張成華

（北京艾比蒂生物科技有限公司 北京 102200）

瓜蔞（Trichosanthes kirilowii Maxim.），多年生攀緣型草本植物。分布在遼寧、華北（北京、天津、河北、內(nèi)蒙古、山西、山東）、華東、中南、陜西、甘肅、四川、貴州和云南。喜生于深山峻嶺、荊棘叢生的山崖石縫之中。其果實(shí)、果皮、果仁（籽）、根莖均為上好的中藥材。具有很高的藥用價(jià)值，有抗菌、抗癌、抗?jié)?、延緩衰老、祛痰、瀉下等作用。瓜蔞在我國種植歷史悠久，近幾年研發(fā)出了瓜蔞延伸食用產(chǎn)品，開創(chuàng)了全新的農(nóng)業(yè)特色產(chǎn)業(yè)，市場(chǎng)前景非常好。組培瓜蔞苗需求十分緊張，具有成活率高、抗逆行強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)。為滿足市場(chǎng)對(duì)瓜蔞組培苗的需求，我們對(duì)此進(jìn)行了組培探索和試驗(yàn)。

1 試驗(yàn)材料

瓜蔞皖9品種

2 試驗(yàn)方法

選取生長(zhǎng)旺盛、無病蟲害的瓜蔞的嫩條，首先剪成含有一個(gè)單芽的莖段，剪去多余的葉子，再流水沖洗0.5h，轉(zhuǎn)入超凈工作臺(tái)上，75%乙醇浸泡30s，5%的次氯酸鈉浸泡消毒2-3min，浸泡過程中要經(jīng)常搖動(dòng)瓶子，以使次氯酸鈉與材料充分接觸，倒掉次氯酸鈉溶液，用無菌水漂洗3-4次，濾紙吸干外植體表面的水分，最后剪去次氯酸鈉溶液接觸過的切口部位，即可用于接種。

3 材料的培養(yǎng)

3.1 誘導(dǎo)培養(yǎng)

將接種的材料放在培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)條件溫度20-28℃，光照1500-2000lx，光照時(shí)間12h白天，12h黑夜，這樣有利于腋芽的分化。莖段培養(yǎng)大約15天左右就可看到小的不定芽開始從外植體上長(zhǎng)出（圖1圖2圖3圖4表1），此腋芽處營養(yǎng)豐富，細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，再分化比較容易。在誘導(dǎo)培養(yǎng)階段我們采用4種培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，

圖1

圖2

圖3

圖4 外植體誘導(dǎo)的腋芽

表1 瓜蔞外植體誘導(dǎo)生長(zhǎng)測(cè)定

①M(fèi)S+BA0.4mg/L+NAA0.04mg/L+6g/L瓊脂+30g/L蔗糖

②MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+6g/L瓊脂+30g/L蔗糖

③MS+BA0.2mg/L+NAA0.1mg/L+6g/L瓊脂+30g/L蔗糖

④MS+BA0.2mg/L+IAA0.6mg/L+6g/L瓊脂+30g/L蔗糖

通過以上4種培養(yǎng)基，試驗(yàn)結(jié)果與分析：從圖和表中可以看出1號(hào)處理長(zhǎng)出1-2個(gè)腋芽，不定芽粗壯，2號(hào)處理不定芽長(zhǎng)勢(shì)緩慢，3號(hào)處理比2號(hào)處理稍好，4號(hào)處理長(zhǎng)勢(shì)旺盛，不定芽長(zhǎng)度比其它三個(gè)都長(zhǎng)，而且還有葉子平展開。那么我們的結(jié)果表明細(xì)胞分裂素BA為0.2mg/L時(shí)，生長(zhǎng)素IAA0.6mg/L時(shí)，瓜蔞誘導(dǎo)不定芽為最佳生長(zhǎng)。在此培養(yǎng)基上培養(yǎng)20多天，不定芽長(zhǎng)到2-3cm左右即可剪下進(jìn)行繼代培養(yǎng)。

3.2 繼代培養(yǎng)

將不定芽從培養(yǎng)瓶中取出，在超凈工作臺(tái)無菌濾紙上剪下發(fā)出的芽，轉(zhuǎn)入MS+BA0.2mg/L+IAA0.6mg/L+6g/L瓊脂+30g/L蔗糖培養(yǎng)基中，新鮮培養(yǎng)上培養(yǎng)15d左右，叢生芽長(zhǎng)的粗壯，最長(zhǎng)的不定芽有1.5cm，新生芽的生長(zhǎng)速度明顯加快，幼葉有平展，繁殖系數(shù)在3左右，此培養(yǎng)基長(zhǎng)勢(shì)最佳（見圖5）。

圖5 繼代增殖培養(yǎng)

3.3 生根培養(yǎng)

無論是從誘導(dǎo)芽獲得的不定芽，還是繼代增殖獲得的不定芽，都可轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基為以下幾種：

①M(fèi)S+IBA0.3mg/L+6g/L瓊脂+30g/L蔗糖

②MS+IBA0.4mg/L+6g/L瓊脂+30g/L蔗糖

③MS+IBA0.5mg/L+6g/L瓊脂+30g/L蔗糖

④MS+ABT0.3mg/L+6g/L瓊脂+30g/L蔗糖

⑤MS+ABT0.5mg/L+6g/L瓊脂+30g/L蔗糖

將不定芽轉(zhuǎn)入以上生根培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)室培養(yǎng)1周后，就可看見芽的基部有根露出來，再過一段時(shí)間后，這些根原基就發(fā)育為0.5cn以上的幼根，生長(zhǎng)14天后進(jìn)行生根數(shù)和株高調(diào)查測(cè)量，見表2。

表2 瓜蔞的生根誘導(dǎo)調(diào)查

圖6 瓜蔞生根苗用ABT和IBA的長(zhǎng)勢(shì)情況

圖7 瓜蔞生根苗

從表中和圖中可以看出，添加ABT的培養(yǎng)基生根條數(shù)為2.87，為最高，從株高上看，株高為5.2cm，也是最高的。此試驗(yàn)充分表明使用ABT0.3mg/L誘導(dǎo)生根效果好，移栽容易成活。

我們通過本次試驗(yàn)充分證實(shí)了瓜蔞的組培快速繁育技術(shù)，為實(shí)現(xiàn)瓜蔞優(yōu)質(zhì)種苗組培快繁工廠化生產(chǎn)打下良好的基礎(chǔ)。