌體染色特征,判定分離細(xì)菌種類,結(jié)果如表2所示。

        本試驗(yàn)共分離埃希氏菌64種,其中肝臟分離32種,脾臟分離17種,腎臟分離13種,氣囊分離2種。分離里默氏桿菌34種,其中肝臟分離22種,脾臟分離0種,腎臟分離0種,氣囊分離12種.分離沙門菌53種,其中肝臟分離23種,脾臟分離7種,腎臟分離6種,氣囊分離17種。

        從表3可知,養(yǎng)鴨場主要病原菌均有不同程度的耐藥現(xiàn)象。埃希氏菌分離株的耐藥率:頭孢吡肟(73.4%)、頭孢噻肟(84.4%)、亞胺培南(81.3%)、氨芐西林(95.3%)、頭孢曲松(92.2%)、慶大霉素(59.4%)、鏈霉素(37.5%)、新霉素(31.3 %)、卡那霉素(56.3 %)、四環(huán)素(96.9%)、強(qiáng)力霉素(84.4%)、紅霉素(76.6%)、氯霉素(71.9 %)、乙酰螺旋霉素(93.8%)、阿奇霉素(67.2%)、環(huán)丙沙星(81.3 %)、氧氟沙星(93.8 %)、磺胺甲基異惡唑(90.6 %)、甲氧芐氨嘧啶(84.4 %)、復(fù)方新諾明(76.6 %)、林可霉素(87.5 %)、氟苯尼考(96.9 %),其中只有鏈霉素、新霉素卡拉霉素對(duì)埃希氏菌較為敏感。

        里默氏桿菌分離株的耐藥率:頭孢吡肟(79.4%)、頭孢噻肟(88.2%)、亞胺培南(82.4%)、氨芐西林(100.0%)、頭孢曲松(94.1%)、慶大霉素(76.5%)、鏈霉素(67.6%)、新霉素(47.1%)、卡那霉素(55.9%)、四環(huán)素(79.4%)、強(qiáng)力霉素(64.7%)、紅霉素(82.4%)、氯霉素(73.5 %)、乙酰螺旋霉素(88.2%)、阿奇霉素(47.1%)、環(huán)丙沙星(76.5 %)、氧氟沙星(88.2%)、磺胺甲基異惡唑(82.4%)、甲氧芐氨嘧啶(88.2%)、復(fù)方新諾明(76.5%)、林可霉素(88.2%)、氟苯尼考(94.1%),其中新霉素、卡那霉素、阿奇霉素對(duì)里默氏桿菌較為敏感。

        沙門氏菌的耐藥率:頭孢吡肟(3.8%)、頭孢噻肟(5.7%)、亞胺培南(1.9%)、氨芐西林(9.4%)、頭孢曲松(7.5%)、慶大霉素(15.1%)、鏈霉素(3.8%)、新霉素(5.7%)、卡那霉素(9.4%)、四環(huán)素(39.6%)、強(qiáng)力霉素(30.2%)、紅霉素(34.0%)、氯霉素(41.5%)、乙酰螺旋霉素(45.3%)、阿奇霉素(17.0%)、環(huán)丙沙星(5.7%)、氧氟沙星(3.8%)、磺胺甲基異惡唑(49.1%)、甲氧芐氨嘧啶(50.9%)、復(fù)方新諾明(45.3%)、林可霉素(17.0%)、氟苯尼考(26.4%),大多抗生素對(duì)沙門氏菌敏感,其中磺胺甲基異惡唑、甲氧芐氨嘧啶、復(fù)方新諾明為較為敏感。

        2.4 肉鴨場病原菌多重耐藥性分析

        分析結(jié)果見表4。

        由表4 結(jié)果可知,肉鴨場分離的細(xì)菌均存在多重耐藥現(xiàn)象,其中埃希氏菌分離株多重耐藥現(xiàn)象最為嚴(yán)重,呈現(xiàn)14重以上耐藥;里默氏桿菌分離株多重耐藥現(xiàn)象次之,以5~13重常見;沙門菌分離株多重耐藥現(xiàn)象相對(duì)較少,以5~9重耐藥為主。

        3 討論與小結(jié)

        隨著肉鴨養(yǎng)殖越來越向集約化和規(guī)?;l(fā)展,飼養(yǎng)密度越來越大,細(xì)菌病的發(fā)生日益頻繁,而且隨著細(xì)菌耐藥性的增加,細(xì)菌病更加難以控制,常給養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[2]。大腸桿菌、鴨疫里默氏桿菌和沙門氏菌是引起鴨群細(xì)菌病的最常見病原,對(duì)我國肉鴨養(yǎng)殖的發(fā)展以及人類公共衛(wèi)生安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅[3],并且這3種病的臨床癥狀很相似,肉鴨感染大多為2種以上混合感染[4],因此從臨床上難以診斷。本試驗(yàn)從菏澤、臨沂、濰坊3個(gè)地區(qū)86個(gè)肉鴨養(yǎng)殖場病死鴨病料中分離出埃希氏菌64種、里默氏桿菌34種、沙門菌53種,說明在山東這3個(gè)地區(qū)肉鴨養(yǎng)殖場中細(xì)菌性污染較為普遍,并且出現(xiàn)多重感染越來越嚴(yán)重的趨勢(shì)。隨著抗菌藥的廣泛應(yīng)用,細(xì)菌耐藥現(xiàn)象不斷增多[5]。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),肉鴨場中埃希氏菌、里默氏桿菌耐藥性越來越普遍,呈現(xiàn)14重以上耐藥,細(xì)菌性疾病控制愈發(fā)困難;沙門菌耐藥以5~9重耐藥為主,形勢(shì)也不容樂觀。

        大腸桿菌作為一種條件性疾病,與養(yǎng)殖場的飼養(yǎng)條件有很大的關(guān)系,養(yǎng)殖設(shè)施和條件相對(duì)較好的發(fā)病率明顯低于設(shè)施簡陋的養(yǎng)殖場[6],大腸桿菌的控制從根本上主要是改善養(yǎng)殖條件。鴨傳染性漿膜炎作為常見肉鴨疾病,發(fā)病具有季節(jié)性,需要加強(qiáng)日常飼養(yǎng)管理,加強(qiáng)鴨舍的通風(fēng)、環(huán)境干燥、清潔衛(wèi)生、消毒,采用全進(jìn)全出的飼養(yǎng)制度。沙門氏菌作為一種肉禽常見細(xì)菌病,在山東省養(yǎng)殖肉鴨中較為普遍,發(fā)病率也比較高[7],感染可能與種禽場有關(guān)。

        參考文獻(xiàn)

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