趙敬，張文帆，楊金豪，陸婷婷，鄭佳琪，周霖，王蓉

(1.天津醫(yī)科大學總醫(yī)院婦產科，天津 300052；2天津醫(yī)科大學醫(yī)學檢驗學院，天津 300203)

宮頸癌(cervical cancer，CC)是我國女性癌癥死亡的主要原因之一[1]，嚴重威脅女性的健康[2]。腫瘤標志物檢測因高效、便捷、創(chuàng)傷小，在宮頸癌的早期診斷、病理類型識別、療效判斷、預后評估等臨床應用過程中具有重要的作用[3]。然而，血清相關腫瘤標志物對宮頸癌診斷的靈敏度較低，與其他因素聯(lián)合檢測仍是目前研究的重點[4]。

多項研究發(fā)現，雌激素E2可增加組織對人乳頭瘤病毒(human papillomaviruses, HPV)的易感性，進而導致癌變的發(fā)生[5-6]。另有學者發(fā)現，聯(lián)合檢測E2與血清腫瘤標志物有助于對肺癌患者的診療效果進行評估[7]，但聯(lián)合內分泌激素與血清腫瘤標志物檢測在宮頸癌患者診斷中的報道少見，且結果不完全一致。因此，本研究旨在檢測宮頸癌與宮頸上皮內瘤變患者血清腫瘤標志物及其內分泌激素的表達水平差異，并分析二者的相關性，以期為宮頸癌的鑒別診斷提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1研究對象 收集2017年1月至7月于天津醫(yī)科大學總醫(yī)院婦產科就診且經臨床診斷為宮頸癌及宮頸上皮內瘤變患者137例，年齡22～76歲, 中位年齡52歲。納入標準：(1)因宮頸異常(存在宮頸糜爛、肥大、潰瘍、乳頭樣增生及接觸性出血等癥狀)就診;(2)經臨床及病理組織學檢查確診;(3)術前未接受放、化療；(4)臨床與病理資料完整。排除標準：(1)既往伴有其他癌癥;(2)有口服免疫抑制劑藥物史;(3)處于妊娠期。共納入符合上述標準的宮頸上皮內瘤變患者58例，宮頸癌患者79例。

1.2標本采集 采集各研究對象入院后或就診時的空腹肘靜脈血5 mL，置于含分離膠-促凝劑的真空采血生化管中,3 500 r/min離心5 min,分離上層血清，樣本置于-20 ℃保存。

1.3化學發(fā)光微粒子免疫法檢測 采用化學發(fā)光微粒子免疫檢測法，按照ARCHIRECTi2000化學發(fā)光儀及配套的甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖類抗原125和199(CA125 & CA199)、鱗狀細胞癌抗原(SCC)、人附睪蛋白4(HE4)測定試劑盒說明書檢測各組血清腫瘤標志物的表達水平。按照ARCHIRECTi2000化學發(fā)光儀及配套的促卵泡生成素(FSH)、促黃體生成素(LH)、E2、孕酮(P)、睪酮(T)測定試劑盒說明書檢測各組內分泌激素的表達水平。儀器、試劑、校準品和質控品均購自美國雅培公司。各指標檢測嚴格按照實驗室標準操作規(guī)程的相關要求執(zhí)行，實驗結果根據各項目參考范圍與Westgard質控規(guī)則綜合分析[8]。

2 結果

2.12組患者血清腫瘤標志物和內分泌激素各指標水平的比較 與宮頸上皮內瘤變組比較，宮頸癌組患者血清腫瘤標志物CEA、SCC、HE4及內分泌激素FSH、LH的表達水平均顯著升高(P均<0.05)。而E2的表達水平顯著降低(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者血清腫瘤標志物和內分泌激素水平的比較[M(P25,P75)]

2.2ROC曲線評估各血清腫瘤標志物和內分泌激素鑒別診斷宮頸癌的價值 以宮頸上皮內瘤變組作為對照組，宮頸癌組作為疾病組，以敏感性為縱坐標、1-特異性為橫坐標繪制ROC曲線(圖1)。根據最大約登指數計算表1中存在顯著差異性指標SCC、CEA、HE4、E2、LH、FSH的cut-off值，并比較各指標單獨或聯(lián)合檢測鑒別診斷宮頸癌的敏感性和特異性，其中血清腫瘤標志物SCC、CEA的特異性較高(分別為96.4%,94.8%)，但敏感性較低(分別為38.2%，25.3%)，而內分泌激素E2的敏感性較高(77.2%)，SCC與E2、CEA與E2聯(lián)合檢測鑒別診斷宮頸癌的敏感性增加至87.3%和82.3%, 而SCC與E2聯(lián)合檢測的準確性最高(71.5%)。見表2。

圖1 各指標單獨及聯(lián)合檢測對宮頸癌鑒別診斷的ROC曲線

表2 ROC曲線評估各血清腫瘤標志物和內分泌激素對宮頸癌的鑒別診斷價值(%)

2.3各血清腫瘤標志物與內分泌激素的相關性分析結果 對在表1中在2組患者之間存在顯著性差異的6個指標(CEA、SCC、HE4和E2、LH、FSH)進行相關性分析，結果表明，血清腫瘤標志物SCC與內分泌激素間均無相關性；CEA與E2呈負相關(r=-0.245,P<0.01)，而與LH、FSH呈正相關(r分別為0.284和0.302,P<0.01)；HE4與E2負相關(r=-0.263,P<0.01)，而與LH、FSH呈正相關(r分別為0.331和0.346,P<0.01)。

2.4宮頸癌發(fā)生危險因素的Logistic分析結果 將宮頸癌患者和宮頸上皮內瘤變患者作為二分類因變量，納入CEA、SCC、HE4、E2、LH和FSH等具有顯著性差異水平的指標作為自變量，利用二分類 Logistic 回歸分析結果表明，E2和SCC是宮頸癌發(fā)生的風險因素。見表3。

表3 各血清腫瘤標志物與內分泌激素的Logistic 回歸分析結果

3 討論

研究表明，宮頸癌的發(fā)展過程較為緩慢，經過早期治療的宮頸癌患者的5年生存率高達85%～90%, 但晚期宮頸癌患者的5年生存率僅為10%～20%[9]。目前血清腫瘤標志物檢測已廣泛用于宮頸癌的臨床診斷、療效及預后評估等診療環(huán)節(jié)中[10]。SCC是目前臨床上篩查宮頸癌的首選腫瘤標志物，而CEA屬于廣譜性的腫瘤標志物,在宮頸腺癌患者血清中的表達水平明顯增加[11]。正常情況下，上述腫瘤標志物呈低表達，當機體中存在腫瘤細胞并呈異常增殖時，其表達水平可顯著升高[12]。本研究結果表明，宮頸癌組血清SCC、CEA、HE4的表達水平顯著高于宮頸上皮內瘤變組(P<0.05)，表明SCC、CEA、HE4對宮頸癌的鑒別診斷具有一定的臨床應用價值。

既往研究表明，單一血清腫瘤標志物檢查的準確性難以保證。呂冰等[13]認為HPV感染亞型可顯著影響血清SCC、CEA等腫瘤標志物的表達。為提高腫瘤檢出的準確性，腫瘤標志物與其他指標的聯(lián)合檢測仍是當今研究的重點，DNA甲基化、HPV及液基薄層細胞(TCT)聯(lián)合檢測亦出現越來越多的報道[14]。研究表明，E2的異常改變在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用[15]。在病理條件下，E2是子宮內腫瘤血管生成的關鍵調節(jié)因子。有學者證實，口服避孕藥、多胎生產等都是宮頸癌發(fā)生的危險因素[16]。楊建萍等[6]亦認為，E2與HPV感染在宮頸癌的發(fā)生過程中可能具有協(xié)同作用。本研究結果顯示，內分泌激素的多項指標在宮頸上皮內瘤變和宮頸癌人群中的差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

多項研究表明，E2與腫瘤標志物的聯(lián)合檢測有助于肺癌患者的診斷及預后[17-18]。本研究亦發(fā)現，SCC、CEA單獨用于宮頸癌鑒別診斷時，兩者的敏感性均較低(分別為38.2%，25.3%)，而聯(lián)合SCC與E2或聯(lián)合CEA與E2用于宮頸癌鑒別診斷的敏感性明顯增加(87.3%，82.3%)，其中SCC與E2聯(lián)合聯(lián)測的準確性最高(71.5%)，可有效彌補單一腫瘤標志物檢出敏感性較低的缺陷，對防止宮頸癌患者的誤診、漏診具有一定的價值。此外，危險因素分析結果亦提示，E2是癌癥發(fā)生的風險因子，因此，臨床上對宮頸上皮內瘤變期患者的鑒別診斷及治療需密切關注其E2水平的變化。

目前，為提高婦科腫瘤患者術后的生活質量，激素替代治療受到了越來越多的關注，但激素替代治療使用的安全性及相對危險度仍有較大爭議[19]。Schneider等[20]認為，激素替代治療不會增加宮頸癌的患病風險；而Lacey等[21]證實，單獨使用E2替代治療可提高癌變的風險。本研究結果顯示，E2的表達水平與CEA、HE4存在相關性，可監(jiān)測激素治療后CEA、HE4表達水平的改變，為激素治療后療效監(jiān)測提供參考依據。此外，本研究還證實E2與SCC之間不存在相關性，而SCC是宮頸癌發(fā)生的危險因素(P=0.008)。因此，可通過檢測SCC的表達水平，監(jiān)測激素替代治療后宮頸癌患者復發(fā)的可能性。

綜上所述,本研究證實，部分血清腫瘤標志物與內分泌激素在宮頸癌和宮頸上皮內瘤變患者中的表達水平存在顯著差異，二者聯(lián)合分析可顯著提高對宮頸癌的鑒別診斷價值，并對患者治療及預后進行精準評估。