王 賀,申志華,薛潤(rùn)國(guó),劉海麗,謝 靜

(河北省承德市中心醫(yī)院，河北 承德 067000)

胃癌是威脅人類健康的常見(jiàn)惡性腫瘤，居全部惡性腫瘤第5位，發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜[1]。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)是惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展的重要步驟，在此過(guò)程中E-cadherin和Vimentin的表達(dá)變化是標(biāo)志性事件。人表皮生長(zhǎng)因子2(human epidermal growth factor receptor 2，Her-2)常用于腫瘤的研究，這個(gè)因子與藥物敏感性和預(yù)后密切相關(guān)[2]。本研究探討胃癌與EMT和Her-2的關(guān)系，從而分析EMT和Her-2在胃癌中的相互作用，為臨床的診斷和治療開(kāi)拓新視野。

1 資料與方法

1.1一般資料:選取承德市中心醫(yī)院2016年1月至2020年12月收治的確診為胃癌患者198例作為分析標(biāo)本，患者當(dāng)中男105例，女93例，年齡35～87歲。所有患者均經(jīng)過(guò)病理證實(shí)胃癌，臨床病理資料完整。取癌旁組織為對(duì)照組。

1.2方法:采用免疫組化法檢測(cè)E-cadherin和Vimentin及Her-2的表達(dá)。按試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行嚴(yán)格操作檢測(cè)試劑購(gòu)自邁新生物技術(shù)有限公司。

1.3判斷標(biāo)準(zhǔn):E-cadherin陽(yáng)性：腫瘤細(xì)胞細(xì)胞膜呈棕褐色或黃色；Vimentin陽(yáng)性：腫瘤細(xì)胞細(xì)胞漿呈棕褐色或黃色。由兩名病理醫(yī)師雙盲閱片，以細(xì)胞膜/細(xì)胞質(zhì)/細(xì)胞核中出現(xiàn)黃色或黃褐色顆粒視為免疫組織化學(xué)染色陽(yáng)性。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)：①染色強(qiáng)度：無(wú)色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；②陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比率：無(wú)細(xì)胞陽(yáng)性著色為0分；1%～25%的細(xì)胞陽(yáng)性著色為1分；26%～50%的細(xì)胞陽(yáng)性著色為2分；51%～75%的細(xì)胞陽(yáng)性著色為3分；大于75%的細(xì)胞陽(yáng)性著色為4分；最終評(píng)分結(jié)果為染色強(qiáng)度和染色細(xì)胞所占比率的評(píng)分乘積；<3分為低表達(dá)，用“-”表示；≥3分為高表達(dá)，用“+”表示。Her-2判讀標(biāo)準(zhǔn)[3]：《乳腺癌Her-2檢測(cè)指南》，癌細(xì)胞無(wú)染色或≤10%癌細(xì)胞呈不完整的、微弱細(xì)胞膜染色或>10%的癌細(xì)胞細(xì)胞膜呈不完整、微弱的染色記為陰性(-)；>10%的癌細(xì)胞細(xì)胞膜呈不完整或中等強(qiáng)度的染色或≤10%癌細(xì)胞呈現(xiàn)強(qiáng)且完整的細(xì)胞膜著色或>10%癌細(xì)胞呈現(xiàn)強(qiáng)且完整的細(xì)胞膜染色記為陽(yáng)性(+)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，卡方檢驗(yàn)對(duì)定性資料進(jìn)行比較，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1在胃癌及癌旁組織中，EMT標(biāo)記物E-cadherin、Vimentin的表達(dá)情況:E-cadherin在細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞膜表達(dá)，Vimentin在細(xì)胞質(zhì)表達(dá)；胃癌組織中E-cadherin的陽(yáng)性表達(dá)率(77.27%)，Vimentin的陽(yáng)性表達(dá)率(13.13%)，癌旁組織中E-cadherin的表達(dá)(97.98%)，Vimentin的陽(yáng)性表達(dá)率(2.02%)；兩者相比，具有明顯差異性，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)圖1，表1、2。

表1 胃癌和癌旁組織中EMT標(biāo)記物E-cadherin的表達(dá)水平比較n(%)

表2 胃癌和癌旁組織中EMT標(biāo)記物Vimentin的表達(dá)水平比較n(%)

2.2EMT標(biāo)記物E-cadherin、Vimentin與胃癌臨床病理特征的關(guān)系:EMT標(biāo)記物E-cadherin、Vimentin的表達(dá)與患者的性別、年齡無(wú)關(guān)(P>0.05)，與腫瘤的分化程度、浸潤(rùn)深度和是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05),見(jiàn)表3、4。

表3 胃癌病理特征與E-cadherin的表達(dá)

表4 胃癌病理特征與Vimentin的表達(dá)

圖1 ①E-cadherin在胃癌組織中的表達(dá)；②E-cadherin在癌旁組織中的表達(dá)；③Vimentin在胃癌組織中的表達(dá)；④Vimentin在癌旁組織中的表達(dá)；⑤Her-2在胃癌中的表達(dá)(①③⑤為癌組織，②④為癌旁組織SP×100)

2.3胃癌中Her-2的表達(dá)與EMT標(biāo)記物E-cadherin、Vimentin的相互關(guān)系:198例胃癌組織中有76例 her-2(+)，與Her-2(-)的胃癌病例相比較，her-2(+)的病例中E-cadherin 的表達(dá)降低，Vimentin 表達(dá)增加，檢驗(yàn)得出差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，)。見(jiàn)圖1，表5、6。

表5 Her-2表達(dá)與E-cadherin的關(guān)系

表6 Her-2表達(dá)與Vimentin的關(guān)系

3 討 論

近些年，隨著人們飲食習(xí)慣及生活規(guī)律改變，胃癌的發(fā)生率呈逐年上漲的趨勢(shì)。很多學(xué)者在研究胃癌的過(guò)程中，探尋了不同的研究路徑，EMT正是這些研究路徑中備受人們關(guān)注的。EMT參與了多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展[4]。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)標(biāo)記胃癌和癌旁組織中EMT標(biāo)記物Vimentin和E-cadherin的表達(dá)差異性，證實(shí)了EMT與胃癌的發(fā)生密切相關(guān)；E-cadherin是EMT發(fā)生的重要標(biāo)志之一，E-cadherin的低表達(dá)會(huì)促進(jìn)腫瘤發(fā)生侵襲或轉(zhuǎn)移。同時(shí)發(fā)現(xiàn)EMT相關(guān)蛋白的表達(dá)與年齡、性別關(guān)系不大，而與腫瘤的分化程度、浸潤(rùn)深度以及是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。E-cadherin是上皮標(biāo)記物，在相對(duì)正常的癌旁組織中表達(dá)高于胃癌組織，這是由于胃癌組織中發(fā)生EMT現(xiàn)象導(dǎo)致E-cadherin的表達(dá)缺失；Vimentin是間質(zhì)標(biāo)記物，相對(duì)正常的癌旁組織中的表達(dá)顯著低于癌組織中的表達(dá)，這也是EMT發(fā)生的有力證明；在低分化胃癌中E-cadherin的表達(dá)低于高-中分化胃癌，相反Vimentin的表達(dá)高于高-中分化胃癌的表達(dá)；浸潤(rùn)深度超過(guò)肌層的胃癌E-cadherin的表達(dá)低于未浸透肌層的胃癌，相反Vimentin的表達(dá)高于未浸透肌層的胃癌；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌病例中E-cadherin的表達(dá)低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌，相反Vimentin的表達(dá)高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌，這與上述的研究相符合，更證實(shí)了在胃癌發(fā)生、發(fā)展中存在EMT現(xiàn)象。

日常診斷和治療過(guò)程中，Her-2是常用的腫瘤臨床靶向治療的重要靶點(diǎn)，尤其在乳腺癌的治療中發(fā)揮重要作用[5]。相關(guān)研究證實(shí)[6]，在乳腺癌中Her-2的表達(dá)與EMT具有密切關(guān)系，但在胃癌中類似的研究國(guó)內(nèi)較少，因此我們?cè)谖赴┲?，檢測(cè)Her-2的表達(dá)，并將Her-2的表達(dá)情況與EMT標(biāo)記物Vimentin和E-cadherin相關(guān)聯(lián)分析，通過(guò)專業(yè)軟件的顯示，我們發(fā)現(xiàn)her-2(+)與Her-2(-)的胃癌病例相比較，Her-2(+)的病例中E-cadherin的表達(dá)降低，Vimentin表達(dá)增加。

實(shí)驗(yàn)最后，我們發(fā)現(xiàn)，EMT在胃癌的發(fā)生、發(fā)展起到重要作用，同時(shí)Her-2的表達(dá)也影響EMT標(biāo)志物的表達(dá)，究竟是EMT與Her-2具有直接相關(guān)性，還是EMT與Her-2同時(shí)在胃癌表達(dá)還有待繼續(xù)探討，但是我們的結(jié)論為進(jìn)一步探討胃癌的診斷和治療的方向開(kāi)拓了新思路。