黃曉萍 孫 珊 招敏娟 韋敬業(yè)

變應(yīng)性鼻炎(Allergic rhinitis，AR)是易感個(gè)體接觸變應(yīng)原后，主要由免疫球蛋白E(IgE)介導(dǎo)的以發(fā)作性噴嚏、流清水樣涕和鼻塞為主要癥狀的鼻黏膜變態(tài)反應(yīng)性炎癥[1]。近年來(lái)，AR的發(fā)病率有逐年增長(zhǎng)的趨勢(shì)，不僅嚴(yán)重影響患者的生活、學(xué)習(xí)、工作，還可以導(dǎo)致或伴發(fā)哮喘、分泌性中耳炎、鼻竇炎和結(jié)膜炎[2]。血清特異性IgE(Specific IgE,sIgE)檢測(cè)是一種針對(duì)AR的檢測(cè)手段，具有特異性強(qiáng)、結(jié)果準(zhǔn)確可靠、安全和定量等優(yōu)點(diǎn)[3]。本研究通過(guò)分析2015年5月—2019年12月佛山市南海區(qū)1230例具有典型AR癥狀與體征的鼻炎患者[4]變應(yīng)原血清sIgE檢測(cè)的結(jié)果，從而了解該地區(qū)變應(yīng)原譜的情況及其特點(diǎn)，為制定AR的防治工作提供臨床參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取 2015年5月—2019年12月，就診于佛山市南海區(qū)公共衛(wèi)生醫(yī)院耳鼻喉科門診具有噴嚏、鼻塞、鼻癢或清涕等AR典型臨床癥狀和體征[4]的鼻炎患者1230例為研究對(duì)象。其中男性717例，女性513例；年齡1～72歲(本研究年齡均為周歲算)，平均年齡(23.60±14.82)歲；其中未成年(<18歲)480例，成年(≥18歲)750例。

1.2 檢測(cè)方法血清sIgE檢測(cè)采用優(yōu)化的ELISA法，使用試劑為博卡生物的過(guò)敏原特異性IgE抗體檢測(cè)試劑盒(由深圳市博卡生物技術(shù)有限公司生產(chǎn))，選取的變應(yīng)原包括總IgE抗體、屋塵、塵螨/粉螨、點(diǎn)青霉/交鏈孢霉/黑根霉、蒿屬植物/艾蒿、榆樹(shù)/柳樹(shù)、蝦/蟹、豬肉/牛肉/羊肉、牛奶、蛋白/蛋黃、花生/大豆。常規(guī)抽取患者靜脈血4 ml，盡快分離血清后，置2～8 ℃保存待測(cè)。檢測(cè)時(shí)，所有試劑盒微孔板平衡至室溫(22～28 ℃)，根據(jù)樣本數(shù)量，從鋁箔袋中取出相應(yīng)數(shù)量的微孔板板條，并作相應(yīng)的標(biāo)記。使用樣本稀釋液兩倍稀釋血清樣本。陰性質(zhì)控孔加入100 μl IgE陰性質(zhì)控血清，陽(yáng)性質(zhì)控孔加入100 μl IgE陽(yáng)性質(zhì)控血清，其他檢測(cè)孔均加入100 μl稀釋后的血清樣本。輕輕搖動(dòng)微孔板，注意不要使內(nèi)容物流出反應(yīng)孔。使用不干膠紙密封已加樣的微孔板，并將其置入37 ℃水浴箱中孵育1 h。甩掉微孔板微孔中的液體，用稀釋好的洗滌緩沖液洗滌微孔板板條。每孔加200～300 μl洗滌液，靜止1 min左右，甩掉微孔板微孔中的液體，拍干。自動(dòng)洗板機(jī)洗滌3次。往所有反應(yīng)孔中加入100 μl生物素標(biāo)記抗人IgE抗體，置37 ℃孵育1 h，自動(dòng)洗板機(jī)洗滌3次。往反應(yīng)孔中加顯色劑A、顯色劑B各50 μl，置37 ℃孵育10 min。每孔加入50 μl終止液終止反應(yīng)。用酶標(biāo)儀選雙波長(zhǎng)450 nm和630 nm讀取吸光度值。在加入終止液后，20 min內(nèi)必須用酶標(biāo)儀(注冊(cè)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號(hào)：YZB/瀘0954-40-2013，型號(hào)規(guī)格：ST-360)讀取完所有反應(yīng)孔的吸光度值。

1.3 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)變應(yīng)原檢測(cè)系統(tǒng)判定方式進(jìn)行結(jié)果判斷，按血清sIgE的濃度分為0～4級(jí)，具體如下。0級(jí)：0～0.15(正常)，1級(jí)：0.16～0.30(輕度)，2級(jí)：0.31～0.60(中度)，3級(jí)：0.61～1.2(重度)，4級(jí)：1.21～4.00(極度)。以≥0.16判定為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，不同影響因素對(duì)變應(yīng)原分布影響采用單因素分析，檢驗(yàn)顯著性取α=0.05，P<0.05則差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 變應(yīng)原分布情況在1230例AR典型臨床癥狀和體征的患者中，總IgE抗體陽(yáng)性患者共1220例，總陽(yáng)性率為99.19%(1220/1230)，其中血清總IgE陽(yáng)性但特異性IgE均陰性的患者有238例，占19.35%。在所有變應(yīng)原陽(yáng)性率最高前三項(xiàng)為塵螨/粉螨(51.38%)、花生/大豆(45.04%)與蛋白/蛋黃(36.34%)，3組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=57.229，P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 常見(jiàn)變應(yīng)原的陽(yáng)性率及反應(yīng)強(qiáng)度分析 (例，%)

2.2 不同性別變應(yīng)原分布情況717例男性患者中血清總IgE陽(yáng)性為710例，陽(yáng)性率為99.02%(710/717)，513例女性患者中血清總IgE陽(yáng)性為510例，陽(yáng)性率為99.42%(510/513)，兩性別陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。比較10種特異性變應(yīng)原在男、女患者中的分布情況，在男、女性患者中10種特異性變應(yīng)原的陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 性別對(duì)變應(yīng)原分布影響的單因素分析 (例，%)

2.3 不同年齡層各變應(yīng)原分別情況將1～72歲1230例患者按照年齡段分為未成年人(<18歲)與成年人(≥18歲)。其中未成年組總IgE陽(yáng)性率為99.38%(477/480)，而成年組陽(yáng)性率為99.07%(743/750)，2組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。比較不同年齡層在10種特異性變應(yīng)原分布情況，未成年組在塵螨/粉螨、點(diǎn)青霉/交鏈孢霉/黑根霉、蝦/蟹、豬肉/牛肉/羊肉、牛奶、蛋白/蛋黃、花生/大豆其變應(yīng)原陽(yáng)性率明顯高于成年組，并且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 年齡層對(duì)變應(yīng)原分布影響的單因素分析 (例，%)

2.4 不同性別與年齡間混合變應(yīng)原陽(yáng)性情況1230例患者中，僅1種變應(yīng)原陽(yáng)性者241例，占19.59%，其中男女例數(shù)分別為140、101例；而同時(shí)有2種或2種以上變應(yīng)原陽(yáng)性共992例，占80.65%，其中男女例數(shù)分別為442、550例，男性、女性的混合變應(yīng)原陽(yáng)性率分別為80.28%、80.20%，不同性別間混合變應(yīng)原陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；未成年人中僅1種變應(yīng)原陽(yáng)性者70例，對(duì)多種變應(yīng)原陽(yáng)性者407例，成年人中1種變應(yīng)原陽(yáng)性例數(shù)為171例，多種變應(yīng)原陽(yáng)性者572例，未成年人與成年人間混合變應(yīng)原陽(yáng)性率分別為85.32%、76.99%，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4 性別與年齡層對(duì)混合變應(yīng)原分布影響的單因素分析 (例，%)

3 討論

據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球有20%～30%的人深受變應(yīng)性疾病的困擾[5]，而且世界衛(wèi)生組織已經(jīng)將其列為21世紀(jì)重點(diǎn)研究和防治的三大疾病之一。而變應(yīng)性鼻炎就是最常見(jiàn)的變應(yīng)性疾病。數(shù)據(jù)顯示，變應(yīng)性鼻炎在普通人群中的發(fā)病率可高達(dá)10%～25%[4]，而且近年來(lái)其發(fā)病率不斷有上升的趨勢(shì)[6]。AR的發(fā)病有其內(nèi)因與外因，外因主要是環(huán)境因素、飲食習(xí)慣等，故不同地域可能存在不同的AR有著不同的流行病學(xué)特征。張羅等[7]對(duì)我國(guó)11個(gè)城市進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查的結(jié)果顯示，發(fā)現(xiàn)AR患病率確實(shí)存在明顯的地域性差異。本研究結(jié)果顯示，佛山市南海區(qū)具典型AR癥狀體征的鼻炎患者，血清sIgE陽(yáng)性檢出率高達(dá)99.19%，相較于珠三角其他地區(qū)，如中山(82.81%)[8]、順德(89.4%)[9]、深圳(83.3%)[10]以及珠海(78.35%)[11]要高。這考慮可能因?yàn)榉鹕侥虾５貐^(qū)處于珠三角中北部，較上述地區(qū)緯度和海拔更高有關(guān)，這種特殊的地理位置造成了其氣溫與日照時(shí)間的不同，從而通過(guò)直接或間接(影響花粉的排放與變應(yīng)原的濃度)[12]作用于人體從而影響sIgE。值得注意的是，本研究中血清總IgE陽(yáng)性但特異性IgE均陰性的患者有238例，占19.35%，并且這部分患者總IgE陽(yáng)性均以過(guò)敏原等級(jí)4級(jí)為主，也就是說(shuō)是否存在未能檢測(cè)到的特異性變應(yīng)原，仍需進(jìn)一步研究，如配合皮膚點(diǎn)刺試驗(yàn)、誘發(fā)試驗(yàn)、擴(kuò)大特異性變應(yīng)原種類等。

本研究數(shù)據(jù)顯示該地區(qū)以塵螨/粉螨的反應(yīng)性最強(qiáng)、陽(yáng)性率最高(51.38%)，結(jié)果與珠海地區(qū)(52.8%)[11]的研究結(jié)果相仿。螨蟲(chóng)分布范圍極廣，而塵螨/粉螨是變應(yīng)性鼻炎的最重要的2種塵螨，其致敏性極強(qiáng)，活螨、死螨及螨的排泄物都具有抗原性[13]。南海地區(qū)屬南亞熱帶季風(fēng)氣候，雨量充沛，空氣濕度大，雨熱同季，極有利于塵螨的生長(zhǎng)。作為主要的變應(yīng)原，針對(duì)性的控制塵螨是該地區(qū)防治變應(yīng)性鼻炎的重中之重[14，15]，同時(shí)，相應(yīng)的塵螨的特異性脫敏治療也應(yīng)積極推進(jìn)。陽(yáng)性率次于塵螨/粉螨的分別是花生/大豆(45.04%)、蛋白/蛋黃(36.34%)，作為2種食入性過(guò)敏原，提示其與佛山南海地區(qū)居民的生活習(xí)慣與飲食結(jié)構(gòu)有關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)佛山南海地區(qū)不同性別間總IgE陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，與珠海、蘇州、成都及天津等地區(qū)學(xué)者研究結(jié)果一致[16-18]。但國(guó)內(nèi)外也有類似研究發(fā)現(xiàn)在兒童時(shí)期變應(yīng)性疾病發(fā)病率性別間存在差異，男性較高[19，20]。這種性別的差異目前研究?jī)H在兒童患者中發(fā)現(xiàn)，是否存在年齡因素干擾，仍需要進(jìn)一步研究。

本研究顯示該地區(qū)未成年人sIgE 陽(yáng)性率與成年人差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但細(xì)化到各類特異性變應(yīng)原中，發(fā)現(xiàn)塵螨/粉螨、點(diǎn)青霉/交鏈孢霉/黑根霉、蝦/蟹、豬肉/牛肉/羊肉、牛奶、蛋白/蛋黃、花生/大豆在未成年中陽(yáng)性率高于成年組，并且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這7種特異性變應(yīng)原中以食入性特異性變應(yīng)原為主，從側(cè)面反映了未成年的食入性變應(yīng)原的過(guò)敏情況要比成年人嚴(yán)重，這與殷皓等[21]研究有不謀而合之處，該研究指出：嬰幼兒組以食入性變應(yīng)原為主，學(xué)齡前組和學(xué)齡組以吸入性變應(yīng)原為主。豬肉、牛肉、牛奶、蛋白、蛋黃都是兒童最常見(jiàn)的食物，并且在早期作為最主要的輔食添加，占據(jù)著未成年人食譜中不可替代的角色。這值得我們反思，在兒童胃腸功能發(fā)育不健全的時(shí)候，過(guò)早的、大量的進(jìn)食這些異體蛋白對(duì)于誘發(fā)兒童過(guò)敏性疾病的高發(fā)是否是一個(gè)重要的誘因，這也值得今后我們進(jìn)一步的研究。國(guó)內(nèi)一些報(bào)道[22]普遍認(rèn)為未成年人具有較高的變應(yīng)原陽(yáng)性率是由于未成年人免疫系統(tǒng)未發(fā)育完善。故有國(guó)外研究指出[23]，存在特應(yīng)性過(guò)敏性體質(zhì)的兒童，被某種過(guò)敏原反復(fù)誘發(fā)致敏后，在成年期更容易患上嚴(yán)重的變態(tài)反應(yīng)性疾病。因此對(duì)于兒童 AR患者，要及早明確過(guò)敏原，積極干預(yù)，從而防止其成年后罹患更嚴(yán)重的變態(tài)反應(yīng)疾病。

佛山南海地區(qū)80.65%患者為混合性變應(yīng)原陽(yáng)性，而單一的較少；性別之間的混合變應(yīng)原陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；但未成年人混合變應(yīng)原陽(yáng)性率要高于成年人。這很大可能主要基于上述兒童免疫系統(tǒng)未健全的事實(shí)。

綜上所述，sIgE與AR患者的吻合性極高，臨床應(yīng)用可提高AR診斷的準(zhǔn)確性；佛山南海地區(qū)變應(yīng)原陽(yáng)性率極高，塵螨/粉螨(51.38%)是誘發(fā)AR的主要變應(yīng)原，是該地區(qū)AR防治的重點(diǎn)，其次為花生/大豆(45.04%)與蛋白/蛋黃(36.34%)；未成年尤其需注意食入性變應(yīng)原及混合過(guò)敏的情況。