陳巧利，王 琦，李 達(dá)，張玲莉，盧志遠(yuǎn)，肖圖雄，謝景超

(貴陽(yáng)市黔靈山公園管理處，貴州 貴陽(yáng) 550004)

黑葉猴(Trachypithecusfrancoisi)隸屬靈長(zhǎng)目(Primate)，猴科(Cercopitheciade)，疣猴亞科(Colobinae)，烏葉猴屬(Trachypithecus)，是我國(guó)Ⅰ級(jí)保護(hù)動(dòng)物，國(guó)內(nèi)僅分布于廣西、貴州的部分地區(qū)[1～3]。2018年9月，黔靈山動(dòng)物園飼養(yǎng)的1只黑葉猴眼部出現(xiàn)不適，持續(xù)治療1月后死亡?，F(xiàn)將該猴的診療過(guò)程及診斷檢查結(jié)果進(jìn)行總結(jié)分析，以期為類(lèi)似病例的診斷和防治提供參考。

1 臨床癥狀

2018年9月18日，飼養(yǎng)員巡視發(fā)現(xiàn)1只黑葉猴(14歲)眼睛淚流不止，咳嗽，精神狀態(tài)、飲食、糞便未見(jiàn)異常。使用阿莫西林、穿心蓮、氯霉素眼藥水、鹽酸左氧氟沙星滴眼液等藥物進(jìn)行治療后咳嗽減輕，但眼部微腫且反復(fù)流淚，鼻孔間歇性出血，對(duì)癥治療后1個(gè)月死亡。

2 病理剖檢

將該猴進(jìn)行剖檢，結(jié)果顯示眼部及鼻腔組織增生，脫水嚴(yán)重，肺部有炎癥(見(jiàn)圖1)。

圖1 病理剖檢

3 病理組織學(xué)檢查

3.1 病理組織切片觀察將眼眶組織、鼻腔組織用10%福爾馬林浸泡脫水后送至貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院病理科制作切片，蘇木素-伊紅染色鏡檢。結(jié)果：(1)眼眶組織切面呈灰白、灰褐色，呈囊實(shí)性；另見(jiàn)多量灰白、灰褐色不整形組織，切面灰白、實(shí)性質(zhì)軟(見(jiàn)圖2)。(2)鼻腔組織皮膚表面未見(jiàn)明顯異常，切面灰白、實(shí)性質(zhì)軟，見(jiàn)豆渣樣物；另見(jiàn)灰白、灰褐色不整形組織1塊，切面灰白、灰紅實(shí)性質(zhì)中(見(jiàn)圖3)。經(jīng)貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院病理科診斷為眼眶組織惡性腫瘤伴壞死，腫瘤破壞眼球內(nèi)組織；鼻腔組織惡性腫瘤伴壞死。

圖2 眼眶組織病理切片

圖3 鼻腔組織病理切片

3.2 免疫組化標(biāo)記檢查為進(jìn)一步協(xié)助診斷并定性眼鼻部惡性腫瘤，對(duì)組織切片染色進(jìn)行Eber原位雜交實(shí)驗(yàn)(設(shè)陽(yáng)性對(duì)照)。利用抗原抗體特異性結(jié)合原理，選擇CK、CK7、Vim、CD20、CD79α、CD56、MUM1、CgA、Syn、S100、Melan-A、Ki-67 auto、CD3ε、HMB45、EMA、CD10、P63、CEA、CD117、CD138、CD30、LCA、ALK1、CD4、TDT、CD123、CD163、溶菌酶、Kappa、Lambda抗體試劑進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)。原位雜交結(jié)果為Eber(-)。免疫組化結(jié)果顯示(見(jiàn)圖4)：CK(+，灶性)、CK7(+，灶性)、Vim(+)、CD20(少數(shù)+)、CD79α(少數(shù)+)、CD56(部分+)、MUM1(少數(shù)+)、Syn(+，灶性)、S100(+，散在少數(shù))、Melan-A(少數(shù)+)、CD10(+/-)、CD117(+，少數(shù)散在)、ALK1(+/-)、CD163(少數(shù)+)、Kappa(少數(shù)+)、Ki-67 auto(約80%+)；其余標(biāo)記為陰性(-)。診斷為眼眶組織惡性腫瘤，考慮為：(1)神經(jīng)內(nèi)分泌癌或未分化癌；(2)非霍奇金淋巴瘤(彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤或漿細(xì)胞腫瘤)。由于組織來(lái)源種系原因，免疫組化標(biāo)記結(jié)果不太理想，尚不能對(duì)腫瘤進(jìn)行最終定性。

圖4 免疫組化標(biāo)記

4 細(xì)菌學(xué)檢查

4.1 細(xì)菌分離培養(yǎng)采集該猴血液制作血液涂片，革蘭氏染色鏡檢，可見(jiàn)革蘭氏陰性桿菌。采用瓊脂培養(yǎng)法對(duì)血液、肝臟組織進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定，結(jié)果在血液中檢測(cè)出大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌，在肝臟組織中檢測(cè)出大腸埃希菌。

4.2 藥敏試驗(yàn)為了對(duì)以后此類(lèi)細(xì)菌感染的治療用藥提供參考，利用瓊脂稀釋法進(jìn)行細(xì)菌最低抑菌濃度(MIC)測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1：2種病菌均對(duì)阿米卡星、氨曲南、頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢呋辛、頭孢唑林、厄他培南、頭孢吡肟、頭孢西丁、慶大霉素、亞胺培南、左氧氟沙星、美洛培南、復(fù)方新諾明、替加環(huán)素、妥布霉素、哌拉西林/他唑巴坦敏感，可作為治療用藥。

表1 藥敏試驗(yàn)

5 結(jié)論

通過(guò)臨床癥狀、病理剖檢、病理組織學(xué)檢查、免疫組化標(biāo)記、細(xì)菌學(xué)檢查，診斷該猴為眼部及鼻腔組織惡性腫瘤，并伴有大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌混合感染。

6 討論

6.1該猴自左眼出現(xiàn)癥狀后，精神、食欲變化不大，除咳嗽外無(wú)其他顯著癥狀，按常規(guī)進(jìn)行對(duì)癥治療，但后期眼、鼻部腫物迅速增長(zhǎng)，嚴(yán)重影響正常的呼吸和生活?？紤]到該猴年齡較大，應(yīng)激反應(yīng)強(qiáng)烈，麻醉進(jìn)行眼部手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)太大，最終采取保守治療。將眼、鼻部組織送檢貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院，經(jīng)病理科診斷為惡性腫瘤，免疫組化結(jié)果顯示腫瘤細(xì)胞增殖指數(shù)高達(dá)80%。

6.2腫瘤的發(fā)生與動(dòng)物年齡、體質(zhì)、飼養(yǎng)環(huán)境相關(guān)，飼料霉變、藥物使用不當(dāng)?shù)榷伎赡苷T發(fā)腫瘤[4，5]。造成該猴眼、鼻部惡性腫瘤的因素尚不能確定，有待進(jìn)一步探討。在今后的飼養(yǎng)管理工作中，為消除各種可能誘發(fā)動(dòng)物患腫瘤的不安全因素，要注意做好飼養(yǎng)衛(wèi)生清潔工作，保證飼料、飲水清潔，增強(qiáng)動(dòng)物抵抗力；加強(qiáng)與動(dòng)物互動(dòng)交流，不斷積累經(jīng)驗(yàn)，爭(zhēng)取做到早發(fā)現(xiàn)早治療。

6.3該病例出現(xiàn)的大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌混合感染可能與惡性腫瘤破壞機(jī)體組織，機(jī)體抵抗力下降有關(guān)。此次檢測(cè)出的2種細(xì)菌耐藥性與喬寧等[6]的報(bào)道基本符合，但均對(duì)氨芐西林產(chǎn)生耐藥性。為避免產(chǎn)生新的耐藥菌株，在治療動(dòng)物疾病時(shí)需注意抗生素的交叉使用。