陳雪英 ，戴光文，謝麗華，陳 莉，黃治權 ，黃瑞杰，韋邦偉，莫奇初，吳穎航，肖 萍

（1.梧州市漁業(yè)資源養(yǎng)護中心，廣西 梧州 543002；2.梧州市動物疫病預防控制中心，廣西 梧州 543002）

豬圓環(huán)病毒（Porcine circovirus, PCV）為圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬成員，已知包括PCV 1～4（Porcine circovirus type1～4）4種基因型。PCV1對豬無致病性。PCV2可引起豬群一系列疾病，如斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎腎病綜合征（PDNS）、繁殖障礙性綜合征（SMEDI）、豬呼吸障礙綜合征（PRDC）、先天性震顫（CT）等。PCV3也可以引起PDNS、SMEDI和全身多器官的炎癥反應。PCV4于2019年在我國湖南省患有豬呼吸道疾病、腹瀉及皮炎腎病綜合征的豬群中首次發(fā)現(xiàn)。近年來，我國許多省份豬群PCV感染率處于高位，PCV基因型、基因亞型甚至細分亞群被不斷報道，需要特別警惕和重視該病防控。

1 病毒發(fā)現(xiàn)和遺傳變異

豬圓環(huán)病毒（PCV）為單股負鏈環(huán)狀DNA病毒，被認為是目前已知能在哺乳動物細胞中自行復制的最小病毒[1]。PCV1于1974年在豬腎細胞系PK15中發(fā)現(xiàn)，是細胞系的一種污染源，無致病性，基因組長度為1 758 bp或1 759 bp。

PCV2于1998年在斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）患病豬中首次分離到，基因組長度為1 766 bp、1 767 bp和1 768 bp。PCV2與PCV1的核苷酸同源性為68%左右，針對PCV1的單克隆抗體不能識別PCV2[2]，表明兩種病毒在基因組上相關但在抗原性和表型上為不同的兩種病毒。2008年歐盟圓環(huán)病毒研究聯(lián)盟依據(jù)序列比對分析的結果對PCV2基因亞型進行劃分，目前至少報道6種PCV2基因亞型，分別為PCV2a、PCV2b、PCV2c、PCV2d、PCV2e（PCV2e因與PCV2為同一個分支來源，被認為歸入PCV2a）和近年（2017年）報道的PCV2f[3-6]。其中PCV2a亞型又有4個細分亞群，分別為2A、2B、2C、2D亞群。PCV2b亞型也有3個細分亞群，分別是1A、1B、1C亞群。

PCV3于2016年由美國科學家Palinski在豬皮炎和腎病綜合征（PDNS）患病豬中通過宏基因組測序發(fā)現(xiàn)。PCV3基因組長度絕大多數(shù)為2 000 bp，個別毒株為1 999 bp（PCV3-China/GX2016-1）。PCV3與PCV2的核苷酸同源性只有44%左右，與PCV1和PCV2氨基酸相似性分別為31%和48%，這表明PCV3是一個和PCV1、PCV2截然不同的病毒[7]。PCV3有3個亞型，分別是PCV3a、PCV3b、PCV3c。最近有研究表明，PCV3與蝙蝠圓環(huán)病毒親緣關系較近[8]，假說提出PCV3或許是從蝙蝠中演化而來。

PCV4于2019年在我國湖南省患有豬呼吸道疾病、腹瀉及皮炎腎病綜合征的豬群中首次發(fā)現(xiàn)，基因組的大小為1 770 bp。PCV4與其他PCV基因組的同源性為43.2%～51.5%，與水貂圓環(huán)病毒的基因組同源性最高（66.9%）[9]。

2 感染與流行情況

2.1 PCV2的感染與流行

回顧性調查發(fā)現(xiàn)，20世紀80年代西班牙、英國已經存在PCV2感染[10-11]。郎洪武于2000年首次發(fā)現(xiàn)我國7個省市22個豬場的559份血清，PCV2抗體陽性率高達42.9%[12]。此后約20年時間，國內許多學者報道的不同地區(qū)PCV2感染率也高達39.6%～78.3%[13-15]，表明PCV2在我國感染非常普遍。我國PCV2感染主要以PCV2a、PCV2b、PCV2d為主，2000—2003年主要流行毒株為PCV2a，2003年以后轉變?yōu)镻CV2b，2012年開始出現(xiàn)PCV2d逐漸替代PCV2b的趨勢，當前PCV2d已成為PCV2感染的優(yōu)勢毒株[13]，但局部地區(qū)仍有PCV2b、PCV2a流行。

2.2 PCV3的感染與流行

回顧性研究發(fā)現(xiàn)，PCV3在國外50年前就已存在[16]，我國1996年就有發(fā)生[17]。有報道顯示我國至少已在10多個省市發(fā)現(xiàn)PCV3，不同地區(qū)2015—2019年PCV3樣品陽性率在7.24%～26.92%，與PCV2共感染率達到11.72%～22.3%，PCV3感染率呈現(xiàn)逐年上升趨勢[18-20]。蔣智勇等研究發(fā)現(xiàn)，我國華南地區(qū)（廣東、海南、廣西、湖南）2017年PCV3同時存在PCV3a、PCV3b、PCV3亞群[21]。Wen等發(fā)現(xiàn)，2016年廣西檢測到的PCV3呈現(xiàn)出2 000 bp和1 999 bp不同長度[22]，這都表明PCV3呈現(xiàn)出遺傳多樣性。

2.3 PCV4的感染與流行

PCV4于2019年4月在我國湖南首次發(fā)現(xiàn)，湖南省感染率為12.8%[9]。之后，田潤博等對2018—2019年河南地區(qū)16個豬場137份組織樣品檢測陽性率為13.87%，豬腦、肝、脾、肺、腎、小腸和淋巴結病料樣品中均檢測到，PCV4具有廣泛的組織分布和組織嗜性[23]。廣西黃小武等建立PCV4 SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR方法，對56份臨床樣品檢測PCV4陽性率為3.57%[24]。由于PCV4為新近發(fā)現(xiàn)病毒，流行區(qū)域和感染數(shù)據(jù)非常有限。

3 診斷技術和標準

豬圓環(huán)病毒廣泛調查主要采用血清學ELISA方法，診斷則使用分子生物學PCR和熒光PCR方法為主，原位雜交技術（ISH）、環(huán)介導等溫擴增法（LAMP）、免疫組化（IHC）等方法根據(jù)自身特點也有應用。目前PCV1、PCV2診斷有國家標準或地方標準，如GB/T 35901—2018 豬圓環(huán)病毒2型熒光PCR檢測方法、GB/T 34745—2017 豬圓環(huán)病毒2型SYBR GreenⅠ實時熒光定量PCR檢測方法、GB/T 21674—2008 豬圓環(huán)病毒聚合酶鏈式反應試驗方法（1型和2型鑒別）、GB/T 35910—2018 豬圓環(huán)病毒2型阻斷ELISA抗體檢測方法、DB31/T 955—2015 豬圓環(huán)病毒2a/2b亞型實時熒光PCR檢測和分型方法。具有批準文號的商品化PCV2檢測試劑有國藥集團、洛陽普泰生物的豬圓環(huán)病毒2型ELISA抗體檢測試劑盒及瑞普（保定）生物、武漢科前生物、北京金諾百泰的豬圓環(huán)病毒2-dCap-ELISA抗體檢測試劑盒。PCV3診斷有地方標準或團體標準，如DB37/T 4047—2020豬圓環(huán)病毒3型聚合酶鏈式反應檢測方法、DB33/T 2269—2020 豬圓環(huán)病毒2型與3型雙重熒光定量PCR檢測方法、T/CVMA 19—2020 豬圓環(huán)病毒3型熒光PCR檢測方法。目前暫未見PCV4診斷標準公布。

4 疫苗應用

豬圓環(huán)病毒2型已有國產和進口疫苗，PCV3和PCV4無商品化疫苗。目前，具有批準文號的PCV2國產疫苗有：瑞普保定、中牧實業(yè)、哈藥集團、成都天邦、遼寧益康、乾元浩、兆豐華、上海海利、青島中仁澳蘭、廣西麗誠東、揚州優(yōu)邦生物等公司的PCV2滅活疫苗（ZJ/C株、桿狀病毒載體CP08株、LG株、SH株、DBN-SX07、YZ、WH株）及普萊柯生物PCV2基因工程亞單位疫苗。批準的PCV2進口疫苗有：中國牧商（集團）公司代理的勃林格殷格翰動保公司的豬圓環(huán)病毒2型桿狀病毒載體滅活疫苗和碩騰公司的豬圓環(huán)病毒1～2型嵌合體滅活疫苗、北京協(xié)信詩華生物代理的梅里亞公司的豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（1010株）。當前商品化PCV2疫苗只能單一預防PCV2，針對PCV2不同基因亞型交叉保護效果還不明確，且不能預防PCV3和PCV4。今后，同時預防PCV2d、PCV2b、PCV2a不同基因亞型的PCV2疫苗及同時預防PCV2、PCV3、PCV4的聯(lián)合疫苗將是研究方向。