李俊星，劉小茜，趙鋼軍，羅劍寧，龔 浩，鄭曉明，吳海濱

（廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所/廣東省蔬菜新技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510640）

南瓜為葫蘆科南瓜屬草本植物，起源于美洲大陸，是一類重要的園藝蔬菜作物。全世界南瓜屬作物栽培種有5 個(gè)，分別是中國(guó)南瓜、印度南瓜、美洲南瓜、墨西哥南瓜和黑籽南瓜。目前我國(guó)南瓜主要的栽培種為中國(guó)南瓜、印度南瓜與美洲南瓜3 類。近5 年來(lái)，我國(guó)南瓜產(chǎn)業(yè)發(fā)展良好，其播種面積與產(chǎn) 量均高居世界首位。根據(jù)南瓜的主要食用器官或加工對(duì)象，可分為肉用南瓜和籽用 南瓜兩大類。據(jù)中國(guó) 園藝學(xué)會(huì)南瓜研究分會(huì)（2020）統(tǒng)計(jì)，中國(guó)南瓜種植面積28.8 萬(wàn)hm2，產(chǎn)量1 126 萬(wàn)t，是南瓜屬作物中播種面積最大、產(chǎn)量最高的一個(gè)類型。中國(guó)南瓜起源于墨西哥和中南美洲，自明代嘉靖年間傳入中國(guó)以來(lái)，由于其廣適性、易栽培與存貯方便等特性，在我國(guó)南北方具有廣泛的種植區(qū)域，是農(nóng)民增收、農(nóng)村產(chǎn)業(yè)發(fā)展的 重要支柱之一。中國(guó)南瓜種質(zhì)資源的農(nóng)藝性狀遺傳多樣性豐富，主要以肉用為主，包括食用嫩瓜型和食用老瓜型，是我國(guó)常見蔬菜作物。中國(guó)南瓜的生產(chǎn)最初主要以地方農(nóng)家種為主，生產(chǎn)不成規(guī)模，產(chǎn)業(yè)相對(duì)落后，且遺傳育種研究起步較晚。自20 世紀(jì)90 年代起，隨著廣東汕頭“白沙蜜本”南瓜的大力推廣，我國(guó)南瓜的生產(chǎn)狀況有了根本改觀，從而走上了規(guī)?；a(chǎn)業(yè)化發(fā)展道路?！懊郾灸瞎稀鳖愋拖盗衅贩N的選育對(duì)我國(guó)南瓜的遺傳育種工作產(chǎn)生了重要指導(dǎo)作用。近年來(lái)，消費(fèi)者和市場(chǎng)對(duì)于我國(guó)南瓜產(chǎn)品的需求越來(lái)越多元化、優(yōu)質(zhì)化，這對(duì)我國(guó)南瓜的產(chǎn)業(yè)發(fā)展、新品種選育等方面提出了新要求?；诖?，我國(guó)南瓜研究者圍繞重要農(nóng)藝性狀鑒評(píng)、遺傳規(guī)律解析、控制基因定位、分子調(diào)控機(jī)理挖掘、種質(zhì)資源創(chuàng)新、新品種選育等方面開展了系列工作，在中國(guó)南瓜的基礎(chǔ)研究和應(yīng)用研究方面取 得了一定進(jìn)展。本文對(duì)近5 年來(lái)中國(guó)南瓜重要性狀功能基因挖掘、品質(zhì)性狀評(píng)價(jià)指標(biāo)及檢測(cè)技術(shù)、育種技術(shù)、新品種選育等方面的研究進(jìn)行概述，分析了目前中國(guó)南瓜育種技術(shù)和理論研究方面存在的不足和關(guān)鍵難點(diǎn)，對(duì)未來(lái)育種工作進(jìn)行展望，提出未來(lái)育種研究的重點(diǎn)方向，旨在為南瓜育種及產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展提供參考。

1 中國(guó)南瓜重要性狀基因定位、克隆及分子機(jī)理

隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，分子育種技術(shù)逐漸在南瓜育種上得到應(yīng)用，南瓜重要性狀的基因定位及分子機(jī)理解析是開展南瓜分子育種的重要基礎(chǔ)，但目前中國(guó)南瓜的基礎(chǔ)研究整體相對(duì)薄弱，相關(guān)性狀的基因定位、克隆及分子機(jī)理報(bào)道較少。近年來(lái)，完成了南瓜抗病、抗逆、果實(shí)品質(zhì)等多個(gè)重要性狀的基因定位，且在南瓜抗白粉病、鹽脅迫、果實(shí)淀粉、糖代謝的分子機(jī)理解析方面取得一些重要進(jìn)展。

1.1 中國(guó)南瓜抗性基因定位及分子機(jī)理解析

在中國(guó)南瓜抗病、抗逆方面，南瓜抗性較強(qiáng)，對(duì)南瓜抗性基因定位及機(jī)制的研究有助于我們選育出高抗品種。南瓜白粉病是一種分布廣泛、普遍發(fā)生的世界性病害，研究者在中國(guó)南瓜中分離到5 個(gè)白粉病相關(guān)基因CmSGT1、CmPR1、CmMYB1、CmERF、CmbHLH87，基因過(guò)量表達(dá)通過(guò)不同信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑參與煙草對(duì)白粉病的抗性［1-3］。中國(guó)南瓜抗逆方面，Xu 等［4］利用SSR建立遺傳圖譜，檢測(cè)到3 個(gè)QTLs 與耐冷性狀相關(guān)，分別解釋變異的0.30%、1.22%、20.88%。王彬等［5］從中國(guó)南瓜幼苗中克隆到2 個(gè)HSP90基因，都對(duì)高溫、低溫、ABA、高鹽、H2O2、干旱和水楊酸等多種脅迫均具有明顯的應(yīng)答反應(yīng)，其中對(duì)高溫和水楊酸處理均表現(xiàn)出短時(shí)間強(qiáng)烈響應(yīng)。陳敏氡等［6］克隆、分析了3 個(gè)CmHSP70基因的功能，高溫條件下，中國(guó)南瓜成熟葉中3 個(gè)CmHSP70基因均能夠在短時(shí)間內(nèi)響應(yīng)熱脅迫而大量表達(dá)，尤其是CmHSP70-2 基因，推測(cè)該基因可能在中國(guó)南瓜熱脅迫過(guò)程發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用。對(duì)于中國(guó)南瓜的其他非生物脅迫相應(yīng)機(jī)制分析，申長(zhǎng)衛(wèi)等［7］在中國(guó)南瓜中鑒定到21 個(gè)CmSWEET基因，該基因與植物激素（脫落酸、茉莉酸甲酯、水楊酸和生長(zhǎng)素）響應(yīng)有關(guān)，可能參與各種環(huán)境脅迫的響應(yīng)。謝俊?。?］通過(guò)RNA-Seq 技術(shù)研究了中國(guó)南瓜對(duì)于鹽脅迫的響應(yīng)機(jī)制，發(fā)現(xiàn)ABA 合成及降解相關(guān)基因上調(diào)，NCED3s基因的表達(dá)水平增加會(huì)促進(jìn)葉肉細(xì)胞中 ABA 誘導(dǎo)的氣孔關(guān)閉，同時(shí)發(fā)現(xiàn)鹽脅迫后HKT1 和細(xì)胞內(nèi)Na+/H+（NHX4/6）轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)上調(diào)，從而提高南瓜的耐鹽性［9］。Sun 等［10］同樣發(fā)現(xiàn)兩個(gè)高度同源的南瓜HKT 編碼基因，發(fā)現(xiàn)CmHKT1;1基 因在南瓜耐鹽性狀的獲得性應(yīng)用上表現(xiàn)出一定的潛力。彭紹雯［11］圍繞CBL和CIPK基因家族探究南瓜對(duì)逆境脅迫的應(yīng)答反應(yīng)，共鑒定8 個(gè)CmCBL和30 個(gè)CmCIPK，在不同脅迫下，CmCBL成員呈現(xiàn)不同的誘導(dǎo)效應(yīng)和組織表達(dá)特異性。

1.2 中國(guó)南瓜品質(zhì)性狀基因定位及分子機(jī)理解析

在中國(guó)南瓜品質(zhì)性狀方面，重點(diǎn)對(duì)外觀品質(zhì)、風(fēng)味品質(zhì)開展研究。Zhong 等［12］構(gòu)建了首張中國(guó)南瓜高密度遺傳圖譜，將外觀品質(zhì)的果皮色與果皮紋基因定位在第8 連鎖群上，貢獻(xiàn)率分別為93.6%、90.2%；獲得與外觀品質(zhì)相關(guān)的果實(shí)直徑、果肉厚、果瘤等5 個(gè)性狀相關(guān)的12 個(gè)QTL位點(diǎn)，同時(shí)獲得與果實(shí)內(nèi)在品質(zhì)相關(guān)的總類胡蘿卜素、葉黃素、葡萄糖、蔗糖等7 個(gè)性狀相關(guān)的17 個(gè)QTL 位點(diǎn)。在此基礎(chǔ)上，周洋洋等［13］將皮色基因精細(xì)定位到第3 號(hào)染色體145.13 kb 范圍內(nèi)，初步推測(cè)篩選出候選基因Pentatricopeptide repeatcontaining protein、Zinc finger protein、Tetratricoprptide repeat（TPR）-like superfamily protein，可能與南瓜皮色形成相關(guān)。劉佳黎［14］篩選獲得一個(gè)候選基因類胡蘿卜素裂解雙加氧酶基因（CmCCD7），該基因cDNA 全長(zhǎng)1 933 bp，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)功能驗(yàn)證，該基因過(guò)量表達(dá)會(huì)導(dǎo)致葉黃素含量顯著下降。此外，研究發(fā)現(xiàn)PSY、PDS、ZEP、CRTISO基因與類胡蘿卜素的積累緊密相關(guān)［15］。淀粉作為南瓜果實(shí)的重要物質(zhì)，研究發(fā)現(xiàn)GBSS和SBE的表達(dá)模式與支鏈淀粉/直鏈淀粉比值變化趨勢(shì)相關(guān)［16］。糖含量影響南瓜的甜味性狀，王曼曼等［17］將蔗糖/葡萄糖QTL位點(diǎn)進(jìn)行定位，定位區(qū)段大小為356.3 kb，初步推測(cè)4 個(gè)與糖含量相關(guān)基因，包括果糖-1，6-二磷酸酶和MYB 轉(zhuǎn)錄因子。隨后研究者通過(guò)轉(zhuǎn)錄組分析發(fā)現(xiàn)SUS、SPS、HK、FK基因表達(dá)與蔗糖積累密切相關(guān)［15］。劉澤發(fā)等［18］利用SSR、SRAP、RSAP 標(biāo)記構(gòu)建了包含18 個(gè)連鎖群的中國(guó)南瓜遺傳圖譜，將果實(shí)全黃皮色基因定位到LGp2末端，將長(zhǎng)棒形果實(shí)性狀控制基因定位到LGp7連鎖群上，此外，共檢測(cè)到3 個(gè)與南瓜黃酮含量相關(guān)的QTLs，均位于LGp13 連鎖群上，f lQ1、f lQ2、f lQ3的貢獻(xiàn)率分別為46.32%、39.75%、17.2%。肌醇作為南瓜中一類重要的物質(zhì)，王安君等［19］獲得了中國(guó)南瓜肌醇的2 個(gè)相關(guān)基因CmIMP1和CmIMP2，發(fā)現(xiàn)CmIMP基因表達(dá)呈現(xiàn)組織差異，在葉片中表達(dá)量最高，且鹽脅迫和干旱脅迫可強(qiáng)烈誘導(dǎo)CmIMP表達(dá)。

1.3 農(nóng)藝性狀基因定位及分子機(jī)理解析

針對(duì)中國(guó)南瓜花期、株型等其他重要農(nóng)藝性狀，獲得長(zhǎng)日照光周 期不敏感、首雌花節(jié)位、首雄花節(jié)位、半短蔓性狀的主效QTL/基因［20-21］。周洋洋［21］獲得2 個(gè)首雌節(jié)位的QTL 位點(diǎn)，分別位于5 號(hào)、9 號(hào)連鎖群上，其中9 號(hào)連鎖群上的QTL 為主效位點(diǎn)，而4 個(gè)首雄節(jié)位的QTL 位點(diǎn)則分別位于1 號(hào)、4 號(hào)、9 號(hào)、11 號(hào)連鎖群上，其中4 號(hào)和9 號(hào)連鎖群上的2 個(gè)QTL 位點(diǎn)為可靠主效位點(diǎn)［21］。李慶飛等［22］則對(duì)乙烯利和乙烯抑制劑對(duì)南瓜花性別分化和乙烯相關(guān)基因表達(dá)做了相關(guān)研究，發(fā)現(xiàn)乙烯利處理使乙烯合成酶基因ACO和乙烯接受體基因ETR的表達(dá)水平升高，顯著降低了第一雌花節(jié)位，并增加了雌花數(shù)量，而乙烯抑制劑起到相反的作用效果。

2 中國(guó)南瓜品質(zhì)性狀檢測(cè)技術(shù)及評(píng)價(jià)指標(biāo)研究

2.1 南瓜果實(shí)品質(zhì)性狀檢測(cè)技術(shù)研究

隨著社會(huì)進(jìn)步和消費(fèi)者的需求，對(duì)于中國(guó)南瓜的品質(zhì)要求越來(lái)越高，品質(zhì)育種成為育種家關(guān)注的焦點(diǎn)。研究者們針對(duì)內(nèi)在品質(zhì)的檢測(cè)技術(shù)以及品質(zhì)規(guī)律開展了系列研究，主要涉及果膠、淀粉、葉黃素、香味、肌醇等品質(zhì)性狀。基于此，對(duì)于種質(zhì)資源進(jìn)行評(píng)價(jià)、篩選，獲得一些高品質(zhì)性狀的種質(zhì)資源，為優(yōu)質(zhì)新品種的選育奠定豐富的材料基礎(chǔ)。李玉丹等［23］利用GC-MS 技術(shù)建立了同時(shí)檢測(cè)南瓜果實(shí)肌醇類和單、雙糖類物質(zhì)的方法，能夠檢測(cè)南瓜果實(shí)樣品中的主要代謝成分半乳糖、葡萄糖、D-手性肌醇、肌-肌醇、果糖和蔗糖等成分，并對(duì)17 份中國(guó)南瓜材料進(jìn)行檢測(cè)篩選，不同材料的肌醇含量差異為后續(xù)高肌醇南瓜育種提供了有效數(shù)據(jù)信息，在此基礎(chǔ)上，黃河勛等選育了肌醇含量高的新品種粵蜜小南瓜。鄧俊琳等［24］開發(fā)了HPLC 檢測(cè)方法，為后續(xù)南瓜β-胡蘿卜素的快速檢測(cè)和深入研究奠定了技術(shù)基礎(chǔ)，且發(fā)現(xiàn)12 份南瓜材料中β-胡蘿卜素含量差異較大，篩選到1 份β-胡蘿卜素含量較高的中國(guó)南瓜資源。HPLC 技術(shù)同樣也應(yīng)用于檢測(cè)葉黃素、α-胡蘿卜素等物質(zhì)［15］。王彬等［25］以乙醇作為提取劑并通過(guò)皂化處理提取南瓜果肉類胡蘿卜素，利用UPLC 技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)包括7 個(gè)中國(guó)南瓜在內(nèi)的23 份南瓜品種進(jìn)行檢測(cè)，獲得一份高類胡蘿卜素含量的中國(guó)南瓜品 種—金塔蜜本南瓜，研究結(jié)果為中國(guó)南瓜資源開發(fā)與利用提供科學(xué)依據(jù)。徐小軍等［26］則重點(diǎn)關(guān)注最優(yōu)的類胡蘿卜素提取方法，發(fā)現(xiàn)在超聲波輔助下，利用無(wú)水乙醇為提取溶劑，料液比1 ∶4，浸提8 min，抽提4 次時(shí)，南瓜果肉類胡蘿卜素提取率最高，并以5 個(gè)不同類型的南瓜品種分析類胡蘿卜素的積累與變化規(guī)律，研究結(jié)果為南瓜品質(zhì)育種提供參考。此外，研究者還關(guān)注了南瓜果實(shí)和葉片的香味性狀檢測(cè)，通過(guò)頂空固相微萃取技術(shù)結(jié)合氣相色譜質(zhì)譜技術(shù)，分析研究了香芋南瓜的揮發(fā)性物質(zhì)，初步推斷2-乙?；?1-吡咯啉為南瓜呈現(xiàn)芋香味的主要貢獻(xiàn)物，并隨葉片和果實(shí)發(fā)育含量發(fā)生變化［27-28］，為芋香味南瓜資源創(chuàng)制、新品種選育奠定了理論基礎(chǔ)。陳敏氡等［29］同樣采用頂空固相微萃取氣質(zhì)聯(lián)用分析了5 個(gè)品種果肉的揮發(fā)性成分，發(fā)現(xiàn)壬醛、正己醛、反,反-2,4-庚二烯醛、順-壬-3-烯-1-醇和正己醇等化合物為南瓜果肉的主要風(fēng)味物質(zhì)，且不同品種的特征風(fēng)味物質(zhì)存在差異，為南瓜種質(zhì)資源的風(fēng)味品質(zhì)評(píng)價(jià)與品種風(fēng)味改良提供數(shù)據(jù)參考。

2.2 南瓜果實(shí)品質(zhì)性狀呈現(xiàn)規(guī)律研究

果實(shí)的內(nèi)在品質(zhì)成分隨果實(shí)發(fā)育呈現(xiàn)不同變化規(guī)律。研究發(fā)現(xiàn)中國(guó)南瓜果實(shí)在生長(zhǎng)期可溶性固形物、總糖、類胡蘿卜素含量呈現(xiàn)逐步上升趨勢(shì)，而有機(jī)酸含量則呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，但是不同類型的糖呈現(xiàn)不同的含量變化，在果實(shí)發(fā)育前20 d主要以果糖為主，而后期以積累蔗糖為主［15］。對(duì)于淀粉而言，隨著果實(shí)發(fā)育，總淀粉含量因材料不同呈現(xiàn)不同的變化趨勢(shì)，但支鏈淀粉在其中占絕大比例［16］。

2.3 南瓜果實(shí)品質(zhì)性狀相關(guān)性分析及評(píng)價(jià)指標(biāo)建立

品質(zhì)性狀之間存在一定關(guān)聯(lián)性。研究發(fā)現(xiàn)不同南瓜品種之間內(nèi)在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、礦質(zhì)元素等含量存在較大差異，且各內(nèi)在品質(zhì)性狀間存在一定相關(guān)性［30-31］，為后續(xù)選育特定營(yíng)養(yǎng)和保健功能的南瓜新品種提供理論依據(jù)。果肉色與可溶性固形物存在一定相關(guān)性，南瓜果肉中的紅色成分與可溶性固形物含量呈極顯著相關(guān)，生鮮瓜頸果肉中的黃色成分與可溶性固形物含量呈顯著相關(guān)，生鮮瓜頸果肉中的可溶性固形物含量最高［32］。針對(duì)南瓜的感官品質(zhì)、理化指標(biāo)以及其中的相關(guān)性也有相關(guān)報(bào)道，鑒定了影響南瓜口感的關(guān)鍵指標(biāo)，并建立一種科學(xué)評(píng)價(jià)口感的方法，可利用干物質(zhì)、可溶性糖、淀粉百分含量預(yù)測(cè)肉用南瓜口感［33］。

3 中國(guó)南瓜育種技術(shù)研究及新品種選育

3.1 分子標(biāo)記輔助選擇育種

分子標(biāo)記輔助選擇育種可以提高資源篩選、創(chuàng)制的精度和效率。目前已針對(duì)部分性狀開發(fā)了可使用的分子標(biāo)記，但總體進(jìn)展較緩慢。研究者針對(duì)光周期不敏感、葉黃素、皮色、蔗糖/葡萄糖比值、首雌節(jié)位、首雄節(jié)位、芋香味等性狀開發(fā)了SNP、Indel 分子標(biāo)記，并在南瓜資源篩選、創(chuàng)新中應(yīng)用，黃河勛等利用分子標(biāo)記輔助選擇篩選、創(chuàng)制了相應(yīng)性狀的種質(zhì)資源，通過(guò)雜交育種手段選育了長(zhǎng)日照光周期不敏感新品種‘廣蜜1號(hào)南瓜’，選育了高葉黃素含量的‘甜蜜小南瓜’［34-39］。戴祖云等［40］利用SSR 標(biāo)記實(shí)現(xiàn)了南瓜雜交種純度的鑒定，提高了品種檢測(cè)效率。

3.2 單倍體育種

單倍體育種技術(shù)可以顯著提高優(yōu)良株系純化速度、提高育種效率。南瓜的單倍體體系還不完善，受材料基因型影響大。閔子揚(yáng)等［41］通過(guò)未授粉子房離體培養(yǎng)建立了再生體系，獲得了單倍體植株。其他學(xué)者也進(jìn)一步研究了未授粉子房和胚珠離體培養(yǎng)的再生條件，為單倍體育種體系的建立奠定了基礎(chǔ)［42-43］。武習(xí)習(xí)［44］研究了未受精胚珠的液體培養(yǎng)技術(shù)，發(fā)現(xiàn)中國(guó)南瓜的胚珠液體培養(yǎng)愈傷誘導(dǎo)率要高于印度南瓜。此外，也可以通過(guò)胚囊再生進(jìn)行單倍體的創(chuàng)制［45］。總體來(lái)說(shuō)，單倍體誘導(dǎo)效率及穩(wěn)定性還需進(jìn)一步提高。

3.3 航天育種及種間遠(yuǎn)緣雜交育種

航天育種可以利用太空特殊的環(huán)境誘變作用，提高種質(zhì)資源變異頻率，有益于資源創(chuàng)制和新品種選 育。近5 年航天育種有少許報(bào)道，發(fā)現(xiàn)航天誘變環(huán)境對(duì)果形指數(shù)、單果重產(chǎn)生影響［46］。種間遠(yuǎn)緣雜交也是一種重要的資源創(chuàng)新手段，可以拓寬種質(zhì)資源的遺傳背景，能夠培育具有異質(zhì)化的核心種質(zhì)資源或品種。國(guó)內(nèi)學(xué)者開展了很多工作，發(fā)現(xiàn)種間雜種能夠較親本 有明顯的性狀優(yōu)勢(shì)。智海英等［47］發(fā)現(xiàn)中國(guó)南瓜與美洲南瓜或印度南瓜種間雜種一代的耐熱性較雜交親本美洲南瓜或印度南瓜有顯著提高。劉文君等［48］發(fā)現(xiàn)印度南瓜與中國(guó)南瓜雜交，不同雜交組合呈現(xiàn)不同的親和性，雜種表現(xiàn)出葉片變大、節(jié)間變長(zhǎng)和單瓜重變大的超親趨勢(shì)。此外，研究者充分利用種間雜種應(yīng)用到資源創(chuàng)新上，葉飛華等［49］在印度南瓜與中國(guó)南瓜雜交F1的基礎(chǔ)上，通多回交和多代自交獲得了“種間自交系”，構(gòu)建印度南瓜與中國(guó)南瓜的種間雜交橋梁親本。宋慧等［50］對(duì)36個(gè)中國(guó)南瓜和印度南瓜遠(yuǎn)緣雜交新種質(zhì)的F5和F6自交系進(jìn)行耐熱性評(píng)價(jià)，篩選得到耐熱優(yōu)系，為培育適宜越夏栽培的耐熱印度南瓜新品種提供有價(jià)值的親本。馬海龍等［51］通過(guò)遠(yuǎn)緣雜交將美洲南瓜的黃色果皮性狀轉(zhuǎn)育到中國(guó)南瓜中，創(chuàng)制黃色果皮新型種質(zhì)資源。

3.4 轉(zhuǎn)基因育種

南瓜是較難進(jìn)行轉(zhuǎn)基因的物種，目前中國(guó)南瓜的轉(zhuǎn)基因體系并未建立，受基因型影響，嚴(yán)重限制基因功能研究。針對(duì)此問(wèn)題，首先要建立高效穩(wěn)定的離體再生體系。閔子揚(yáng)等［52］利用子葉節(jié)和授粉后2 d 的子房為外植體，對(duì)南瓜愈傷組織和胚狀體發(fā)育兩種再生途徑進(jìn)行研究，獲得了誘導(dǎo)南瓜子葉節(jié)叢生芽和單芽成苗的最佳培養(yǎng)基，建立篩選了誘導(dǎo)南瓜胚狀體形成和胚狀體成苗的培養(yǎng)基。郭佳等［53］以下胚軸1/2 子葉作為外植體，發(fā)現(xiàn)1.0 mg/L 6-BA 和0.5 mg/L ABA 配合能夠顯著提升外植體再生能力，不定芽誘導(dǎo)率達(dá)到90.26%，并且進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)預(yù)培養(yǎng)、侵染、共培養(yǎng)時(shí)間對(duì)抗生芽的再生率顯著影響［54］。在南瓜遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)難以突破的情況下，有學(xué)者采用瞬時(shí)轉(zhuǎn)化驗(yàn)證基因功能。周洋洋等［55］實(shí)現(xiàn)了衣藻β-胡蘿卜素加酮酶基因在南瓜果實(shí)中的瞬時(shí)表達(dá)。

3.5 中國(guó)南瓜新品種選育

近5 年來(lái)，中國(guó)南瓜新品種與以前相比，外觀、品質(zhì)、產(chǎn)量均有較大提升，品質(zhì)育種受到越來(lái)越多關(guān)注。經(jīng)不完全統(tǒng)計(jì)，目前中國(guó)南瓜的新品種選育主要集中在廣東、廣西、湖南、重慶、安徽、北京、河南等地，除傳統(tǒng)的大果型蜜本南瓜外，近幾年來(lái)重點(diǎn)發(fā)力高品質(zhì)中國(guó)南瓜類型新品種的選育，南瓜品種已涵蓋大、小果，早、中、遲熟類型以及專用型品種。大果型蜜本類型仍占重要地位，種植范圍廣、覆蓋面積大。近5 年的新品種有金船大密本（廣東）、香栗蜜本（安徽）、早熟粉蜜（湖南）、紅蜜 3 號(hào)（湖南）。除大果型蜜本外，小果型中國(guó)南瓜發(fā)展迅猛，主要集中在廣東、廣西、湖南等地，新品種日益增多，如甜蜜小南瓜（廣東）、金鈴（廣東）、盤龍204（安徽）、金圓小南瓜（湖南）、棒棒蜜（湖南）、桂豐8 號(hào)（廣西）、北蜜2 號(hào)（北京）。除食用老瓜品種外，食用嫩果專用品種也越來(lái)越多，主要種植范圍在長(zhǎng)江流域及以南，如湘研早妍（湖南）、云冠（云南）、云南瓜1 號(hào)（云南）。此外，無(wú)蔓類型的品種也有報(bào)道，如中瑞1 號(hào)（北京）、中瑞2 號(hào)（北京）、荃冠5 號(hào)（安徽）（表1）?？傊?，豐富的中國(guó)南瓜品種類型，促進(jìn)了南瓜品種結(jié)構(gòu)調(diào)整。

表1 近5 年育成的代表性中國(guó)南瓜新品種Table 1 Representative new varieties of Cucurbita moschata bred in the past 5 years

4 中國(guó)南瓜育種面臨問(wèn)題及發(fā)展建議

近5 年來(lái)，中國(guó)南瓜的應(yīng)用基礎(chǔ)研究、新品種發(fā)展較快，但還存在一些問(wèn)題。（1）抗性、品質(zhì)等重要性狀研究還不夠深入，品質(zhì)、抗性的評(píng)價(jià)指標(biāo)及鑒定技術(shù)還不夠完善，無(wú)法將性狀形成數(shù)據(jù)化信息，阻礙了性狀解析。盡管南瓜基因組已經(jīng)發(fā)布，但性狀基因/QTL 定位相對(duì)滯后，重要性狀基因及功能分析缺失。（2）種質(zhì)資源創(chuàng)新技術(shù)相對(duì)單一，傳統(tǒng)雜交育種是主要的資源創(chuàng)新方式，分子設(shè)計(jì)育種、分子標(biāo)記輔助育種等體系不成熟，且缺乏穩(wěn)定的再生體系和遺傳轉(zhuǎn)化體系。因此，針對(duì)以上問(wèn)題，在后續(xù)工作中需要結(jié)合基因組學(xué)、表型組學(xué)、代謝組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組等高通量技術(shù)，建立完善的性狀評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)重要性狀基因進(jìn)行定位、克隆，并解析性狀形成機(jī)理。另外，加快分子育種技術(shù)體系建立，實(shí)現(xiàn)分子育種與常規(guī)育種技術(shù)的緊密結(jié)合，提高資源創(chuàng)新效率，并加大誘變育種和倍性育種的研究力度，爭(zhēng)取在雙單倍體育種、基因編輯等方面有較大突破。最后，要根據(jù)社會(huì)發(fā)展需求和消費(fèi)需要，大力選育多元化、特色化的新品種以及專用型新品種，特別是風(fēng)味優(yōu)良新品種、功能性新品種等方面取得重大突破，滿足中國(guó)南瓜產(chǎn)業(yè)發(fā)展的品種結(jié)構(gòu)需求，從而提高我國(guó)南瓜產(chǎn)品的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力。