孫銀俊

摘要：目的? 對兩種伏立康唑的真菌藥敏試驗(yàn)進(jìn)行對比，發(fā)現(xiàn)兩種不同檢測手段的敏感性差異。方法? 我們使用MIC法（ATB FUNGUS）和KB法（紙片擴(kuò)散法）檢測100株我院住院患者臨床體液標(biāo)本分離的致病性念珠菌，分析2種不同方法的藥敏試驗(yàn)結(jié)果，并進(jìn)行橫向比較。結(jié)果? 我們發(fā)現(xiàn)對于熱帶念珠菌MIC法提示敏感的為52株，K-B法提示敏感的為68株，其中16株為假敏感，我們對差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，發(fā)現(xiàn)差異（P<0.05）;MIC法提示耐藥的為24株，K-B法提示耐藥的為28株，其中4株為假耐藥，我們對差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，發(fā)現(xiàn)差異（P<0.05）。結(jié)論? MIC法檢測準(zhǔn)確性高于KB法，各大醫(yī)院微生物實(shí)驗(yàn)室醫(yī)技人員應(yīng)該采取MIC法來提高臨床診斷，為醫(yī)生提供準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果，及時反映病情發(fā)展，為提供患者針對性性更強(qiáng)的高效抗真菌藥物。

關(guān)鍵詞：伏立康唑;藥敏試驗(yàn);真菌;對比研究

隨著人口的老年化，腫瘤病人的增多，廣譜抗菌藥物的廣泛使用，糖皮質(zhì)激素的使用、免疫抑制劑適應(yīng)癥的放寬，醫(yī)源性操作增多如支氣管鏡檢測、腹腔鏡、膀胱鏡、各種穿刺術(shù)）造成免疫低下人群逐漸增多，人體器官的念珠菌感染比例有上升趨勢，且念珠菌的耐藥性同時上升，限制了醫(yī)療工作者的臨床藥物選擇。伏立康唑是近年來在臨床上使用非常廣泛的三唑類抗真菌藥物，經(jīng)過在國內(nèi)20余年的使用，以及國外各大隨機(jī)雙盲的研究中被證實(shí)是十分有效的抗各類真菌藥品，且安全性也得到了非常好的保證。目前臨床上常用的用于檢測抗真菌藥物的藥敏試驗(yàn)有2種，一種是 MIC法（即ATB FUNGUS 3試劑），另一種是K-B法（丹麥Rosco伏立康唑藥敏紙片擴(kuò)散法），目前各大醫(yī)院暫無對2種體外敏感性試驗(yàn)的評價及對比，本次研究的目的為對兩種伏立康唑的真菌藥敏試驗(yàn)進(jìn)行對比，發(fā)現(xiàn)兩種不同檢測手段的敏感性差異。

1.材料與方法

1.1 菌株來源 選擇我院各大科室的住院病人及門診患者，收集時間為2007年11月至2013年11月，共計(jì)150例患者，將患者體液標(biāo)本（痰液、尿液、大便、胸水、腹水等）送我院中心微生物實(shí)驗(yàn)室檢查，分離得出100株念珠菌，分別使用K-B法及MIC法觀察記錄藥敏試驗(yàn)結(jié)果。

鑒定儀及鑒定卡? 念珠菌采用科瑪嘉念珠菌顯色法，由法國科瑪嘉公司生產(chǎn)，鑒定儀采用法國生物梅里埃埃公司鑒定儀。鑒定卡使用YBC卡，ATB FUNGUS 3真菌藥敏試劑盒，伏立康唑藥敏紙片為丹麥Rosco公司產(chǎn)品。

1.3 方法? 科瑪嘉顯色培養(yǎng)基上接種分離出的念珠菌單個菌落， VITEK32細(xì)菌鑒定儀以及配套的YBC卡鑒定念珠菌，結(jié)合顯色和儀器鑒定的結(jié)果，將念珠菌鑒定到種。分別用MIC法（我們設(shè)置MIC≤1為敏感）和伏立康唑K-B法（抑菌環(huán)直徑≥14設(shè)置為敏感）進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。操作人員按照ATB FUNGUS 3試劑盒使用說明書以及紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)操作規(guī)范流程進(jìn)行檢驗(yàn)工作。念珠菌質(zhì)控株采用ATCC90028質(zhì)控株。

2結(jié)果

2.1 白色念珠菌的菌株分布特點(diǎn)

我們對100株念珠菌進(jìn)行分析，結(jié)果顯示熱帶念珠菌占80株（80%），白色念珠菌4株（4%），光滑念珠菌6株（6%），克柔念珠菌4株（4%），近平滑念珠菌4株（4%）、葡萄牙念珠菌3株（3%）和無名念珠菌念珠菌3株（3%）。

2.2 MIC法與K-B法對念珠菌體外抗菌活性對比

我們發(fā)現(xiàn)對于熱帶念珠菌MIC法提示敏感的為52株，K-B法提示敏感的為68株，其中16株為假敏感，我們對差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，發(fā)現(xiàn)差異（P<0.05）;MIC法提示耐藥的為24株，K-B法提示耐藥的為28株，其中4株為假耐藥，我們對差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，發(fā)現(xiàn)差異（P<0.05）。

3 討論

我們對100株念珠菌進(jìn)行分析，結(jié)果顯示熱帶念珠菌占80株（80%），白色念珠菌4株（4%），光滑念珠菌6株（6%），克柔念珠菌4株（4%），近平滑念珠菌4株（4%）、葡萄牙念珠菌3株（3%）和無名念珠菌念珠菌3株（3%）。表明本院目前念珠菌的感染中，仍以熱帶念珠菌感染居首位，國外也有同樣報(bào)道，我們報(bào)道與其一致。我們本次研究顯示白色念珠菌感染率處于第二位，與全球多國家監(jiān)測結(jié)果顯示，2001-2010 年念珠菌感染中白色念珠菌占15-20%，結(jié)果相似。白色念珠菌是臨床最為常見的酵母，為條件致病菌，是一種特殊的雙相型真菌，毒力最強(qiáng)，和其他微生物處于平衡狀態(tài)。白色念珠菌是人體正常菌，直接鏡檢陽性有診斷意義，在普通培養(yǎng)基以孢子相生長為主，大量菌絲說明念珠菌處于致病狀態(tài)。白色念珠菌侵入機(jī)體后，以孢子相與菌絲相二者混合出現(xiàn)，這樣的形態(tài)與感染性和致病性相關(guān)。

造成MIC法（ATB FUNGUS）和KB法（紙片擴(kuò)散法）的藥物敏感差異我們分析如下：（1）首先是測定方法問題，KB法與宿主體內(nèi)存在白細(xì)胞總數(shù)以及白細(xì)胞吞噬細(xì)胞對真菌的吞噬影響、感染機(jī)體傷口持續(xù)感染都會引起誤差。（2）由于藥物難于穿透機(jī)體的血腦屏障與肺泡膜呼吸屏障，造成藥物不能與病菌作用有效結(jié)合。（3）最后，念珠菌對不同的抗真菌藥的耐藥性有很大差別，不同的念珠菌類型對同一抗真菌藥物的耐藥性差別也很大。因此臨床上使用的KB法體外的藥物敏感試驗(yàn)并不能完全指導(dǎo)臨床的治療用藥。MIC法檢測準(zhǔn)確性高于KB法，各大醫(yī)院微生物實(shí)驗(yàn)室醫(yī)技人員應(yīng)該采取MIC法來提高臨床診斷，為醫(yī)生提供準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果，及時反映病情發(fā)展，為提供患者針對性性更強(qiáng)的高效抗真菌藥物。

參考文獻(xiàn)：

[1]李新華，張玉珍，高秀華1醫(yī)院真菌感染高危因素調(diào)查分析[J]中華醫(yī)院感染學(xué)雜志， 2005， 15（3）： 280-2811

[2] GhannoumMA， Kuhn DM1Voriconazole-better chances for patients with invasivemycoses[J]1Eur JMed Res， 2002， 31（5）： 242-2561

[3]趙德軍，付維嬋1住院患者呼吸道感染白色念珠菌耐藥監(jiān)測[J]檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床， 2008， 5（2）： 27-281