梁瓊文

(岑溪市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣西 岑溪 543200)

0 引言

根據(jù)《國家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》的通知要求，明確將高致病性禽流感納入強(qiáng)制免疫計(jì)劃，并要求對(duì)高致病性禽流感免疫密度達(dá)到100%，免疫抗體合格率達(dá)到70%以上。

目前針對(duì)免疫重組禽流感病毒(H5+H7)三價(jià)滅活疫苗，其免疫效力水準(zhǔn)一直有待評(píng)價(jià)?，F(xiàn)就實(shí)際檢測情況，具體分析如下。

1 材料以及方法

1)實(shí)驗(yàn)用活體。23日齡沒有特定病原的生產(chǎn)用雞。

2)實(shí)驗(yàn)用疫苗。三黃雞免疫重組禽流感病毒(H5+H7)三價(jià)滅活疫苗(H5N1 Re-12株，H7N9 H7-Re3株)，試2019008以及試20201118共2個(gè)批次。

3)檢驗(yàn)用標(biāo)準(zhǔn)抗原。三黃雞免疫重組禽流感病毒(H5+H7)H7亞型-Re3株標(biāo)準(zhǔn)抗原，批號(hào)為20201118。

4)實(shí)驗(yàn)方法。按照三黃雞免疫重組禽流感病毒體H7亞型-Re3株三價(jià)滅活疫苗制造及檢驗(yàn)試行規(guī)程中成品檢驗(yàn)的血清學(xué)效力檢驗(yàn)方法：兩批防護(hù)性抗原制劑分別免疫10只沒有特定病原的生產(chǎn)用雞，每只胸部肌肉注射防護(hù)性抗原制劑0.3 mL；另設(shè)空白對(duì)照組的生產(chǎn)用雞5只，不免疫防護(hù)性抗原制劑。免后14 d、21 d、28 d，分別采血分離血清，血清分別用三黃雞免疫重組禽流感病毒H7亞型-Re3株標(biāo)準(zhǔn)抗原，按微量法禽流感血凝抑制(HI)實(shí)驗(yàn)計(jì)算測定HI起保護(hù)作用的抗體效價(jià)。實(shí)驗(yàn)分組設(shè)置詳見表1。

表1 試驗(yàn)分組設(shè)置

2 結(jié)果以及討論

1)各實(shí)驗(yàn)雞免后14 d、21 d、28 d，分別測定H7亞型-Re3株的HI起保護(hù)作用的抗體效價(jià)，計(jì)算各組的HI起保護(hù)作用的抗體效價(jià)均值(GMT)。具體如表2所示。

表2 試驗(yàn)各組抗體效價(jià) 單位：log2

2)三黃雞免疫重組禽流感病毒(H5+H7)三價(jià)滅活疫苗血清學(xué)效力檢驗(yàn)合格的判定標(biāo)準(zhǔn)：每批三價(jià)滅活疫苗按照劑量免疫，0.3 mL/只，免后21 d，免疫雞血清的H7亞型-Re3株的HI起保護(hù)作用的抗體效價(jià)均值(GMT)均應(yīng)不低于6(log2)；空白對(duì)照組的生產(chǎn)用雞的HI起保護(hù)作用的抗體效價(jià)應(yīng)不高于2(log2)。

從本次檢驗(yàn)的結(jié)果看，空白對(duì)照組的生產(chǎn)用雞的HI起保護(hù)作用的抗體效價(jià)在各個(gè)采血點(diǎn)均<2(log2)，檢驗(yàn)的空白對(duì)照成立；實(shí)驗(yàn)組的生產(chǎn)用雞的H7亞型-Re3株的HI起保護(hù)作用的抗體效價(jià)均值在免后14 d均大于7(log2)，在免后21 d均大于9(log2)。由此可知，防護(hù)性抗原制劑可誘導(dǎo)雞體產(chǎn)生良好的免疫應(yīng)答，免后14 d已產(chǎn)生較好的免疫力，免后21 d的HI起保護(hù)作用的抗體效價(jià)比合格標(biāo)準(zhǔn)高3個(gè)滴度以上，防護(hù)性抗原制劑的免疫效果良好。

3)免后28 d的H7亞型-Re3株的HI起保護(hù)作用的抗體效價(jià)均值均大于10(log2)，對(duì)比免后21 d，起保護(hù)作用的抗體水平呈繼續(xù)升高的趨勢，這與禽用油乳劑滅活三價(jià)滅活疫苗起保護(hù)作用的抗體上升規(guī)律一致。

3 結(jié)語

本次實(shí)驗(yàn)計(jì)算結(jié)果顯示：三黃雞免疫重組禽流感病毒(H5+H7)三價(jià)滅活疫苗(H5N1 Re-12株，H7N9 H7-Re3株)的毒種免疫原性良好，按現(xiàn)有生產(chǎn)工藝制備的防護(hù)性抗原制劑，免疫力產(chǎn)生快，免疫起保護(hù)作用的抗體蛋白質(zhì)水準(zhǔn)高。當(dāng)然，三黃雞免疫重組禽流感病毒(H5+H7)三價(jià)滅活疫苗實(shí)驗(yàn)制作工藝有一個(gè)持續(xù)改善以及優(yōu)化的階段，相信隨著其實(shí)驗(yàn)制作工藝的進(jìn)一步優(yōu)化，防護(hù)性抗原制劑的質(zhì)量水準(zhǔn)可進(jìn)一步增強(qiáng)。

根據(jù)有關(guān)單位的研究結(jié)果，我國目前H5亞型禽流感流行以H5N6亞型為主，伴隨少量的H5N1亞型；從H5亞型基因進(jìn)化樹來看，以2.3.4.4d分支為主，伴隨少量2.3.2.1d分支。據(jù)報(bào)道的攻毒實(shí)驗(yàn)計(jì)算結(jié)果表明，對(duì)2.3.4.4d分支的H5N6亞型禽流感流行毒株，原來的H5N1Re-8株防護(hù)性抗原制劑僅能提供20%的保護(hù)，H5N1Re-12株防護(hù)性抗原制劑則能夠完全保護(hù)。三黃雞免疫重組禽流感病毒(H5+H7)三價(jià)滅活疫苗，對(duì)我國高致病性禽流感流行毒株的針對(duì)性強(qiáng)，免疫保護(hù)效果好。

我國對(duì)高致病性禽流感采取免疫以及撲殺相結(jié)合的防控策略，其中全面免疫是關(guān)鍵技術(shù)措施。三黃雞免疫重組禽流感病毒(H5+H7)三價(jià)滅活疫苗的推出使用，為防控高致病性禽流感提供了強(qiáng)有力的保障。