牛小杰，孫魯陽

（1.徐州醫(yī)藥高等職業(yè)學校 江蘇，徐州 221116；2.聊城市第二人民醫(yī)院 山東，臨清 252600）

黑豆還可以稱為菜豆、烏豆，與黃豆相比，黑豆中所含蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)略高，其中含有獨特的花色苷類物質(zhì)使得其具有更明顯的生物活性，如清火、抗氧化等[1]。當前，人們對黑豆的研究正不斷加深并取得了很大的進步，其中對于黑豆中花色苷的研究也日益發(fā)展并被人們廣泛的應用到食物和醫(yī)藥中。

1 黑豆中的花色苷

黑豆在生活中除了能夠提供能量外，還能發(fā)揮其他的功能，如在醫(yī)療保健上的抗氧化和抗衰老的功能、降低血脂的功能、抗動脈粥樣硬化等多項生物活性，經(jīng)過實驗驗證這主要是由于黑豆中的花色苷發(fā)揮作用。因此，對黑豆中花色苷的研究也越來越重視，其中主要包括花色苷的提取、分離純化，結(jié)構(gòu)測定以及生物活性的研究。

2 黑豆中花色苷的提取

當前，黑豆花色苷提取方式有很多，主要可以分為化學提取法、物理提取法，也可以使用多種方式協(xié)同作用。比如：響應面法輔助超聲波法提取花色苷。

2.1 化學提取法

化學提取法即是指溶劑提取法，主要包括水浸提取方式和醇提取方式。Ignasius Radix Astadi等就用0.1%HCl水溶液對黑豆中的花色苷堿性提取，并用Folin-Ciocalteu對其進行測定，花色苷的含量為1.45±0.13g/100g[2]。Rocio A等人就以60%的乙醇和0.1%的醋酸為混合溶劑對黑豆種皮中的花色苷進行提取[3]。

牛娟娟等人探究了用水提取黑豆中花色苷的各個因素對提取效果的影響程度，實驗表明黑豆花色苷提取的因素中料液比影響最大，提取時間影響最小。在探索到的最高的提取率為2.17mg/g[4]。曹春艷，趙永華等人就用60%體積分數(shù)的乙醇，1:100的料液比，在此條件下進行提取了花色苷，隨后進行了一系列的試驗，在試驗確定的條件下，提取率可達到18%[5]。

2.2 物理提取法

物理輔助提取法主要是輔助使用各種儀器，提高黑豆中花色苷的提取率。劉長慧等人研究了不同產(chǎn)地黑豆，對其進行超聲法提取花色苷，發(fā)現(xiàn)在五常生長的黑豆中花色苷提取率最高為3.035mg/g[6]。高雪琴等研究了微波輔助乙醇的方法提取黑豆中的花色苷，并進行了3因素的一系列正交試驗，最終明確了適宜的方式[7]。

2.3 響應面輔助超聲波提取法

人們將響應面應用到了食品、醫(yī)藥等方面上，以尋求最佳的實驗方案。盧春曉等人就采用此方法，對黑豆皮的花色苷提取進行了探索，首先設(shè)計了5個單因素試驗，結(jié)合響應面和試驗結(jié)果，確定最佳的實驗條件，經(jīng)過驗證，實驗條件可以更加精確，在此條件下，花色苷的提取率接近0.66%[8]。

3 黑豆花色苷的分離純化

幾乎不存在一種方法提取后的物質(zhì)的溶劑系統(tǒng)中，只有花色苷而不存在其他的物質(zhì)，因此需采用一定的方法對所得到的物質(zhì)進行純化分離[9]。對于黑豆中花色苷的提取方法主要有沉淀法、柱層析法或膜技術(shù)等分離純化黑豆中的花色苷。

3.1 沉淀法

沉淀分離是化學中最常用的一種方法。王少波等人進行一系列試驗，研究結(jié)果顯示，當乙醇的含量由80%左右提升至95%左右時，比值增加量并不明顯。但此時多糖等成分的幾乎已不存在，而氨基酸類物質(zhì)仍有殘留，因此還需要進一步分離純化[10]。

3.2 大孔樹脂對黑豆中花色苷的分離純化

大孔樹脂柱是柱層析法的一種主要方法。與其它方法相比，大孔樹脂適用范圍廣、預處理簡單、可重復利用，現(xiàn)在被人們普遍使用。Xiaoxi Wang，Conly Hansen等人就用5種不同類型的大孔樹脂對黑豆罐頭溶液中花色苷進行分離純化，比較得出sp700的提純效果最好[11]。劉岱琳，董晉泉等人就考察了6中不同類型的樹脂，最終選取YWD-01大孔吸附樹脂進行黑豆花色苷的精制。并發(fā)現(xiàn)在一定的條件下（體積分數(shù)50%的乙醇），大孔樹脂可以實現(xiàn)對黑豆中的紅色素進行解吸，甚至通過加入適量的蒸餾水，減少拖尾的現(xiàn)象[12]。徐金瑞，張名位等人通過10種大孔樹脂對黑豆種皮花色苷的純化作用，最終選取AB-8大孔樹脂作為分離純化黑大豆種皮花色苷是最合理的，采用此種樹脂分離后，黑豆花色苷含量和生物活性具有明顯的提高[13]。

3.3 膜技術(shù)純化

膜分離技術(shù)是最近分離技術(shù)的研究熱點，其分離效率較高、操作簡單，可以實現(xiàn)環(huán)保綠色化[14]。楊小劍、沈瑞敏等人采用膜技術(shù)對黑豆花色苷進行純化并對微濾膜和超濾膜進行選擇，確定的膜N100-GM-DL分離純化得到的花色苷提取液，其提取率可以達到3.8 mg/L。

4 黑豆花色苷的生物活性

4.1 抗氧化性

Slad-Zˇilic'等人就對三種不同豆類：黑豆、黃豆和去殼菜豆，進行抗氧化性物質(zhì)研究，發(fā)現(xiàn)黑豆皮中含有豐富的花色苷類物質(zhì)并對它的清除ABTS+進行測定，清除能力最高達597.46 Eq/Kg。徐金瑞，張名位等人就在體外環(huán)境下，探究了抗氧化能力，結(jié)果表明黑豆皮花色苷提取物對體外清除自由基具有很強的作用，其清除能力可以達到維生素C的2倍。

4.2 降血糖性

張繼曼等人就提取純化后的黑豆花色苷的降血糖性進行了研究，他們設(shè)置了4組試驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對于使用黑豆花色苷組的小鼠，其血糖含量有一定的變化，且花色苷含量越高，降血糖效果越明顯；另外，其研究發(fā)現(xiàn)，花色苷實現(xiàn)降血糖作用的原因可能是通過提高胰島素的含量實現(xiàn)的。

4.3 保肝作用

研究還發(fā)現(xiàn)黑豆的花色苷在一定程度上具有保肝的作用。劉曉芳等通過小鼠實驗，利用從黑豆中提取的紅色素對肝損傷的小鼠進行治療，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通過黑豆的紅色素處理的小鼠，其肝臟損傷系數(shù)可以大大降低，從而說明黑豆中的紅色素在一定程度上可以實現(xiàn)保肝的作用。

5 總結(jié)和展望

黑豆中的花色苷提取、純化分離等技術(shù)以被廣泛研究并日益成熟，并且花色苷具有各種生物活性，其正被人們廣泛應用在我們生活中的各個行業(yè)中，因此我們要了解其結(jié)構(gòu)和作用原理，這需要我們進一步探索。