曹 超，華 添，江 俊，戴榮貴，吳冬平

(1.鎮(zhèn)江威特藥業(yè)有限責(zé)任公司，江蘇 鎮(zhèn)江 212202；2.揚(yáng)州大學(xué)，江蘇 揚(yáng)州 225000)

磺胺藥具有抗菌譜廣、使用方便、性質(zhì)穩(wěn)定等特點(diǎn)，在畜禽細(xì)菌性疾病防治中得到了廣泛應(yīng)用。但是隨著磺胺藥的大量使用，單獨(dú)使用磺胺藥所引發(fā)的耐藥性以及毒性問題愈發(fā)明顯，為了解決這一問題，目前磺胺藥制劑多為復(fù)方磺胺藥，將磺胺藥與抗菌增效劑(如二甲氧芐啶、三甲氧芐啶)聯(lián)合使用，以降低耐藥性和毒性作用。奧美普林作為一種新型抗菌增效劑，與以前常用的三甲氧芐啶和二甲氧芐啶相比，半衰期更長(zhǎng)，生物利用率更高，與抗菌素的協(xié)同增效作用更好，藥效是甲氧芐啶和二甲氧芐啶的5 倍，且毒性作用小，可以極大減少抗生素使用量，減輕藥物濫用的副作用。新型抗菌增效劑奧美普林在畜禽養(yǎng)殖中有著廣闊的應(yīng)用前景，為評(píng)價(jià)新型復(fù)方磺胺氯達(dá)嗪鈉奧美普林可溶性粉在豬上的臨床使用安全性，鎮(zhèn)江威特藥業(yè)有限責(zé)任公司特進(jìn)行靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)，以指導(dǎo)臨床用藥。

1 材料

1.1 測(cè)試藥品

復(fù)方磺胺氯達(dá)嗪鈉奧美普林可溶性粉(鎮(zhèn)江威特藥業(yè)有限責(zé)任公司提供)，1 000 g/袋，批號(hào)：200301。推薦使用劑量：1 kg 飼料添加本品1 g。測(cè)試藥品中磺胺氯達(dá)嗪鈉和奧美普林配制比例為5∶1。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物入選及剔除標(biāo)準(zhǔn)

選擇35 日齡、體重相近且具有類似背景的健康仔豬用于試驗(yàn)。入選豬在試驗(yàn)前1 天經(jīng)獸醫(yī)檢查，確認(rèn)處于良好的健康狀況。處于下列情況的豬應(yīng)從試驗(yàn)中剔除：①適應(yīng)期內(nèi)瀕死的豬；②適應(yīng)期內(nèi)生病或受傷的豬；③試驗(yàn)期內(nèi)因疾病需要用其他藥物治療的豬。

1.3 主要儀器

Beckman Coulter AU480 型全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó)貝克曼庫爾特公司產(chǎn)品)；邁瑞B(yǎng)C5800全自動(dòng)模塊式血液分析儀(邁瑞公司產(chǎn)品)；組織切片機(jī)及其他病理學(xué)檢查常用儀器設(shè)備。

2 方法

2.1 試驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)豬在試驗(yàn)前適應(yīng)新環(huán)境3 d。試驗(yàn)前1 天經(jīng)獸醫(yī)檢查，確認(rèn)處于良好的健康狀況方可用于試驗(yàn)。

2.2 試驗(yàn)分組與藥物使用情況

將32 頭35 日齡仔豬隨機(jī)分為4 組(每組 8 頭)，動(dòng)物分組及藥物添加劑量如下：

(1)空白對(duì)照組，給予不含任何藥物添加劑的基礎(chǔ)日糧；

(2)1 倍推薦劑量組，拌料給藥，1 kg 日糧添加本品1 g，連續(xù)使用5 d；

(3)3 倍推薦劑量組，拌料給藥，1 kg 日糧添加本品3 g，連續(xù)使用5 d；

(4)5 倍推薦劑量組，拌料給藥，1 kg 日糧添加本品5 g，連續(xù)使用5 d。

2.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

2.3.1 臨床觀察

(1)試驗(yàn)前和試驗(yàn)期觀察試驗(yàn)豬的精神狀況、采食和排便等臨床表現(xiàn)。

(2)體重變化：于試驗(yàn)前、后各稱重一次，比較試驗(yàn)豬增重和生長(zhǎng)狀況。

2.3.2 相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)

臨床病理學(xué)檢查包括血常規(guī)和血液生化指標(biāo)的檢測(cè)。在給藥前和停藥后24 h 經(jīng)試驗(yàn)豬的前腔靜脈采集血液，其中全血作血常規(guī)指標(biāo)檢驗(yàn)，檢測(cè)指標(biāo)包括紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積、血小板、平均紅細(xì)胞容積、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量等；血清用作血液生化指標(biāo)檢測(cè)，檢測(cè)指標(biāo)包括堿性磷酸酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、乳酸脫氫酶、總蛋白、白蛋白、葡萄糖、尿素氮、肌酐、鉀離子、鈉離子等指標(biāo)。

2.3.3 大體檢查

試驗(yàn)期內(nèi)死亡的豬應(yīng)進(jìn)行尸檢。對(duì)來自與藥物毒性、疾病或其他原因有關(guān)的豬死亡應(yīng)通過可接受的診斷技術(shù)加以確認(rèn)，并記錄死亡日期。試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)5 倍推薦劑量組及對(duì)照組試驗(yàn)豬進(jìn)行與藥物損傷相關(guān)的大體檢查，對(duì)顯示疑似藥物損傷的豬應(yīng)進(jìn)行組織學(xué)檢查，發(fā)現(xiàn)病變后再對(duì)低推薦劑量組的試驗(yàn)豬進(jìn)行檢查。

2.3.4 組織病理學(xué)檢查

對(duì)所有待檢試驗(yàn)豬進(jìn)行大體檢查后，將重要器官和組織固定保存，對(duì)顯示疑似與藥物有關(guān)的損傷還應(yīng)進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。檢查部位包括：胃、小腸、腸淋巴結(jié)、肝臟、腎臟、心臟、脾臟、肺臟。根據(jù)出現(xiàn)的病變決定是否對(duì)其他組織進(jìn)行檢查。如果與空白對(duì)照組的試驗(yàn)豬相比，5 倍推薦劑量組試驗(yàn)豬的組織未出現(xiàn)與藥物相關(guān)的組織病理學(xué)變化，1 倍推薦劑量組和3 倍推薦劑量組的試驗(yàn)豬將不再進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。

2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

用SPSS 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的顯著性檢驗(yàn)。采用t檢驗(yàn)分析各給推薦劑量組試驗(yàn)豬與對(duì)照組試驗(yàn)豬的增重、血常規(guī)指標(biāo)和血液生化指標(biāo)的差異。

3 結(jié)果

3.1 臨床表現(xiàn)

整個(gè)試驗(yàn)期各組試驗(yàn)豬均無死亡，各推薦劑量組試驗(yàn)豬均表現(xiàn)出良好的耐受性，精神狀況、采食、排便等均表現(xiàn)正常。由表1 可見，各推薦劑量組試驗(yàn)豬的增重與對(duì)照組試驗(yàn)豬的無明顯差異。結(jié)果表明各推薦劑量組經(jīng)復(fù)方磺胺氯達(dá)嗪鈉奧美普林可溶性粉拌料給藥后對(duì)豬的生長(zhǎng)性能無明顯影響。

3.2 血常規(guī)和血液生化指標(biāo)

給藥前、停藥后24 h 的血常規(guī)指標(biāo)和血液生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果分別見表2 至表5。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，1 倍推薦劑量組、3 倍推薦劑量組、5 倍推薦劑量組的試驗(yàn)豬在給藥前和停藥后測(cè)定的血常規(guī)指標(biāo)和血液生化指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)，只有淋巴細(xì)胞數(shù)和紅細(xì)胞計(jì)數(shù)與對(duì)照組試驗(yàn)豬的相比有顯著差異，沒有明確的證據(jù)證明具有劑量依賴性，因此對(duì)照組與推薦劑量組的差異不具有臨床相關(guān)性。

3.3 病理學(xué)變化

試驗(yàn)結(jié)束后將5 倍推薦劑量組及對(duì)照組試驗(yàn)豬宰殺剖檢，未發(fā)現(xiàn)任何異常和可疑病變。5 倍推薦劑量組試驗(yàn)豬的病理切片檢查病理學(xué)變化。因此未對(duì)1 倍和3 倍推薦劑量組的試驗(yàn)豬做進(jìn)一步組織病理學(xué)檢查。

4 討論

35 日齡仔豬口服不同劑量的新型復(fù)方磺胺氯達(dá)嗪鈉奧美普林可溶性粉，連續(xù)使用5 d，結(jié)果表明，試驗(yàn)豬均未死亡且健康，臨床表現(xiàn)正常，5 倍推薦劑量組試驗(yàn)豬的組織器官未見病變。1 倍推薦劑量組、3 倍推薦劑量組、5 倍推薦劑量組的試驗(yàn)豬在給藥前和停藥后測(cè)定的血常規(guī)指標(biāo)和血液生化指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)。實(shí)驗(yàn)證明，新型復(fù)方磺胺氯達(dá)嗪鈉奧美普林可溶性粉對(duì)豬按推薦方案給藥具有較高的安全性。