何錫忠，林 鷙，朱永軍，彭麗英

(上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，上海 201106)

偽狂犬病是由偽狂犬病病毒(pseudorabiesvirus，PRV) 引起的多種家畜和野生動物以發(fā)熱、奇癢及腦脊髓炎為主要癥狀的一種傳染病[1]。人感染偽狂犬病病毒從20 世紀(jì)80 年代以來陸續(xù)有報道[2]，2019 年，翁珊珊等報道在人眼晶狀體中發(fā)現(xiàn)偽狂犬病病毒[3]。該病在歐洲、北美洲、南美洲、亞洲和非洲均有暴發(fā)，我國于1947 年首次報道了貓發(fā)生該病[1]，之后擴(kuò)大到全國，2011 年全國各地相繼出現(xiàn)豬偽狂犬病病毒的變異毒株，給我國養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

本試驗通過給懷孕母豬一次單劑量、單劑量重復(fù)及一次超劑量接種豬偽狂犬病滅活疫苗，以檢驗該疫苗對懷孕母豬的安全性，為疫苗的規(guī)模生產(chǎn)及推廣應(yīng)用提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料

1.1 試驗疫苗

試驗疫苗為豬偽狂犬病滅活疫苗(PRVSXgE 株)(生產(chǎn)批號為2017001、2017002、2018001)，由上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所繁殖障礙課題組試制。

1.2 PRV 阻斷ELISA 診斷試劑盒

豬偽狂犬病病毒gB 抗體檢測試劑盒及豬偽狂犬病病毒gE 抗體檢測試劑盒為IDEXX 公司生產(chǎn)。

1.3 試驗動物及飼料

PRV 抗原、抗體陰性懷孕母豬來自江蘇省某豬場。飼料來自上海千里生物科技有限公司。

1.4 動物房及其他

動物房經(jīng)消毒后使用。其他物品均由上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所提供。

2 方法

2.1 一次單劑量接種

試驗組按疫苗的生產(chǎn)批次分為3 組，每組5 頭懷孕母豬，產(chǎn)前7 周頸部肌內(nèi)注射豬偽狂犬病滅活疫苗(PRVSX-gE 株)，2 mL/頭；對照組選取5 頭懷孕母豬，頸部肌內(nèi)注射生理鹽水，2 mL/頭。接種后連續(xù)觀察至所產(chǎn)仔豬斷奶。統(tǒng)計每頭母豬的總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、死胎數(shù)、弱胎數(shù)等，對新生仔豬及斷奶仔豬進(jìn)行稱重。

2.2 單劑量重復(fù)接種

試驗組按疫苗生產(chǎn)批次分為3 組，每組 5 頭懷孕母豬，產(chǎn)前7 周頸部肌內(nèi)注射豬偽狂犬病滅活疫苗(PRVSX-gE 株)，2 mL/頭；對照組選取5 頭懷孕母豬，頸部肌內(nèi)注射生理鹽水，2 mL/頭。21 d 后對懷孕母豬進(jìn)行第2 次免疫，免疫劑量同首次免疫。接種后連續(xù)觀察至所產(chǎn)仔豬斷奶。統(tǒng)計每頭母豬的總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、死胎數(shù)、弱胎數(shù)等，對新生仔豬及斷奶仔豬進(jìn)行稱重。

2.3 一次超劑量接種

試驗組按疫苗生產(chǎn)批次分為3 組，每組 5 頭懷孕母豬，產(chǎn)前7 周頸部肌內(nèi)注射豬偽狂犬病滅活疫苗(PRVSX-gE 株)，4 mL/頭；對照組選取5 頭懷孕母豬，頸部肌內(nèi)注射生理鹽水，4 mL/頭。接種后連續(xù)觀察至所產(chǎn)仔豬斷奶。統(tǒng)計每頭母豬的總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、死胎數(shù)、弱胎數(shù)等，對新生仔豬及斷奶仔豬進(jìn)行稱重。

3 結(jié)果

3.1 對懷孕母豬一次單劑量接種的安全性

試驗組和對照組懷孕母豬的接種部位及全身均無不良反應(yīng)，母豬健康，妊娠正常，無死胎和木乃伊胎等，新生仔豬發(fā)育良好。3 個試驗組的懷孕母豬的總產(chǎn)仔數(shù)分別為53 頭、55 頭、50 頭，對照組懷孕母豬的總產(chǎn)仔數(shù)為52 頭；3 個試驗組的懷孕母豬所產(chǎn)仔豬的平均初生重分別為(1.41±0.33)kg、(1.42±0.23)kg、(1.49±0.35)kg，對照組懷孕母豬所產(chǎn)仔豬的平均初生重為(1.46±0.42)kg；3 個試驗組的懷孕母豬所產(chǎn)仔豬的平均斷奶體重分別為(7.42±0.46)kg、(7.32±0.6)kg、(7.52±0.32)kg，對照組懷孕母豬所產(chǎn)仔豬的平均斷奶體重為(7.45±0.35)kg。結(jié)果見表1 和表2。

3.2 對懷孕母豬單劑量重復(fù)接種的安全性

試驗組和對照組懷孕母豬的接種部位及全身均無不良反應(yīng)，母豬健康，妊娠正常，無死胎和木乃伊胎等，新生仔豬發(fā)育良好。3 個試驗組的懷孕母豬的總產(chǎn)仔數(shù)分別為51 頭、54 頭、52 頭，對照組懷孕母豬的總產(chǎn)仔數(shù)為50 頭；3 個試驗組的懷孕母豬所產(chǎn)仔豬的平均初生重分別為(1.48±0.24)kg、(1.50±0.31)kg、(1.41±0.28)kg，對照組懷孕母豬所產(chǎn)仔豬的平均初生重為(1.47±0.19)kg；3 個試驗組的懷孕母豬所產(chǎn)仔豬的平均斷奶體重分別為(7.48±0.25)kg、(7.40±0.33)kg、(7.39±0.25)kg，對照組懷孕母豬所產(chǎn)仔豬的平均斷奶體重為(7.44±0.21)kg。結(jié)果見表3 和表4。

3.3 對懷孕母豬一次超劑量接種的安全性

試驗組和對照組懷孕母豬的接種部位及全身均無不良反應(yīng)，母豬健康，妊娠正常，無死胎和木乃伊胎等，新生仔豬發(fā)育良好。3 個試驗組的懷孕母豬的總產(chǎn)仔數(shù)分別為51 頭、49 頭、53 頭，對照組懷孕母豬的總產(chǎn)仔數(shù)為51 頭；3 個試驗組的懷孕母豬所產(chǎn)仔豬的平均初生重分別為(1.51±0.25)kg、(1.40±0.19)kg、(1.46±0.24)kg，對照組懷孕母豬所產(chǎn)仔豬的平均初生重為(1.44±0.15)kg；3 個試驗組的懷孕母豬所產(chǎn)仔豬的平均斷奶體重 分別為(7.91±0.23)kg、(7.27±0.21)kg、(7.18±0.32)kg，對照組懷孕母豬所產(chǎn)仔豬的平均斷奶體重為(7.55±0.28)kg。試驗結(jié)果見表5 和表6。

4 結(jié)果與討論

對懷孕母豬一次單劑量接種、單劑量重復(fù)接種、一次超劑量接種的安全性試驗顯示，肌內(nèi)注射豬偽狂犬病滅活疫苗(PRVSX-gE 株)后，接種部位及全身無不良反應(yīng)，母豬健康，妊娠正常，無死胎和木乃伊胎，新生仔豬生長發(fā)育良好。試驗表明，自主研制的豬偽狂犬病滅活疫苗(PRVSX-gE 株)對懷孕母豬安全，不會影響懷孕母豬的繁殖性能。

對PRV 的防控目前主要以免疫接種為主。由于豬偽狂犬病病毒毒力基因發(fā)生了位點的突變或缺失[4]，豬偽狂犬病病毒流行毒株的毒力增強(qiáng)，利用經(jīng)典毒株制備的疫苗無法抵抗流行毒株入侵[5]，急需研制流行毒株基因缺失疫苗[6]。本試驗對自主研發(fā)的豬偽狂犬病流行毒株基因缺失疫苗對懷孕母豬的安全性和繁殖性能進(jìn)行了評價，結(jié)果理想，但大規(guī)模應(yīng)用的效果還需作進(jìn)一步驗證。