陳金輝，林曼芬，羅月紅，朱嘉卉，冼昶華，王飛生

（清遠(yuǎn)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣東 清遠(yuǎn) 511510）

泥鰍廣泛分布在中國、日本、朝鮮、俄羅斯、印度及摩洛哥等國家[1～2]。在中國，除青藏高原外，泥鰍可在全國各地河川、溝渠、水田、池塘、湖泊及水庫等天然淡水水域中生存，尤其在長江和珠江流域中下游分布較廣，群體數(shù)量較大。泥鰍在分類上屬鯉形目、鯉亞目、鰍科屬，主要包括真泥鰍（Misgurnus anguillicaudati）（簡稱泥鰍或真鰍）、大鱗副泥鰍、花鰍、帶紋沙鰍、北方條鰍等品種[3]。

與大鱗副泥鰍相比，真泥鰍個(gè)體較大，最大個(gè)體體長可達(dá)30 cm，重量可達(dá)100 g 以上，更耐低氧，生長速度快，營養(yǎng)價(jià)值更高[4]。廣東，真泥鰍為野生泥鰍群體中的主要品種，也是廣受市場歡迎的泥鰍品種。由于廣東地區(qū)還沒有魚苗繁育場開展真泥鰍的規(guī)?；斯し敝常B(yǎng)殖用真泥鰍苗主要采集自田野溝渠等，苗種質(zhì)量規(guī)格不一，導(dǎo)致綜合養(yǎng)殖效益不高。為滿足本地養(yǎng)殖戶開展真泥鰍養(yǎng)殖的需要，促進(jìn)泥鰍養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，有必要開展適合廣東水土氣候條件的真泥鰍苗種規(guī)?；庇夹g(shù)研究。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)試劑

絨毛膜促性腺激素（HCG）購買自寧波市第二激素廠，規(guī)格為10000 單位/支。

1.2 親本及其培育

從清遠(yuǎn)地區(qū)的農(nóng)貿(mào)市場購買自天然水體中捕捉的野生真泥鰍，選留體長10 cm 以上、體重10 g 以上且游動(dòng)迅捷的雌雄個(gè)體用作親本。

設(shè)親本飼養(yǎng)池對親本進(jìn)行專池培育。專池使用生石灰（75～100 kg/畝）進(jìn)行全池干法消毒，8～10 天后加入花生麩（15～20 kg/畝）肥水。待水色呈黃褐色或綠褐色，并經(jīng)檢測無毒后，放入選留的真泥鰍親本（500 kg/畝），進(jìn)行親本強(qiáng)化培育。培育期間投喂粗蛋白含量為35%～38%的浮性魚飼料（鱸魚料等），投喂量為真泥鰍親本總重量的5%～7%，每日早上（8:30～9:00）、下午（5:30～6:00）各投喂1 次。每星期換水1 次，每次換水量為水體總量的1/4 左右。

1.3 親本雌雄鑒別

親本雌雄鑒別參照向冰和孔祥勇等的方法[5～6]。雄性真泥鰍個(gè)體體型偏小，腹部細(xì)長，胸鰭第二鰭條較其他鰭條更長。雌性真泥鰍個(gè)體體型偏大，腹部肥大，胸鰭前端圓鈍，展開時(shí)呈扇形。

1.4 人工催產(chǎn)

人工催產(chǎn)參照孔祥勇和葉東容等的方法[6～7]。春秋季節(jié)，池塘水溫達(dá)到20℃以上時(shí)，挑選性成熟的雌雄真泥鰍用于催產(chǎn)（雌雄比為1:2）。絨毛膜促性腺激素注射量為每10 g 體重注射150～600 IU，雄性真泥鰍劑量減半，每尾真泥鰍注射液給量不超過500 μL。注射激素后，將親本飼養(yǎng)在20℃～22℃的水中。

1.5 人工受精

注射催產(chǎn)激素10 h 后，每隔2 h 取5 條雌性真泥鰍擠壓腹部，當(dāng)有卵子能順暢流出時(shí)進(jìn)行濕法授精。濕法授精參照孔祥勇的方法[6]，并做以下改動(dòng)：取雄性真泥鰍的精巢，使用剪刀剪碎，并在研缽中研磨至無肉眼可見精巢組織。使用適量0.75%NaCl 溶液懸浮研碎的精巢組織，將精巢懸浮液緩慢導(dǎo)入裝有卵子的干凈瓷碗中，并用干凈的羽毛勻速攪拌3 min 左右，使精液和卵子混勻，充分受精。

1.6 人工孵化

將受精后的卵子使用20℃～22℃的井水漂洗2～3 次，去掉血水。然后將受精卵均勻撒布到孵化池中的“毛毛蟲”魚巢上，啟動(dòng)長管微孔增氧，在20℃～22℃的水中進(jìn)行流水孵化，如圖1所示。

圖1 為粘附在魚巢上的受精卵進(jìn)行微孔增氧

1.7 動(dòng)物餌料培育和捕撈

1.7.1 鹵蟲無節(jié)幼體培育。人工配置15～20 ppm 咸淡水，使用NaOH 溶液調(diào)節(jié)咸淡水pH 值到8.0～9.0 之間。在配置好的咸淡水中接種鹵蟲卵(購買自格爾木潤澤生物科技開發(fā)有限公司)，并在日光燈照射、常溫下進(jìn)行充氣培養(yǎng)。培養(yǎng)15 h 后，每隔1 h 顯微鏡鏡檢1 次，至鹵蟲進(jìn)入無節(jié)幼體階段時(shí)收集鹵蟲無節(jié)幼體階段幼蟲，用于真泥鰍魚苗飼喂。

1.7.2 水蚤培育。水溫在18℃以上時(shí)，在水蚤早晚聚集時(shí)，使用60 目浮游動(dòng)物網(wǎng)從富營養(yǎng)水體中采集水蚤，用作蚤種。然后將蚤種接種到已施足基肥（每立方米水體施尿素30 g、酵母20 g）的土池中，之后每隔10 天追肥1 次，每立方米水體施尿素15 g、酵母10 g。經(jīng)15 天培育后，可每天撈取總量10%～20%的水蚤作為魚苗飼料。

1.8 鰍苗培育

使用孵化池進(jìn)行鰍苗培育。在孵化池中，待卵黃被吸收后，給鰍苗投喂開口餌料。開口餌料為肥水（土池培育，下同）+雞蛋黃（煮熟的雞蛋黃使用4 層紗布進(jìn)行過濾）、肥水+鹵蟲幼蟲或肥水+水蚤。在孵化池中飼喂7 天后，將真泥鰍魚苗轉(zhuǎn)移至已做清塘處理的土池中，進(jìn)行鰍種培育。

1.9 統(tǒng)計(jì)分析

1.9.1 催產(chǎn)率分析。注射HCG 后10 h，每隔2 h 隨機(jī)取樣5 條雌性真泥鰍，輕輕擠壓腹部，如檢測到3 條以上真泥鰍的卵子能順暢流出，則開始進(jìn)行人工受精。取雌性真泥鰍擠壓腹部，記錄卵留出情況，順暢流出為催產(chǎn)成功，不能順暢流出為催產(chǎn)失敗，然后計(jì)算催產(chǎn)率。

1.9.2 受精率分析。人工受精1 h 后，從魚巢中刷取卵子，用清水洗掉雜物。使用吸管任意取100 顆卵子，將之轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿中。在光學(xué)顯微鏡下觀察卵子是否受精，計(jì)算受精率。

1.9.3 存活率分析。隨機(jī)選擇200 尾孵化出的真泥鰍魚苗，飼養(yǎng)在直徑40 cm 的塑料圓盆中，以肥水+雞蛋黃、肥水+鹵蟲幼蟲或肥水+水蚤作為開口餌料，進(jìn)行真泥鰍魚苗飼養(yǎng)。受精后第10 天統(tǒng)計(jì)真泥鰍魚苗數(shù)量，計(jì)算存活率。

2 試驗(yàn)結(jié)果與討論

2.1 HCG 對真泥鰍的催產(chǎn)影響

泥鰍為1 年多次產(chǎn)卵性魚類，HCG 對泥鰍催產(chǎn)是可行的[8～9]，本試驗(yàn)HCG 對真泥鰍的催產(chǎn)結(jié)果詳見表1。由表1 可知，第4組的效應(yīng)時(shí)間最短，為（13.11±0.27）h；第1 組的效應(yīng)時(shí)間最長。隨著HCG 激素劑量的加大，效應(yīng)時(shí)間逐漸縮短，這與葉東容等的研究結(jié)果一致[7]。第4 組的催產(chǎn)率最高，但是4 組之間的催產(chǎn)率沒有顯著差異（p＞0.05）。第2 組的受精率最高，但是4 組之間的受精率也沒有顯著差異（p＞0.05）。

表1 HCG 對真泥鰍的催產(chǎn)結(jié)果

上述結(jié)果表明，在一定溫度條件下（20℃～22℃），在一定的HCG 劑量范圍內(nèi)，效應(yīng)時(shí)間與HCG 劑量呈正相關(guān)，但是催產(chǎn)率和受精率與HCG 劑量無密切聯(lián)系。

2.2 開口餌料對魚苗存活率的影響

開口餌料對魚苗的存活率影響詳見圖2。飼喂雞蛋黃試驗(yàn)組的存活率為33.68%±1.82%，飼喂鹵蟲無節(jié)幼體試驗(yàn)組的存活率為45.25%±1.54%，飼喂水蚤試驗(yàn)組的存活率為40.97%±1.25%。其中飼喂鹵蟲無節(jié)幼體試驗(yàn)組和飼喂水蚤試驗(yàn)組的存活率均顯著高于飼喂雞蛋黃試驗(yàn)組的存活率（p＞0.05），這表明鹵蟲無節(jié)幼體和水蚤較雞蛋黃更適合作為真泥鰍魚苗的開口餌料。

圖2 3 種開口餌料對真泥鰍魚苗存活率的影響分析

鹵蟲無節(jié)幼體和水蚤較雞蛋黃更適合作為真泥鰍魚苗的開口餌料可能是因?yàn)椋蝴u蟲無節(jié)幼體和水蚤是活體，不容易導(dǎo)致水體惡化；鹵蟲無節(jié)幼體和水蚤含有豐富的動(dòng)物蛋白，更符合真泥鰍魚苗對各類氨基酸的需求。