花青素因具有較強的抗氧化能力而具有重要的保健功能,富含花青素的蔬菜越來越受到消費者的青睞,因此培育富含花青素的紫色大白菜成為育種家的重要目標。西北農(nóng)林科技大學張魯剛教授團隊以團隊自主創(chuàng)制的紫心大白菜新種質(zhì)為材料,基于前期對其花青素的積累特性、連鎖分析等相關研究,采用精細定位、圖位克隆等方法,首次將控制紫心大白菜花青素合成和積累的顯性關鍵基因BrPur定位在A07染色體47.91 KB區(qū)間,在定位區(qū)間確定一個編碼R2R3-MYB型的調(diào)節(jié)因子為候選基因,并命名為BrMYB2。進一步克隆了gBrMYB2(1 665 bp)和cBrMYB2(744 bp)及其啟動子,對BrMYB2基因的序列進行遺傳變異分析發(fā)現(xiàn):紫心大白菜的cBrMYB2和gBrMYB2同紫色供體紫菜薹親本BrMYB2的CDS和gDNA序列完全一致,而結球性供體普通大白菜的cBrmyb2存在2個點突變,其gBrmyb2的序列長達5 441 bp,在第一內(nèi)含子上存在一個長達3 772 bp的插入;紫心大白菜的BrMYB2和普通大白菜Brmyb2的啟動子存在多處變異。首先通過不同長度啟動子+GUS載體轉化煙草表明啟動子序列的差異沒有影響其啟動功能,進一步通過CDS和gDNA轉化擬南芥證明紫心大白菜BrMYB2基因外顯子上的點突變并不能導致該基因功能的喪失,然而BrMYB2基因第一個短內(nèi)含子(short intron 1)促進BrMYB2表達,而普通大白菜Brmyb2基因第一個長內(nèi)含子(long intron 1)抑制了Brmyb2的表達?;ㄇ嗨睾铣上嚓P基因表達分析表明紫心大白菜中BrMYB2的高表達激活了花青素的合成途徑,促進了花青素合成相關基因的表達,最終導致大白菜葉球中花青素的積累從而形成紫心葉球。該研究首次確定了控制紫心大白菜的關鍵基因BrMYB2、證實了BrMYB2基因第一個短內(nèi)含子調(diào)控BrMYB2表達的作用,提出了紫心大白菜花青素積累的分子機制。該結果提出了BrMYB2表達調(diào)控新途徑,不僅豐富了植物花青素合成的代謝理論,也為十字花科紫色蔬菜的種質(zhì)創(chuàng)新和遺傳改良提供了重要的參考。
相關研究成果以“The Novel GeneBrMYB2, Located on Chromosome A07, with a Short Intron 1 Controls the Purple-head Trait of Chinese Cabbage (Brassica rapaL.)”為題在線發(fā)表在《Horticulture Research》上。