曹勛紅 常英軍 黃曉軍 趙翔宇 （北京大學人民醫(yī)院血液研究所，北京100044）

粒細胞集落刺激因子（granulocyte colony-stimu?lating factor，G-CSF），又稱集落刺激因子3（CSF3）是體內(nèi)非常重要的細胞生長因子，主要由活化的單核/巨噬細胞、成纖維細胞、骨髓基質(zhì)細胞等產(chǎn)生，是中性粒細胞產(chǎn)生的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子［1］。G-CSF 通過與相應(yīng)細胞表面的特異性受體G-CSFR（即CSF3R）結(jié)合，激活一系列的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，發(fā)揮多種生物學功能，包括調(diào)節(jié)粒細胞的分化、增殖與存活，動員骨髓造血干細胞入外周血并且誘導(dǎo)移植物中T 細胞、樹突狀細胞（dendritic cells，DC）免疫耐受等［2-3］。目前已知G-CSF體內(nèi)應(yīng)用可通過直接或者間接的方式影響移植物組分中的免疫細胞亞群；然而，目前公認G-CSFR 在髓系來源的細胞表面表達，淋巴細胞表面G-CSFR 的表達調(diào)控及其生物學意義研究目前尚不明確。因此綜述近年來G-CSF對免疫細胞的功能調(diào)控及G-CSFR 在淋巴細胞中表達調(diào)控作用的研究。

1 G-CSF 及其受體CSF3R 的分子結(jié)構(gòu)與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)

1.1 G-CSF 分子結(jié)構(gòu)及細胞來源 G-CSF 是由CSF3 基因編碼而成的由204 個氨基酸構(gòu)成的相對分子質(zhì)量為25 kD 的糖蛋白。該蛋白同時包含信號序列和由174 個氨基酸組成的成熟蛋白質(zhì)；G-CSF包含了4 個圓柱的alpha 螺旋，這些螺旋按不同的方向排列，組成了G-CSF 的蛋白排列形式（如圖1）。在生理情況下，人或者小鼠體內(nèi)幾乎檢測不到血清G-CSF的水平，然而，一旦發(fā)生感染或者損傷等刺激時，G-CSF水平大幅上升，同時腫瘤細胞或組織也會分泌G-CSF 影響腫瘤預(yù)后進展［4-5］。有研究認為體內(nèi)大部分組織均可產(chǎn)生G-CSF，包括成纖維細胞、內(nèi)皮細胞、間皮細胞等［6-8］；且 G-CSF 的分泌除了受細胞-體液調(diào)節(jié)外，還和神經(jīng)調(diào)節(jié)有關(guān)［9］。

圖1 G-CSF蛋白的拓撲異構(gòu)的排列形式Fig.1 Topologically heterogeneous arrangement of G-CSF protein

1.2 G-CSF 受體分子結(jié)構(gòu)及其細胞分布 G-CSFR是造血素受體超家族的成員，該受體沒有內(nèi)在的酪氨酸激酶活性，但當與配體結(jié)合后發(fā)生構(gòu)象變化，從而刺激與其細胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域相關(guān)的多種酪氨酸激酶的活性，介導(dǎo)不同的信號傳導(dǎo)功能。G-CSFR 在細胞中的結(jié)構(gòu)可分為胞膜外段、胞膜段和胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域段。目前認為胞內(nèi)不同的結(jié)構(gòu)域可結(jié)合不同的信號傳導(dǎo)分子從而分別影響相應(yīng)細胞的增殖、分化、存活及負調(diào)控通路（如圖2）。G-CSFR 在人體內(nèi)分布廣泛，主要可分為造血組織和非造血組織：前者在造血干細胞、粒細胞及其前體細胞上均有分布，發(fā)揮促進造血干細胞及中性粒細胞相關(guān)前體細胞的增殖、分化和動員［10-11］；在非造血組織中GCSFR 主要分布在內(nèi)皮細胞、神經(jīng)系統(tǒng)和胎盤組織等［12］。

圖2 G-CSFR受體結(jié)構(gòu)示意圖（A）及信號傳導(dǎo)通路（B）Fig.2 G-CSFR receptor structure diagram（A）and sig?naling pathway（B）

近年來許多研究發(fā)現(xiàn)淋系中G-CSFR 也有高表達，并且不同類型淋巴細胞表達各有差異。有文獻報道證實T細胞表面G-CSFR主要是誘導(dǎo)性表達，而B細胞表面對G-CSFR的表達是基本存在的［13-14］。

1.3 G-CSF 受體基因多樣性與分子結(jié)構(gòu) 與大多數(shù)造血系統(tǒng)的受體一樣，G-CSFR 包含許多同型異構(gòu)體。有研究表明，目前有7種不同的G-CSFR同型異構(gòu)體存在，這些異構(gòu)體均是由轉(zhuǎn)錄本的可變剪接導(dǎo)致（圖3）。異構(gòu)體缺陷導(dǎo)致不可控的信號傳遞：EHLERS 等［15］在一個“AML-BFM 98”的Ⅲ期臨床研究中對除M3的患者使用G-CSF治療的過程中發(fā)現(xiàn)，G-CSFR isoform Ⅳ表達水平低（ISO4＜0.04）的患者經(jīng)G-CSF治療后的五年生存率明顯低于表達水平高的患者。提示Ⅳ型同形異構(gòu)體表達缺陷的AML 患者在接受G-CSF 治療時將不利于患者預(yù)后。KATARZYNA 等［16］對 57 例自體移植的患者進行CSF3R（C＞T，rs3917924）的多肽在性分析后發(fā)現(xiàn)多發(fā)性骨髓瘤患者中CSF3R T等位基因是患者造血干細胞的動員效率低的獨立危險因素，并且因此影響中性粒細胞的恢復(fù)，進一步影響移植預(yù)后。

圖3 G-CSFR的同型異構(gòu)體Fig.3 G-CSFR isoform

1.4 G-CSF 受體連接及其胞內(nèi)信號傳導(dǎo) 當GCSF與其特異性受體G-CSFR結(jié)合時，將引起細胞表面G-CSFR 的結(jié)構(gòu)性改變并活化其下游的一系列信號通路如JAK/STAT、PI3K/Akt、p21Ras/Raf/MAPK等［17］。G-CSF 受 體胞內(nèi) 結(jié)構(gòu)域主 要分為 BOX1，B0X2，B0X3，不同的結(jié)構(gòu)域結(jié)合不同的受體酪氨酸家族從而介導(dǎo)不同的功能活性。其中Y704、Y729、Y744、Y764 4 個胞內(nèi)碳端殘基又與G-CSF 信號鏈的持久性密切相關(guān)，ZHUANG等［18］通過酪氨酸-苯丙氨酸替換突變體技術(shù)在小鼠32D 和Ba/F3細胞中證實了Y729 是維持Stat5 信號通路的重要位點，且介導(dǎo)了由SOCS1/3 參與的G-CSF 負反饋信號通路的活化。HU 等［19］也通過此技術(shù)在 32D 細胞中證實了Y729 是中性粒細胞發(fā)育分化的重要靶點，Y729 的突變將導(dǎo)致中性粒細胞向單核細胞分化發(fā)育，且在G-CSF 刺激下主要由ERK1/2 信號介導(dǎo)，因此當封閉了ERK1/2 相關(guān)信號通路時，中性粒細胞分化發(fā)育將逐漸恢復(fù)。

闡述G-CSFR 活化后激活的相關(guān)下游信號通路（圖4）。但是截至目前，G-CSFR 參與的下游信號通路也只局限于簡單的直線型的通路闡述，對于這些信號通路間是否存在相互關(guān)聯(lián)及它們是如何在細胞內(nèi)競爭或者互補目前尚未明確。以上的信號通路的級聯(lián)反應(yīng)將影響細胞的存活增殖和分化狀態(tài)。

圖4 G-CSFR經(jīng)配體活化后介導(dǎo)的信號通路Fig.4 G-CSFR signaling pathway mediated by ligand activation

1.5 G-CSF 受體表達調(diào)控 G-CSF 與 G-CSFR 接受引起的級聯(lián)信號通路介導(dǎo)了多種生物學功能，然而信號的持續(xù)活化將不利于機體穩(wěn)態(tài)的維持，因此明晰G-CSFR 如何在細胞中的表達調(diào)控過程也尤為重要。TAMILA 等［20］的研究證實了蛋白酶體途徑參與了胞內(nèi)G-CSFR 的降解，從而減弱G-CSF 刺激時GCSFR 的持續(xù)激活。除此之外，溶酶體途徑也參與了G-CSFR 的蛋白降解調(diào)控［21-22］。但是無論是蛋白酶體還是溶酶體途徑介導(dǎo)的G-CSFR 調(diào)控，都是基于G-CSF配體與之受體結(jié)合后會引起的受體內(nèi)吞再循環(huán)。PIPER 等［23］在體外用中性粒細胞彈性蛋白酶（neutrophil elastase，NE）處理純化人外周血來源的中性粒細胞通過流式細胞術(shù)與Western blot 檢測其表面G-CSFR 表達明顯下降且會干擾PMN 體外形成集落的能力，進一步完善了G-CSFR 的表達調(diào)控機制。然而，目前研究均聚焦于G-CSFR 的降解調(diào)控中，對于G-CSFR 在細胞表面誘導(dǎo)表達增多的調(diào)節(jié)機制目前尚無報道，G-CSFR 轉(zhuǎn)錄本的表達增多可以促進G-CSFR 蛋白的翻譯增多，同時也應(yīng)考慮，細胞內(nèi)部的蛋白轉(zhuǎn)運的改變也可能影響G-CSF在細胞中的分布［24-25］。

2 G-CSF對免疫細胞調(diào)控的研究進展

2.1 G-CSF 對中性粒細胞的調(diào)控 中性粒細胞是外周血循環(huán)中最豐富的白細胞并且在各種炎癥條件下起致病作用［26］。G-CSF能促使造血前體細胞分化為完全成熟的中性粒細胞及可促進成熟的中性粒細胞自骨髓釋放到組織和外周血中，是中性粒細胞分化發(fā)育及功能活化的重要細胞因子［27］。中性粒細胞表面高表達G-CSF 受體，G-CSF 與其高度特異性受體結(jié)合發(fā)揮重要作用。G-CSF 與G-CSFR 的結(jié)合將誘導(dǎo)不同的信號通路調(diào)控：Jak-Stat、Ras-MAPK 及 Src 激酶等途徑。WARD 等［28］在研究先天性粒細胞減少癥的過程中發(fā)現(xiàn)活化的STAT5 可以明顯增強G-CSFR 介導(dǎo)的增殖反應(yīng)，小鼠實驗也表明當骨髓中缺失STAT5a 及STAT5b 蛋白時，小鼠骨髓無法合成中性粒細胞，提示G-CSFR 在粒細胞增殖及分化過程中發(fā)揮重要作用［29］。除此之外，MAPK 也被證實在G-CSF 誘導(dǎo)的中性粒細胞增殖、分化及功能成熟中發(fā)揮重要作用［30］。鑒于此，G-CSFG-CSFR 信號軸在中性粒細胞的生物學調(diào)控中發(fā)揮重要作用。

2.2 G-CSF對T細胞調(diào)控 T細胞是介導(dǎo)造血干細胞移植后急性移植物抗宿主?。╝cute graft versus disease，aGVHD）的最主要的免疫細胞。G-CSF動員骨髓造血干細胞入外周的同時可增加外周血中10 倍的 T 細胞，盡管如此，移植后 aGVHD 發(fā)生率卻未顯著增加。這與G-CSF能夠通過直接和間接的方式誘導(dǎo)T細胞的免疫耐受有關(guān)。

2.2.1 G-CSF對T細胞的直接調(diào)控 早在2003年，F(xiàn)RANZKE 等［31］就發(fā)現(xiàn)體內(nèi) G-CSF 應(yīng)用可誘導(dǎo) T 細胞表面G-CSFR mRNA 和蛋白的表達，且伴隨著供者T 細胞由Th1 型向Th2 型的極化改變。2014 年MACDONALD 等［32］在構(gòu)建的小鼠動物實驗?zāi)Ｐ椭幸脖砻髁薌-CSF 是直接通過G-CSFR 作用T 細胞從而降低小鼠移植后aGVHD 的發(fā)生，雖然AMD3100動員劑（主要是CXCR4軸）也可以動員CD34陽性細胞，但與G-CSF處理的小鼠相比，只有G-CSF動員的小鼠才對GVHD有保護作用，提示T細胞受GCSF調(diào)控的作用與CXCR4 軸誘導(dǎo)的動員過程并沒有直接影響。體外實驗證實G-CSF 不能直接上調(diào)T 細胞表面的G-CSFR表達，但是當T細胞經(jīng)過強刺激預(yù)活化后，其表面的CD114表達明顯增加，此時G-CSF有協(xié)同增強G-CSFR 表達的趨勢。該研究結(jié)果表明GCSF 體外直接刺激純化的活化的T 細胞，將降低CD4+效應(yīng)細胞表面CD25 的表達，且低劑量G-CSF（0.01 ng/ml）即能明顯降低T 細胞分泌IFN-γ 能力，高劑量（1~10 ng/ml）G-CSF 刺激增加 IL-4 的分泌且有增強IL-10 分泌的趨勢［33］。造血干細胞移植過程中，由于放化療等影響，機體處于高炎癥因子風暴狀態(tài)，活化型因子及各種抗原的釋放是否通過誘導(dǎo)T 細胞表面 G-CSFR 的表達，促使 G-CSF 對 T 細胞的直接調(diào)控，進一步影響受者體內(nèi)T 細胞的表型和功能狀態(tài)，從而影響預(yù)后，需要進一步研究。

2.2.2 G-CSF 對T 細胞的間接調(diào)控 盡管G-CSF能夠通過直接與T 細胞誘導(dǎo)上調(diào)的G-CSFR 結(jié)合而發(fā)揮免疫調(diào)控作用，目前也已有越來越多的證據(jù)表明G-CSF 主要通過影響其他細胞從而間接調(diào)控T 細胞的功能狀態(tài)。YANG 等［34］綜述了 G-CSF 通過影響Tregs、DCs、單核和MDSCs的功能狀態(tài)間接誘導(dǎo)T細胞的免疫耐受。見圖5。除上所述，G-CSF也能通過調(diào)控中性粒細胞誘導(dǎo)T 細胞的免疫耐受。MARINI等［35］首次將G-CSF動員后的外周中性粒細胞根據(jù)其表面CD10 分子的表達有無分為成熟的CD10+中性粒細胞亞群和不成熟的CD10?中性粒細胞，進一步分析兩亞群的功能后發(fā)現(xiàn)，雖然G-CSF 動員并沒有增加供者體內(nèi)上述兩亞群細胞的數(shù)量，但是G-CSF動員后的供者相比于未被G-CSF動員的供者體內(nèi)的CD10+LDNs 和CD10+NDNs 細胞比例明顯升高，且體外能夠抑制活化T 細胞增殖和分泌IFN-γ。這對如何控制T 細胞的活化提供了新的思路。2016 年P(guān)EROBELLI 等［36］的小鼠動物實驗也證明了 G-CSF體內(nèi)可以直接誘導(dǎo)能分泌IL-10 的調(diào)節(jié)性中性粒細胞，且該群細胞在保留GVL 效應(yīng)的同時能夠明顯降低移植后aGVHD的發(fā)生。

圖5 G-CSF通過影響Treg、DCs和MDSC間接改變T細胞的功能狀態(tài)Fig.5 G-CSF indirectly changes functional status of T cells by affecting Tregs，DCs and MDSC

因此，T 細胞作為誘導(dǎo)GVHD 和發(fā)揮抗GVL 效應(yīng)的核心要素，進一步闡明G-CSF 如何直接或者間接影響T細胞的免疫耐受的分子機制將有利于未來臨床藥物靶點的研究。

2.3 G-CSF 對DC 細胞的調(diào)控 樹突狀細胞（den?dritic cells，DCs）是一群異質(zhì)性很強的細胞群體，并且根據(jù)表面標志物CD11C 和CD123 的分布情況可歸類為髓系來源的DCs，CD11C+CD123dim，也即髓樣DCs（myeloid dendritic cells，mDCs）和淋系來源的DCs，CD11C?CD123+，也即漿細胞樣DC（plasmacytoid dendritic cells，pDC）［37］。G-CSF 動員能夠增加健康供者外周血中DCs的絕對數(shù)量，并且動員后CD11c?/CD11c+的絕對數(shù)比值增加，說明G-CSF 以擴增漿細胞樣 DCs 為主［38］。外周血中純化的 mDC 主要誘導(dǎo)Th1 應(yīng)答免疫，而 pDC 誘導(dǎo) Th2 免疫反應(yīng)［39］。有研究發(fā)現(xiàn)G-CSF 動員導(dǎo)致健康供者外周血中DC 細胞表面的CD62L 表達下調(diào)，而趨化因子受體CCR7 表達上調(diào)，由此推測G-CSF 可能通過改變DCs 表面黏附分子和趨化因子的表達分布實現(xiàn)DCs 的動員［40］。體外實驗進一步表明，健康供者應(yīng)用G-CSF 后血清中顯著增加的IL-10 和TNF-α 可以促使單核細胞分化為具有調(diào)節(jié)功能的DCs，后者與初始T 細胞共培養(yǎng)時，可誘導(dǎo)分泌TGF-β和IL-10的Tregs產(chǎn)生，從而抑制同種異體反應(yīng)性T 細胞的活化［41］。盡管G-CSF對DCs 的調(diào)控目前已經(jīng)得到廣泛的研究，然而以往文獻都是基于體內(nèi)G-CSF 應(yīng)用過程中進一步研究DCs生物學功能的變化，相關(guān)的基礎(chǔ)研究甚是缺乏。BHARADWAJ 等［42］體外 G-CSF（20 ng/ml）刺激人單核細胞來源的DCs后Western blot檢測發(fā)現(xiàn)pstat3明顯升高，提示G-CSF 可能通過JAK/STAT 信號通路介導(dǎo)DCs的分化發(fā)育。JAK/STAT是G-CSF/G-CSFR介導(dǎo)的直接下游通路，因此提示G-CSF 可能通過直接信號通路參與了DCs生物學功能的改變。與此同時，MORRIS 等［43］2008 年首次闡述了全身放射治療（total body irritation，TBI）后的小鼠體內(nèi)的抗原遞呈細胞（antigen presenting cells，APC）將高表達 GCSFR，而同時使用G-CSF 合并治療時，將誘發(fā)炎癥APCs的反應(yīng)，從而誘導(dǎo)急慢性GVHD 的發(fā)生。提示DC 細胞上G-CSFR 表達可能參與促炎作用。在SIVAKUMAR 等［44］構(gòu)建的小鼠 cGVHD 模型中得以進一步證實，即B6.Sle2c2小鼠由于其DCs細胞低的表達G-CSFR，促進了調(diào)節(jié)性CD8a+DCs 的存留并進一步促使T 細胞向具有Foxp3 的調(diào)節(jié)性T 細胞的分化發(fā)育，誘導(dǎo)免疫耐受。以上均說明G-CSF 可能通過G-CSFR 直接參與了DCs 功能的調(diào)節(jié)，但是具體的調(diào)節(jié)機制仍需要更多的研究。

2.4 G-CSF 對單核細胞的調(diào)控 G-CSF 動員能夠顯著增加健康供者外周血移植物組分中的CD14+的單核細胞的數(shù)量，且該類細胞以分泌IL-10 這類調(diào)節(jié)性細胞因子為主，與此同時，G-CSF動員能夠顯著抑制單核細胞分泌 IL-12、TNF-α、IFN-γ 等炎癥細胞因子［45-47］。最近，MAVD 等［48］發(fā)現(xiàn)人和小鼠接受 GCSF 后，其外周造血干細胞中的CD14+單核細胞不僅能夠以劑量依賴性的方式抑制T 細胞的增殖，還可在活化T 細胞分泌的IFN-γ 的刺激下，產(chǎn)生NO，從而誘導(dǎo)同種異體T 細胞凋亡，凋亡的T 細胞被巨噬細胞吞噬后釋放的TGF-β 能夠促進Treg 細胞擴增，進一步誘導(dǎo)T 細胞免疫耐受。單核細胞上有GCSFR表達，但G-CSF是直接還是間接作用于單核細胞功能的調(diào)節(jié)，目前尚缺乏研究。

2.5 G-CSF對NK細胞的調(diào)控

2.5.1 G-CSF與NK細胞增殖分化的關(guān)系 MILLER等［49］體 外 實 驗 表 明 G-CSF 可 抑 制 外 周 CD34+Lin?DR?前體細胞分化為 NK 細胞，而外源性 G-CSF對成熟NK 細胞增殖并無影響性，也不排除NK 細胞在體內(nèi)經(jīng)G-CSF處理之后細胞毒性及增殖能力下降是與G-CSF 對NK 細胞的間接作用有關(guān)，但是具體調(diào)控機制仍需要不斷研究。本課題組應(yīng)用CFSE 體外標記G-CSF 體內(nèi)運用前后的骨髓NK 細胞，比較NK 細胞體外7 d 增殖的差異，發(fā)現(xiàn)NK 細胞的增殖并無明顯差別，但并沒有探討G-CSF 體內(nèi)應(yīng)用前后NK 細胞前體細胞向NK 細胞分化發(fā)育能力是否不同［50］。

2.5.2 G-CSF 對NK 細胞殺傷活性的影響 SCH?LAHSA 等［51］研究發(fā)現(xiàn) G-CSF 能下調(diào)包括 NKp44、NKp46、NKG2D在內(nèi)的表面活化型受體和減少IFN-γ、TNF-α、GM-CSF、IL-6、IL-8 細胞因子分泌，從而影響NK 細胞表型變化并降低其細胞毒性。但是我中心臨床研究顯示G-CSF 體外并未降低健康供者骨髓NK 細胞的細胞毒性，然而卻能降低分泌IFN-γ 的NK 細胞亞群（NK1），與此同時增加分泌IL-13 的NK細胞（NK2），分泌 TGF-β 的 NK 細胞（NK3）和分泌IL-10 的 NK 細胞（NKr）的比例［50］。從理論上來講，這可能會降低移植物的抗白血病效應(yīng)（Graft versus leukemia，GVL 效應(yīng)）。然而有研究發(fā)現(xiàn)G-CSF 雖然削弱了NK 細胞毒性，但NK1 亞群的減少及NK2、NK3、NKr 亞群比例增多可能對預(yù)防早期aGVHD 發(fā)病率有效；且當G-CSF 逐漸代謝消耗后，NK 細胞的GVL 效應(yīng)抑制也被解除［52］?；诖?，如何發(fā)揮移植物中NK 細胞的最大GVL 作用仍然有賴于研究者們對G-CSF在NK細胞免疫調(diào)控上的深入研究。

盡管G-CSF 對NK 細胞生物學功能的研究已有不少研究報道，但缺乏對于G-CSF 對NK 細胞免疫調(diào)控的生物學機制研究。2011 年 LAURA 等［51］在監(jiān)測體內(nèi)NK 細胞動員前后的G-CSFR 表達情況后發(fā)現(xiàn)NK 細胞表面高表達G-CSF 受體，且體外細胞因子IL-2和IL-15聯(lián)合刺激純化的NK細胞后，G-CSFR可被誘導(dǎo)性的表達，但是對于G-CSFR 在NK 細胞表達所代表的生物學意義尚不清楚，猜想G-CSF 可能通過其高度特異性受體G-CSFR 參與了NK 細胞的生物學功能調(diào)控，對此還要更多的研究來進一步證實該假設(shè)。

綜上可知，G-CSF 可以通過直接或間接的方式調(diào)控多種免疫細胞，主要誘導(dǎo)免疫耐受從而降低移植后aGVHD 的發(fā)生；另一方面，可通過多種機制保留移植物中的免疫細胞的GVL 效應(yīng)。從而實現(xiàn)移植后GVHD 和GVL 的分離，是目前臨床上廣泛應(yīng)用的細胞因子。

3 G-CSFR表達的病理生理意義

3.1 G-CSF 表達與炎癥 G-CSF 可以通過誘導(dǎo)多種免疫細胞耐受從而達到炎癥調(diào)節(jié)的作用［53］。然而G-CSFR，作為G-CSF的高度特異性受體在其中發(fā)揮怎樣的作用呢？有研究表明G-CSF 受體阻斷后，將改善甲基化牛血清白蛋白（methylated BSA，mBSA）導(dǎo)致的小鼠關(guān)節(jié)痛和炎癥。中性粒細胞是炎癥發(fā)生的主要調(diào)控亞群，但是在該模型中，小鼠中性粒細胞亞群（CD11b+Ly6G+F4/80?）的CS3FR 表達并無改變，因此猜測抗G-CSF 受體降低炎癥反應(yīng)可能是不依靠中性粒細胞途徑參與的［54］。有研究顯示DCs 細胞表面G-CSFR 的表達也會影響到炎癥進展，慢性移植物抗宿主?。╟hronic graft versus dis?ease，cGVHD）致病等，可能與免疫反應(yīng)的過度活化有關(guān)。

3.2 G-CSFR 表達與腫瘤 有研究表明，人體內(nèi)高G-CSF 水平及G-CSFR 水平是胃癌預(yù)后不良的危險因素：一方面是由于G-CSF 可以通過直接作用刺激胃癌細胞的增殖和遷移，另一方面G-CSF 能夠促血管生成［55-56］。由于G-CSF 在機體炎癥背景下發(fā)揮誘導(dǎo)免疫耐受及可促血管生成的作用，抗G-CSF 的因子刺激可能對腫瘤生長有抑制作用［57-58］。MORRIS等［59］研究小鼠結(jié)直腸癌的模型表明體內(nèi)拮抗G-CSF因子治療確實能通過增加具有免疫效應(yīng)能力的NK細胞和T細胞，并且降低腫瘤內(nèi)分泌IL-10負性調(diào)節(jié)因子的巨噬細胞的數(shù)量，從而達到抗腫瘤的作用。同時，這一模型也進一步證明無論是人還是小鼠結(jié)直腸癌，均伴隨著G-CSFR 和G-CSF 水平的升高，也進一步促進了G-CSF通過G-CSF受體在腫瘤背景中傳遞的促癌效應(yīng)。TAKESHIMA 等［60］在 C57BL/6 背景小鼠體內(nèi)構(gòu)建的前列腺腫瘤的模型表明，放療之后能促進一群CD11b+Gr?1high+的中性粒細胞入腫瘤并通過ROS 毒性殺傷腫瘤細胞，有趣的是G-CSF的合并使用有利于體內(nèi)清除腫瘤的速度，這間接說明G-CSF/G-CSFR 信號參與了抗腫瘤效應(yīng)。綜上所述，對于G-CSF 及其下游的G-CSFR 通路在腫瘤背景下是發(fā)揮保護作用還是促進作用目前尚無定論，我們猜測，G-CSFR 介導(dǎo)的腫瘤效應(yīng)可能與其活化的細胞群體有關(guān)，從而介導(dǎo)相關(guān)的信號調(diào)控。

4 結(jié)語

G-CSFR 在人體組織的分布廣泛，G-CSF 在與其高度特異性受體G-CSFR 結(jié)合后發(fā)揮多種生物學功能。然而目前其受體多樣性及組織細胞功能差異性仍缺乏相應(yīng)的文獻報道支持，特別是在淋巴免疫細胞上的可誘導(dǎo)調(diào)控及其介導(dǎo)的相關(guān)生物學功能仍不清楚。因此明確G-CSFR 的表達調(diào)控是未來研究的重點；且G-CSF的生物作用性廣泛，無論是生理或是病理情況下均發(fā)生重要的調(diào)節(jié)作用，明確GCSF及受體的生物學調(diào)節(jié)機制顯得極為重要。