孟凡來(lái)，白 磊，郭華春，趙大偉，余興華，王應(yīng)梅，李玉祥，滕 娟

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 650201；2.文山壯族苗族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院，云南 文山 663099)

由于人類長(zhǎng)期向大氣中大量排放氟化物，大氣臭氧層結(jié)構(gòu)受到破壞，導(dǎo)致到達(dá)地表的紫外線(UV-B)輻射增強(qiáng)。大氣平流層中臭氧每減少1%，到達(dá)地球表面的太陽(yáng)紫外線輻射就增加2%[1-2]；北半球因臭氧層破壞而導(dǎo)致的UV-B輻射年增加率將達(dá)到14%，南半球則達(dá)到40%[3]；緯度和海拔是影響UV-B輻射的另一重要因素。研究表明，生活在低緯度地區(qū)的生物會(huì)比生活于高緯度地區(qū)的生物接受更多的UV-B輻射[4]，海拔每升高1 000 m，UV-B輻射強(qiáng)度則提升10%～20%[5]。云南(海拔600～3 000 m，21～29°N)為典型的低緯高原，因此，該地區(qū)動(dòng)植物受UV-B輻射增強(qiáng)的影響相對(duì)更嚴(yán)重。

紫甘薯為薯肉顏色紫色至深紫色的甘薯(Ipomoeabatatas(L.)Lam.)，云南境內(nèi)紫甘薯種植面積已達(dá)2.388萬(wàn)hm2，居全國(guó)第2位[6]。紫甘薯除含有普通甘薯所具有的全部營(yíng)養(yǎng)成分外，還富含花青素、類黃酮、綠原酸等藥用成分，是一種兼具糧食、經(jīng)濟(jì)和藥用特性于一身的重要作物[6]。當(dāng)前，紫甘薯鮮食和加工市場(chǎng)需求因居民對(duì)紫甘薯營(yíng)養(yǎng)保健功能認(rèn)知度及認(rèn)可度的不斷提高，以及以花青素應(yīng)用為代表的醫(yī)療、工業(yè)需求增加而不斷擴(kuò)張[7-9]。故適當(dāng)發(fā)展優(yōu)質(zhì)紫甘薯栽培，不僅有利于優(yōu)化居民的膳食結(jié)構(gòu)，而且是云南發(fā)展“高原特色農(nóng)業(yè)”“效益農(nóng)業(yè)”的有效途徑。為了適應(yīng)市場(chǎng)對(duì)優(yōu)質(zhì)紫甘薯品種的消費(fèi)需求，云南農(nóng)業(yè)大學(xué)薯類作物研究所選育出優(yōu)質(zhì)高花色苷(0.59 mg/g)品種-滇紫甘薯24。目前，關(guān)于甘薯響應(yīng)UV-B輻射增強(qiáng)的研究主要集中于農(nóng)藝性狀[10]和生理生化方面[11-12]，而就紫甘薯響應(yīng)UV-B輻射增強(qiáng)的轉(zhuǎn)錄組分析的研究則鮮有報(bào)道，因此，本研究利用RNA測(cè)序(RNA-sequencing，RNA-seq)技術(shù)對(duì)增強(qiáng)UV-B輻射處理前后的紫甘薯葉片樣品進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序比對(duì)，鑒定出樣品響應(yīng)UV-B輻射增強(qiáng)的顯著差異表達(dá)應(yīng)答基因，并對(duì)其差異表達(dá)基因(Differentially expressed genes，DEGs)進(jìn)行基因本體(Gene ontology，GO)和京都基因與基因組百科全書(shū)(Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG)注釋與富集分析，從轉(zhuǎn)錄組水平上對(duì)紫甘薯響應(yīng)UV-B輻射增強(qiáng)的分子機(jī)制進(jìn)行深入研究，以期為紫甘薯耐UV-B輻射相關(guān)基因的篩選提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料及處理

試驗(yàn)于云南農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)田內(nèi)進(jìn)行(25.04° N，102.73° E，海拔1 950.0 m)，采用盆栽(高35 cm，直徑40 cm；基質(zhì)：紅壤土∶腐殖土=1∶1)，株行距：35 cm×40 cm。于2017年6月15日扦插，發(fā)根緩苗后進(jìn)行UV-B照射處理。將帶防雨燈架的紫外燈安裝在田間搭建的網(wǎng)架上，用紫外燈管(UVB-40，南京華強(qiáng)電子有限公司，波長(zhǎng)280～320 nm)進(jìn)行人工增補(bǔ)UV-B輻射，輻照強(qiáng)度以燈管至甘薯最高葉面的高度和燈管數(shù)量調(diào)節(jié)，用UV-B紫外輻照計(jì)測(cè)量輻照強(qiáng)度(北京師范大學(xué)光電儀器廠)。以自然光照為對(duì)照(CK)，自然光照基礎(chǔ)上增加7.2 kJ/(m2·d)為UV-B輻射處理(T)，每天照射5 h(11：00-16：00)，陰雨天除外[13]。燈管高度隨植株的生長(zhǎng)高度適時(shí)調(diào)節(jié)，同時(shí)，為了使對(duì)照組與處理組的自然光照條件一致，在其上安裝空燈架。于處理第60 天隨機(jī)選取15株紫甘薯，取倒5葉，3次生物學(xué)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5株，將樣品迅速放入取樣管后液氮速凍，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)儲(chǔ)存于-80 ℃超低溫冰箱待用。

1.2 測(cè)序樣品總RNA提取

采用TRNzol試劑盒(Invitrogen，Carlsbad，CA，美國(guó))從葉片組織中提取總RNA[14]，1%的瓊脂糖凝膠電泳(電壓180 V，電泳時(shí)間16 min)和Nanodrop分光光度計(jì)(IMPLEN，CA，美國(guó))檢測(cè)RNA純度，Agilent Bioanalyzer 2100(Agilent Technologies，Santa Clara，CA，美國(guó))測(cè)定RNA的濃度和完整性。

1.3 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序

將提取的樣本總RNA送至北京諾禾致源生物信息科技有限公司測(cè)序并進(jìn)行文庫(kù)構(gòu)建。采用Illumina Hiseq 2500平臺(tái)對(duì)質(zhì)量合格的RNA文庫(kù)進(jìn)行測(cè)序。同時(shí)，使用SolexaQA package對(duì)Raw reads按照QPhred≥20和讀長(zhǎng)≥25 bp進(jìn)行過(guò)濾，以獲得高質(zhì)量的Clean reads，并利用HISAT軟件將已獲得的Clean reads與甘薯參考基因組(http：//public-genomes-ngs.molgen.mpg.de/sweetpotato/)進(jìn)行序列比對(duì)分析。

1.4 差異表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子基因的篩選

基因表達(dá)水平用FPKM(Expected number of fragments per kilobase of transcript sequence per millions base pairs sequenced)法計(jì)算[15]。借助DESeq(1.10.1)軟件進(jìn)行DEGs的篩選，篩選標(biāo)準(zhǔn)為|log2FC|≥2，padj<0.05，F(xiàn)DR<0.01。為了進(jìn)一步研究差異表達(dá)基因的功能，利用GOSeq、topGO、hmmscan(Release 2.12)進(jìn)行GO富集分析，顯著富集標(biāo)準(zhǔn)為CorrectedP-value<0.05；利用KOBAS(V2.0)對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行KEGG Pathway富集分析，顯著富集標(biāo)準(zhǔn)為CorrectedP-value<0.05。

1.5 qRT-PCR

提取對(duì)照組和處理組的葉片總RNA使用TUREscript 1st Stand cDNA Synthesis Kit(北京艾德萊生物科技有限公司)試劑盒合成cDNA。qRT-PCR用SYBR?Green Supermix在analytikjena-qTOWER2.2型熒光定量PCR儀上進(jìn)行測(cè)定。反應(yīng)條件為：95 ℃，3 min；95 ℃，10 s，58 ℃，30 s，39個(gè)循環(huán)；溶解曲線60～95 ℃，+1 ℃/cycle，保持時(shí)間4 s?；虻南鄬?duì)表達(dá)量用2-ΔΔCt方法計(jì)算[16]，以18S DNA為內(nèi)參(表1)。

表1 qRT-PCR引物序列Tab.1 The primer sequences used in qRT-PCR

2 結(jié)果與分析

2.1 總RNA質(zhì)量特征

由圖1可以看出，各樣品總RNA條帶清晰無(wú)彌散、無(wú)降解、無(wú)污染。自然光照與增強(qiáng)UV-B輻射下的OD260/280分別為2.000～2.138，OD260/230分別為1.509～2.102，RNA濃度分別為160～252 ng/μL，RIN分別為5.9～7.6，各值均在檢測(cè)合格范圍內(nèi)，這表明各樣品提取的總RNA純度較高，質(zhì)量符合上機(jī)測(cè)序要求(表2)。

表2 樣品總RNA質(zhì)檢結(jié)果Tab.2 The sample total RNA quality test results

2.2 紫甘薯葉片RNA測(cè)序質(zhì)量分析

將Raw reads和Clean reads比對(duì)到甘薯參考序列，CK和T的Raw reads和Clean reads的比例相近，且二者中比對(duì)到參考序列的比率分別為72.56%和73.70%，充分說(shuō)明測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量可信[17](表3)。

表3 樣品測(cè)序數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果Tab.3 Statistical results of the sample sequencing data

2.3 紫甘薯葉片響應(yīng)UV-B輻射增強(qiáng)下的差異表達(dá)基因分析

UV-B輻射處理后紫甘薯葉片中共有477個(gè)基因表達(dá)發(fā)生顯著變化，其中上調(diào)表達(dá)的基因有382個(gè)，占總差異表達(dá)基因的80.08%，下調(diào)表達(dá)基因有95個(gè)，占總差異表達(dá)基因的19.92%。由圖2可以看出，差異表達(dá)基因中變化倍數(shù)在2～3倍、3～5倍、5倍以上的上(下)調(diào)差異表達(dá)基因分別占總上(下)調(diào)基因總數(shù)的57.59%(74.74%)，34.55%(24.21%)，7.85%(1.05%)。上述結(jié)果說(shuō)明，UV-B輻射增強(qiáng)后紫甘薯的差異表達(dá)基因主要以上調(diào)表達(dá)為主，且變化幅度主要集中在2～3倍。

2.4 紫甘薯葉片響應(yīng)UV-B輻射增強(qiáng)下DEGs的GO功能富集分析

差異表達(dá)基因行使的主要生物學(xué)功能以GO功能顯著性富集分析來(lái)確定。本研究共顯著富集到分屬于生物過(guò)程和分子功能的16條功能條目，表明UV-B輻射增強(qiáng)下紫甘薯葉片的DEGs主要通過(guò)這2個(gè)生物功能來(lái)提高自身的適應(yīng)性。生物過(guò)程主要為氧化還原過(guò)程，其DEGs數(shù)占總數(shù)的63.92%，分子功能主要富集在氧化還原酶活性中，其DEGs占比為40.91%，表明紫甘薯葉片主要通過(guò)生物過(guò)程中的氧化還原過(guò)程和分子功能中的氧化還原酶活性來(lái)抵抗UV-B輻射帶來(lái)的傷害，暗示UV-B輻射增強(qiáng)對(duì)紫甘薯葉片造成氧化傷害(表4)。

表4 紫甘薯葉片響應(yīng)UV-B輻射增強(qiáng)下DEGs的GO功能分類Tab.4 GO function categories of DEGs of purple sweet potato leaf in response to enhanced the UV-B

2.5 紫甘薯葉片響應(yīng)UV-B輻射增強(qiáng)下DEGs的KEGG代謝通路顯著性富集分析

KEGG是系統(tǒng)分析基因功能、基因組信息的數(shù)據(jù)庫(kù)，能夠較準(zhǔn)確的分析生物體內(nèi)的代謝和研究代謝網(wǎng)絡(luò)。通過(guò)分析可知，DEGs主要分布在56條代謝通路中，其中達(dá)到顯著差異水平的通路共有9條，分別為次生代謝產(chǎn)物生物合成、植物晝夜節(jié)律、苯丙素生物合成、類黃酮生物合成、氮代謝、苯丙氨酸代謝、芥子油苷生物合成、油菜素內(nèi)酯生物合成、硫胺素代謝，其中次生代謝產(chǎn)物生物合成通路所包含的DEGs數(shù)量最多，暗示其為紫甘薯響應(yīng)UV-B輻射增強(qiáng)的主要代謝通路(表5)。

表5 紫甘薯葉片響應(yīng)UV-B輻射增強(qiáng)下DEGs顯著性富集的KEGG PathwayTab.5 KEGG Pathway with significant enrichment of DEGs of purple sweet potato leaf in response to enhanced the UV-B

對(duì)次生代謝產(chǎn)物生物合成通路中的DEGs進(jìn)行功能注釋，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與類黃酮代謝相關(guān)的基因最多，如類苯丙氨酸解氨酶基因(Tai6.36393、Tai6.18421)、4-香豆酸-CoA連接酶6基因(Tai6.23346)、查爾酮合酶基因(CHS)(Tai6.1732、Tai6.53503、Tai6.45381)、查爾酮合酶DIV亞型X1基因(Tai6.1734、Tai6.46186)、二氫黃酮醇4-還原酶基因(DFR)(Tai6.3019)、咖啡酰-CoA O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因At4g26220亞型X1基因(Tai6.25039)、花青素合成酶基因(Tai6.42091、Tai6.40394)、類花青素3-O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶7基因(Tai6.49002)；其次為細(xì)胞色素P450家族，如類細(xì)胞色素P450 71A1基因(Tai6.44113)、類細(xì)胞色素P450 82D47(Novel07412)、類細(xì)胞色素P450 83B1基因(CYP83B1)(Tai6.44115、Tai6.18064、Tai6.41206)、類細(xì)胞色素P450 84A1基因(Novel06436、Novel06172)、類細(xì)胞色素P450 85A1基因(CYP85A1)(Tai6.2806、Tai6.19253、Tai6.15801)(表6)。上述結(jié)果表明，這些基因可能在響應(yīng)UV-B輻射中起關(guān)鍵作用。

表6 紫甘薯葉片響應(yīng)UV-B輻射增強(qiáng)下的主要差異表達(dá)基因Tab.6 Main DEGs of purple sweet potato leaf in response to enhanced the UV-B

2.6 紫甘薯葉片響應(yīng)UV-B輻射增強(qiáng)下的轉(zhuǎn)錄因子分析

轉(zhuǎn)錄因子(Transcription factor，TF)為轉(zhuǎn)錄調(diào)控中的核心功能蛋白，在植物響應(yīng)逆境脅迫中充當(dāng)重要角色[18]。UV-B輻射脅迫下，紫甘薯葉片共有43個(gè)轉(zhuǎn)錄因子基因差異表達(dá)，約占差異表達(dá)總基因數(shù)的9.01%，其分別隸屬于16個(gè)轉(zhuǎn)錄因子家族。這些轉(zhuǎn)錄因子家族中轉(zhuǎn)錄因子較多的家族分別為C2H2、NAM、bHLH和RR-A-type，其中NAM和RR-A-type基因全為上調(diào)表達(dá)，C2H2基因以上調(diào)表達(dá)為主，bHLH基因上、下調(diào)數(shù)目相等(圖3)。

2.7 DEGs的qRT-PCR驗(yàn)證

隨機(jī)選取7個(gè)DEGs以驗(yàn)證測(cè)序差異表達(dá)基因數(shù)據(jù)的可靠性，其中上調(diào)表達(dá)基因2個(gè)(PAL(Tai6.18421)和CYP450(Novel07412))，下調(diào)表達(dá)基因5個(gè)(CHS(Tai6.1732)、4CL(Tai6.23346)、DFR(Tai6.3019)、LDOX(Tai6.40394)和peroxidase gene(Novel09917))。以18S DNA為內(nèi)參，進(jìn)行qRT-PCR驗(yàn)證。結(jié)果顯示，選定基因在UV-B輻射增強(qiáng)脅迫下的表達(dá)趨勢(shì)與RNA-seq的檢測(cè)結(jié)果一致(圖4)，表明轉(zhuǎn)錄組測(cè)序獲得的數(shù)據(jù)較為可靠[19-20]。

3 討論與結(jié)論

本研究采用RNA-seq技術(shù)研究紫甘薯葉片對(duì)UV-B輻射增強(qiáng)的響應(yīng)，共獲得顯著響應(yīng)UV-B輻射增強(qiáng)的差異表達(dá)基因477個(gè)，其中382個(gè)上調(diào)表達(dá)，95個(gè)下調(diào)表達(dá)，表明這些DEGs對(duì)UV-B輻射脅迫的響應(yīng)主要以上調(diào)表達(dá)為主。GO功能注釋顯示，DEGs主要分布在生物過(guò)程中的氧化還原過(guò)程和分子功能中的氧化還原酶活性中；KEGG Pathway分析表明，DEGs主要富集在次生代謝產(chǎn)物生物合成通路中，且主要分布在類黃酮生物合成過(guò)程和細(xì)胞色素P450中。

類黃酮作為主要的UV-B吸收化合物，在植物生理生化層面起有效抵御UV-B輻射傷害的作用[21]。高等植物黃酮類化合物經(jīng)“一般苯丙烷類途徑(General phenylpropanoid pathway)”合成，肉桂酸和香豆酰輔酶A是合成途徑的中間產(chǎn)物，其合成受苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酸4-羥化酶(C4H)和4香豆酸輔酶A連接酶(4CL)的調(diào)控[22-23]，隨后查爾酮合酶(CHS)將4-香豆酰-輔酶A轉(zhuǎn)化為查爾酮，這一過(guò)程是類黃酮生物合成的第一個(gè)限速步驟[24]。此后，通過(guò)對(duì)分子骨架的修飾產(chǎn)生不同的類黃酮亞群，該過(guò)程是由CHS、黃烷酮-3-羥化酶(F3H)、類黃酮3′-羥化酶(F3′H)、類黃酮3′，5′羥化酶(F3′，5′H)、類黃酮3-甲基轉(zhuǎn)移酶(F3MT)、類黃酮3′，5′甲基轉(zhuǎn)移酶(F3′，5′MT)、隱色花色素還原酶(LAR)、二氫黃酮醇4-還原酶(DFR)、花色素合成酶(ANS)、3-氧-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)、CCoAMT和HCT控制的。王霞等[25]以1個(gè)紫色甘薯突變體和誘變親本為試驗(yàn)材料，通過(guò)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析證實(shí)PAL、C4H、CHS、CHI、F3H和DFR可能與紫色甘薯中花青素的合成有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，類PAL(Tai6.36393、Tai6.18421)上調(diào)表達(dá)了2倍多，4-香豆酸-CoA連接酶6基因(Tai6.23346)下調(diào)表達(dá)了2倍多，CHS(Tai6.1732、Tai6.53503、Tai6.45381)下調(diào)了2.49～3.30倍，DFR(ai6.3019)下調(diào)了4.25倍，咖啡酰-CoA O-甲基轉(zhuǎn)移酶At4g26220亞型X1基因(Tai6.25039)、ANS(Tai6.42091、Tai6.40394)及類花青素3-O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶7基因(Tai6.49002)下調(diào)了2.00～2.89倍，表明UV-B輻射增強(qiáng)下類黃酮合成通路中的各關(guān)鍵酶基因主要以下調(diào)表達(dá)為主，且IbCHS和IbDFR下調(diào)幅度最大，暗示其分別為類黃酮和花色甘合成的關(guān)鍵限速酶，致使UV-B輻射增強(qiáng)下紫甘薯葉片中的類黃酮與花色苷含量均下降[26]。

細(xì)胞色素P450是高等植物中最大的酶蛋白家族，其在合成植物次生代謝產(chǎn)物(木質(zhì)素中間物、苯丙烷類的生物合成、芥子油、IAA、萜類、黃酮類、異黃酮等)中具有重要的作用[27]。前人研究發(fā)現(xiàn)，CYP83B1為肟的代謝酶，并參與吲哚族芥子油苷核心結(jié)構(gòu)的形成，其能夠高效催化來(lái)源于色氨酸的吲哚-3-乙醛肟(IAOx)，植物體內(nèi)的CYP83B1缺失后，IAOx就不能生成吲哚族芥子油苷，而是流向IAA合成通路，在植物中積累大量的IAA加重頂端優(yōu)勢(shì)，反之則可誘導(dǎo)植物頂端優(yōu)勢(shì)減弱[28]。CYP85A1在油菜素內(nèi)酯(BR)生物合成途徑中具有重要作用[29]，油菜素內(nèi)酯可以通過(guò)改善相關(guān)抗氧化指標(biāo)來(lái)響應(yīng)非生物脅迫，進(jìn)而提高植株抗逆性能[30-31]。本研究共發(fā)現(xiàn)分屬于5個(gè)CYP450家族的10個(gè)基因，其中IbCYP83B1(Tai6.44115、Tai6.18064、Tai6.41206)和IbCYP85A1(Tai6.2806、Tai6.19253、Tai6.15801)數(shù)量最多，且全部基因均上調(diào)表達(dá)，表明IbCYP83B1和IbCYP85A1在UV-B輻射增強(qiáng)下起關(guān)鍵的正向調(diào)控作用，并可促進(jìn)紫甘薯葉片中芥子油苷和油菜素內(nèi)酯含量的增加[32-35]。

轉(zhuǎn)錄因子在響應(yīng)由環(huán)境因素引起的基因表達(dá)調(diào)控方面發(fā)揮著重要作用[36]。前人研究表明，C2H2為鋅指蛋白的一個(gè)類型，在調(diào)控植物非生物脅迫如干旱、鹽脅迫、低溫等方面起重要作用[37]。bHLH(堿性螺旋-環(huán)-螺旋)類轉(zhuǎn)錄因子是植物中第二大轉(zhuǎn)錄因子家族，其不僅具有調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)發(fā)育、參與花青素合成的功能，還在植物低溫脅迫、干旱脅迫、鹽害脅迫等非生物脅迫方面起重要作用[38]。NAC是植物特有的轉(zhuǎn)錄因子中最大的家族之一，其主要涉及對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)控、植物的逆境脅迫應(yīng)答、調(diào)控植物的抗病性、參與植物次生生長(zhǎng)調(diào)控以及激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等過(guò)程[39]。RR-A-type(反應(yīng)調(diào)節(jié)因子和假定的新型轉(zhuǎn)錄因子)，其為ARR-B(反應(yīng)調(diào)節(jié)因子)的一個(gè)亞族，在植物細(xì)胞分裂素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起正調(diào)控作用[40]。本研究中C2H2、NAM、bHLH、RR-A-type家族的DEGs數(shù)量最多，表明其在紫甘薯響應(yīng)UV-B輻射中起關(guān)鍵作用，其中NAM和RR-A-type的全部及C2H2的多數(shù)基因均為上調(diào)表達(dá)，暗示其在輻射增強(qiáng)下主要起正向調(diào)控作用，bHLH上、下調(diào)數(shù)目相等，暗示其在輻射增強(qiáng)下既起正向調(diào)控作用也具有負(fù)向調(diào)控作用，這與前人在小麥(TriticumaestivumL.)中的研究結(jié)果相似[41]。上述結(jié)果表明，UV-B輻射增強(qiáng)下，紫甘薯葉片可能主要通過(guò)C2H2、NAM、RR-A-type轉(zhuǎn)錄因子編碼基因的正向調(diào)節(jié)來(lái)應(yīng)對(duì)輻射增強(qiáng)，同時(shí)通過(guò)bHLH調(diào)控花青素含量，NAC調(diào)節(jié)ABA、GA等植物激素含量，RR-A-type調(diào)控細(xì)胞分裂素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等途徑來(lái)提高紫甘薯葉片對(duì)輻射增強(qiáng)的適應(yīng)性。

綜上所述，紫甘薯葉片響應(yīng)UV-B輻射增強(qiáng)的關(guān)鍵基因可能為類黃酮代謝過(guò)程中的IbCHS和IbDFR，以及CYP450家族的IbCYP83B1和IbCYP85A1，起主要調(diào)控作用的轉(zhuǎn)錄因子可能為C2H2、NAM、bHLH和RR-A-type。本研究不僅可為紫甘薯耐UV-B靶標(biāo)基因的篩選提供一些候選基因，還可以為揭示紫甘薯響應(yīng)UV-B脅迫轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制的研究奠定理論基礎(chǔ)。