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        豬圓環(huán)病毒研究新進展

        2021-11-26 21:25:24陳雪英戴光文謝麗華黃治權(quán)黃瑞杰韋邦偉莫奇初吳穎航
        養(yǎng)豬 2021年4期
        關(guān)鍵詞:圓環(huán)亞群亞型

        陳雪英 ,戴光文,謝麗華,陳 莉,黃治權(quán) ,黃瑞杰,韋邦偉,莫奇初,吳穎航,肖 萍

        (1.梧州市漁業(yè)資源養(yǎng)護中心,廣西 梧州 543002;2.梧州市動物疫病預(yù)防控制中心,廣西 梧州 543002)

        豬圓環(huán)病毒(Porcine circovirus, PCV)為圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬成員,已知包括PCV 1~4(Porcine circovirus type1~4)4種基因型。PCV1對豬無致病性。PCV2可引起豬群一系列疾病,如斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)、豬皮炎腎病綜合征(PDNS)、繁殖障礙性綜合征(SMEDI)、豬呼吸障礙綜合征(PRDC)、先天性震顫(CT)等。PCV3也可以引起PDNS、SMEDI和全身多器官的炎癥反應(yīng)。PCV4于2019年在我國湖南省患有豬呼吸道疾病、腹瀉及皮炎腎病綜合征的豬群中首次發(fā)現(xiàn)。近年來,我國許多省份豬群PCV感染率處于高位,PCV基因型、基因亞型甚至細分亞群被不斷報道,需要特別警惕和重視該病防控。

        1 病毒發(fā)現(xiàn)和遺傳變異

        豬圓環(huán)病毒(PCV)為單股負鏈環(huán)狀DNA病毒,被認為是目前已知能在哺乳動物細胞中自行復(fù)制的最小病毒[1]。PCV1于1974年在豬腎細胞系PK15中發(fā)現(xiàn),是細胞系的一種污染源,無致病性,基因組長度為1 758 bp或1 759 bp。

        PCV2于1998年在斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)患病豬中首次分離到,基因組長度為1 766 bp、1 767 bp和1 768 bp。PCV2與PCV1的核苷酸同源性為68%左右,針對PCV1的單克隆抗體不能識別PCV2[2],表明兩種病毒在基因組上相關(guān)但在抗原性和表型上為不同的兩種病毒。2008年歐盟圓環(huán)病毒研究聯(lián)盟依據(jù)序列比對分析的結(jié)果對PCV2基因亞型進行劃分,目前至少報道6種PCV2基因亞型,分別為PCV2a、PCV2b、PCV2c、PCV2d、PCV2e(PCV2e因與PCV2為同一個分支來源,被認為歸入PCV2a)和近年(2017年)報道的PCV2f[3-6]。其中PCV2a亞型又有4個細分亞群,分別為2A、2B、2C、2D亞群。PCV2b亞型也有3個細分亞群,分別是1A、1B、1C亞群。

        PCV3于2016年由美國科學(xué)家Palinski在豬皮炎和腎病綜合征(PDNS)患病豬中通過宏基因組測序發(fā)現(xiàn)。PCV3基因組長度絕大多數(shù)為2 000 bp,個別毒株為1 999 bp(PCV3-China/GX2016-1)。PCV3與PCV2的核苷酸同源性只有44%左右,與PCV1和PCV2氨基酸相似性分別為31%和48%,這表明PCV3是一個和PCV1、PCV2截然不同的病毒[7]。PCV3有3個亞型,分別是PCV3a、PCV3b、PCV3c。最近有研究表明,PCV3與蝙蝠圓環(huán)病毒親緣關(guān)系較近[8],假說提出PCV3或許是從蝙蝠中演化而來。

        PCV4于2019年在我國湖南省患有豬呼吸道疾病、腹瀉及皮炎腎病綜合征的豬群中首次發(fā)現(xiàn),基因組的大小為1 770 bp。PCV4與其他PCV基因組的同源性為43.2%~51.5%,與水貂圓環(huán)病毒的基因組同源性最高(66.9%)[9]。

        2 感染與流行情況

        2.1 PCV2的感染與流行

        回顧性調(diào)查發(fā)現(xiàn),20世紀80年代西班牙、英國已經(jīng)存在PCV2感染[10-11]。郎洪武于2000年首次發(fā)現(xiàn)我國7個省市22個豬場的559份血清,PCV2抗體陽性率高達42.9%[12]。此后約20年時間,國內(nèi)許多學(xué)者報道的不同地區(qū)PCV2感染率也高達39.6%~78.3%[13-15],表明PCV2在我國感染非常普遍。我國PCV2感染主要以PCV2a、PCV2b、PCV2d為主,2000—2003年主要流行毒株為PCV2a,2003年以后轉(zhuǎn)變?yōu)镻CV2b,2012年開始出現(xiàn)PCV2d逐漸替代PCV2b的趨勢,當前PCV2d已成為PCV2感染的優(yōu)勢毒株[13],但局部地區(qū)仍有PCV2b、PCV2a流行。

        2.2 PCV3的感染與流行

        回顧性研究發(fā)現(xiàn),PCV3在國外50年前就已存在[16],我國1996年就有發(fā)生[17]。有報道顯示我國至少已在10多個省市發(fā)現(xiàn)PCV3,不同地區(qū)2015—2019年P(guān)CV3樣品陽性率在7.24%~26.92%,與PCV2共感染率達到11.72%~22.3%,PCV3感染率呈現(xiàn)逐年上升趨勢[18-20]。蔣智勇等研究發(fā)現(xiàn),我國華南地區(qū)(廣東、海南、廣西、湖南)2017年P(guān)CV3同時存在PCV3a、PCV3b、PCV3亞群[21]。Wen等發(fā)現(xiàn),2016年廣西檢測到的PCV3呈現(xiàn)出2 000 bp和1 999 bp不同長度[22],這都表明PCV3呈現(xiàn)出遺傳多樣性。

        2.3 PCV4的感染與流行

        PCV4于2019年4月在我國湖南首次發(fā)現(xiàn),湖南省感染率為12.8%[9]。之后,田潤博等對2018—2019年河南地區(qū)16個豬場137份組織樣品檢測陽性率為13.87%,豬腦、肝、脾、肺、腎、小腸和淋巴結(jié)病料樣品中均檢測到,PCV4具有廣泛的組織分布和組織嗜性[23]。廣西黃小武等建立PCV4 SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR方法,對56份臨床樣品檢測PCV4陽性率為3.57%[24]。由于PCV4為新近發(fā)現(xiàn)病毒,流行區(qū)域和感染數(shù)據(jù)非常有限。

        3 診斷技術(shù)和標準

        豬圓環(huán)病毒廣泛調(diào)查主要采用血清學(xué)ELISA方法,診斷則使用分子生物學(xué)PCR和熒光PCR方法為主,原位雜交技術(shù)(ISH)、環(huán)介導(dǎo)等溫擴增法(LAMP)、免疫組化(IHC)等方法根據(jù)自身特點也有應(yīng)用。目前PCV1、PCV2診斷有國家標準或地方標準,如GB/T 35901—2018 豬圓環(huán)病毒2型熒光PCR檢測方法、GB/T 34745—2017 豬圓環(huán)病毒2型SYBR GreenⅠ實時熒光定量PCR檢測方法、GB/T 21674—2008 豬圓環(huán)病毒聚合酶鏈式反應(yīng)試驗方法(1型和2型鑒別)、GB/T 35910—2018 豬圓環(huán)病毒2型阻斷ELISA抗體檢測方法、DB31/T 955—2015 豬圓環(huán)病毒2a/2b亞型實時熒光PCR檢測和分型方法。具有批準文號的商品化PCV2檢測試劑有國藥集團、洛陽普泰生物的豬圓環(huán)病毒2型ELISA抗體檢測試劑盒及瑞普(保定)生物、武漢科前生物、北京金諾百泰的豬圓環(huán)病毒2-dCap-ELISA抗體檢測試劑盒。PCV3診斷有地方標準或團體標準,如DB37/T 4047—2020豬圓環(huán)病毒3型聚合酶鏈式反應(yīng)檢測方法、DB33/T 2269—2020 豬圓環(huán)病毒2型與3型雙重熒光定量PCR檢測方法、T/CVMA 19—2020 豬圓環(huán)病毒3型熒光PCR檢測方法。目前暫未見PCV4診斷標準公布。

        4 疫苗應(yīng)用

        豬圓環(huán)病毒2型已有國產(chǎn)和進口疫苗,PCV3和PCV4無商品化疫苗。目前,具有批準文號的PCV2國產(chǎn)疫苗有:瑞普保定、中牧實業(yè)、哈藥集團、成都天邦、遼寧益康、乾元浩、兆豐華、上海海利、青島中仁澳蘭、廣西麗誠東、揚州優(yōu)邦生物等公司的PCV2滅活疫苗(ZJ/C株、桿狀病毒載體CP08株、LG株、SH株、DBN-SX07、YZ、WH株)及普萊柯生物PCV2基因工程亞單位疫苗。批準的PCV2進口疫苗有:中國牧商(集團)公司代理的勃林格殷格翰動保公司的豬圓環(huán)病毒2型桿狀病毒載體滅活疫苗和碩騰公司的豬圓環(huán)病毒1~2型嵌合體滅活疫苗、北京協(xié)信詩華生物代理的梅里亞公司的豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗(1010株)。當前商品化PCV2疫苗只能單一預(yù)防PCV2,針對PCV2不同基因亞型交叉保護效果還不明確,且不能預(yù)防PCV3和PCV4。今后,同時預(yù)防PCV2d、PCV2b、PCV2a不同基因亞型的PCV2疫苗及同時預(yù)防PCV2、PCV3、PCV4的聯(lián)合疫苗將是研究方向。

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