河生德 羅延洪 祁 果* 才讓卓瑪 鐵富萍 劉文清 李長(zhǎng)云 祁海云 才仁加

1.青海省海晏縣畜牧獸醫(yī)站，青海海晏 812299；2.96351部隊(duì)牧場(chǎng)，青海海晏 812299

疫苗作為預(yù)防疫病的生物制劑，上市的疫苗一般是安全有效的，但在聯(lián)合使用時(shí)則需要進(jìn)行更廣泛的安全性和效力試驗(yàn)[1]。海晏縣高原型藏羊（下稱藏羊）每年進(jìn)行免疫的疫苗種類達(dá)10 種以上，為減少藏羊抓捕及免疫次數(shù)、降低應(yīng)激反應(yīng)、了解不同類型多種疫苗聯(lián)合免疫對(duì)藏羔羊體重指標(biāo)的影響，本試驗(yàn)探討了單苗和多種疫苗聯(lián)合免疫對(duì)高原型藏羔羊體重指標(biāo)的影響，以期為多種疫苗聯(lián)合免疫提供相關(guān)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及時(shí)間

隨機(jī)選取96351部隊(duì)牧場(chǎng)三大隊(duì)一戶牧民飼養(yǎng)的斷奶高原型藏羊母羊羔165 只作為試驗(yàn)羊，羔羊年齡4～5月齡，臨床檢查健康，均有羊角，體格大小基本一致。本試驗(yàn)2019年9月23日開(kāi)始，2020年4月24日結(jié)束。

1.2 飼養(yǎng)管理

羊群采取同年齡、同性別組群，統(tǒng)一進(jìn)行預(yù)防注射的方式進(jìn)行管理，全年自然放牧。12月10日開(kāi)始補(bǔ)飼玉米（0.1 kg/（只·d）），4月16日停止補(bǔ)飼。羊群放牧地海拔3 200 m 以上，寒冷多風(fēng)，草場(chǎng)面積大，冬春季節(jié)圍欄草場(chǎng)牧草充足，但羊群有圈無(wú)棚，基礎(chǔ)設(shè)施差。

1.3 試驗(yàn)疫苗及類型

本試驗(yàn)所用疫苗由青海省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心統(tǒng)一提供。其中：病毒苗3 種，分別為口蹄疫O型滅活疫苗（生產(chǎn)批號(hào)：F190706J）、小反芻獸疫活疫苗和羊痘活疫苗（生產(chǎn)批號(hào)：2018037-2 和201822）；菌苗1 種，為布魯氏菌S2 號(hào)活疫苗（生產(chǎn)批號(hào)：190101）；寄生蟲(chóng)疫苗1種，為羊棘球蚴（包蟲(chóng)）病基因工程亞單位疫苗（生產(chǎn)批號(hào)：2018016-2）。

1.4 試驗(yàn)分組及標(biāo)記

1）分組。試驗(yàn)羊分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，試驗(yàn)組選擇同群藏羔羊90 只，分3 個(gè)試驗(yàn)小組，每小組30只，其中：1組分點(diǎn)注射羊痘+小反芻獸疫+包蟲(chóng)病3種疫苗；2組分點(diǎn)注射小反芻獸疫+包蟲(chóng)病+布魯氏菌病3 種疫苗；3 組分點(diǎn)注射口蹄疫+小反芻獸疫+羊痘3種疫苗。對(duì)照組每組15只，分別注射口蹄疫、小反芻獸疫、羊痘、包蟲(chóng)病和布病5種疫苗，共計(jì)75只。

2）標(biāo)記。試驗(yàn)羊均在耳根皮下埋設(shè)電子耳標(biāo)，耳朵佩戴鑒定耳標(biāo)，詳細(xì)記錄耳標(biāo)編號(hào)。不同分組在不同羊角用紅、黃、藍(lán)、黑油漆進(jìn)行涂抹，以區(qū)分不同的試驗(yàn)分組。

1.5 稱重方法

隨機(jī)確定稱重羊只，以后每次、每組對(duì)應(yīng)稱重10 只左右。試驗(yàn)羊使用電子秤連續(xù)稱重，第1 個(gè)月稱重3次，以后每個(gè)月測(cè)定1次，共測(cè)定9次，記錄數(shù)據(jù)并進(jìn)行差異性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 試驗(yàn)組和對(duì)照組平均體重變化

與開(kāi)始體重比較，試驗(yàn)組藏羔羊平均體重在免疫后第7 天略有下降，增幅-0.34 kg；第23 天體重增幅達(dá)到最高值1.37 kg，以后逐漸下降，第210天時(shí)體重增幅-3.44 kg，與各時(shí)間段數(shù)據(jù)比較差異極顯著。對(duì)照組藏羔羊平均體重在免疫后稍有增加，增幅0.22 kg，第23 天體重增幅達(dá)到最高值1.14 kg，之后逐漸下降，第210 天時(shí)體重增幅-3.02 kg，與各時(shí)間段數(shù)據(jù)比較差異極顯著。不同時(shí)間段試驗(yàn)組和對(duì)照組平均體重差異均不顯著（表1）。

表1 試驗(yàn)羊體重增幅

續(xù)上表

藏羔羊9月進(jìn)行預(yù)防注射，7 d內(nèi)平均體重增幅波動(dòng)范圍-0.34～0.22 kg，雖然差異不顯著，但多疫苗免疫造成的體重降幅稍大于單苗對(duì)照組，后期體重變化基本一致。

2.2 試驗(yàn)組體重變化

在3個(gè)試驗(yàn)小組中，與開(kāi)始體重比較，1、2組試驗(yàn)羊平均體重在第7天時(shí)略有下降，第23天時(shí)達(dá)到最高值，但差異不顯著，第60 天后體重均呈逐漸下降趨勢(shì)，第210 天時(shí)下降幅度達(dá)到最大值，增幅-3.94 kg和-3.38 kg，與各時(shí)間段數(shù)據(jù)比較差異極顯著。3 組體重在第7～60 天呈不同幅度增加，第90 天時(shí)下降，到第210 天時(shí)降到最低體重，增幅-3.11 kg，各數(shù)據(jù)比較差異極顯著。

1、2、3組試驗(yàn)羊第7天時(shí)平均體重在各組間差異極顯著，其他時(shí)間段均不顯著，表明口蹄疫+小反芻獸疫+羊痘組合疫苗注射后的應(yīng)激反應(yīng)顯著小于其他組合，1 周后各組應(yīng)激反應(yīng)消失，體重增幅基本一致（表2）。

2.3 對(duì)照組體重變化

在5 個(gè)對(duì)照組中，與開(kāi)始體重比較，第7 天時(shí)小反芻和布病組體重呈下降狀態(tài)，增幅-0.30～-0.37 kg，其他組呈不同幅度增長(zhǎng)；第23 天時(shí)體重均呈增長(zhǎng)狀態(tài)，達(dá)到最高值；第60～90天時(shí)小反芻、包蟲(chóng)病、布病組體重下降到開(kāi)始體重以下，其他組還維持在開(kāi)始體重以上，羊痘、口蹄疫組差異極顯著；第210天時(shí)各組平均體重均下降到最大值，增幅在-2.25～-4.28 kg，與各時(shí)間段數(shù)據(jù)比較差異極顯著；不同對(duì)照組不同時(shí)間段體重?cái)?shù)據(jù)進(jìn)行比較，差異均不顯著（表3）。

表3 對(duì)照組藏羔羊體重增幅統(tǒng)計(jì)

續(xù)上表

3 討 論

1）羊受到應(yīng)激刺激，機(jī)體會(huì)動(dòng)員大量能量來(lái)應(yīng)對(duì)，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)分解代謝增強(qiáng)，合成和代謝功能會(huì)降低，導(dǎo)致羊生長(zhǎng)停滯、體重下降、飼料轉(zhuǎn)化率降低、膘情下降等不良情況[2]。免疫應(yīng)激會(huì)對(duì)動(dòng)物食欲與代謝產(chǎn)生影響[3]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示：多種疫苗聯(lián)合免疫后，試驗(yàn)羊7 d 內(nèi)體重稍有下降，單苗對(duì)照組呈緩慢增長(zhǎng)，表明多種疫苗聯(lián)合免疫造成的應(yīng)激明顯比單苗免疫強(qiáng)烈，雖然數(shù)據(jù)之間差異不顯著，臨床也沒(méi)有發(fā)生明顯的不良反應(yīng)，但仍然影響了藏羔羊在1 周內(nèi)的增重效果，平均體重變化范圍在-0.34～0.22 kg。筆者認(rèn)為這是藏羊免疫過(guò)程中抓捕和疼痛應(yīng)激刺激與免疫反應(yīng)雙重作用的結(jié)果。

2）第3 小組為病毒苗組合，第7 天時(shí)體重沒(méi)有明顯下降，而第1、2小組為病毒苗+菌苗和病毒苗+

菌苗+蟲(chóng)苗組合，體重降幅大于第3 小組，這可能與注射疫苗的種類有關(guān)。從后期的體重變化來(lái)看，在第23 天時(shí)均達(dá)到最高值，各個(gè)時(shí)期體重下降雖然各有差異，但在第210 天時(shí)與開(kāi)始體重和最高體重比較，降幅基本一致，說(shuō)明藏羔羊多種疫苗聯(lián)合免疫對(duì)體重的長(zhǎng)期影響與單苗免疫并無(wú)差異。郭沈濤[4]認(rèn)為，采用不同疫苗多次免疫的方法使勞動(dòng)成本增加，接種動(dòng)物的應(yīng)激反應(yīng)大，藥物殘留多（主要指佐劑殘留），疫苗之間的免疫抑制作用的機(jī)率也會(huì)增加。權(quán)衡利弊，筆者認(rèn)為在藏羊上采取多疫苗聯(lián)合免疫的方法值得推廣，尤其是口蹄疫+小反芻獸疫+羊痘組合。

3）試驗(yàn)組和對(duì)照組藏羔羊平均體重在第2年4月底時(shí)較開(kāi)始體重平均降低了3.44 和3.02 kg，平均體重降幅達(dá)到了10%以上，高于梁香蘭等[5]的研究結(jié)果（2.82 kg），表明96351 部隊(duì)牧場(chǎng)雖然天然牧草充足，并補(bǔ)充了少量的能量飼料，但由于冬季寒冷，放牧藏羊體重降幅仍大于他人的研究結(jié)果，進(jìn)一步顯示了高寒牧區(qū)基礎(chǔ)設(shè)施的重要性。