周 熒，王 頔，武玉祥，聶 飛*

（1.貴州省生物研究所，貴州貴陽(yáng) 550009；2.湄潭縣林業(yè)局，貴州遵義 564100）

藍(lán)莓原產(chǎn)地為北美洲，主要分為高叢、矮叢和兔眼3大類(lèi)［1］。藍(lán)莓果實(shí)呈深藍(lán)色，成熟時(shí)表面覆蓋有一層白色果粉，口感風(fēng)味獨(dú)特，酸甜適宜；藍(lán)莓鮮果中富含花青素、黃酮類(lèi)等多酚活性物質(zhì)，這些抗氧化活性物質(zhì)具有促進(jìn)視紅素再生、抗癌、抗炎和消炎及延緩人類(lèi)記憶衰退等作用［2-5］。目前，國(guó)內(nèi)關(guān)于藍(lán)莓栽培種植、生長(zhǎng)抗性及果實(shí)指標(biāo)評(píng)價(jià)的研究報(bào)道較多［6-10］，但關(guān)于不同生態(tài)區(qū)藍(lán)莓抗氧化能力大小鮮有報(bào)道。以貴州省4 個(gè)常見(jiàn)栽培品種為材料，分別測(cè)定3 個(gè)不同海拔區(qū)域藍(lán)莓果實(shí)中總酚、類(lèi)黃酮、原花色素含量及抗氧化能力測(cè)定，為貴州省乃至全國(guó)藍(lán)莓不同生態(tài)區(qū)藍(lán)莓產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

以貴州省主栽的兔眼類(lèi)藍(lán)莓品種“燦爛”“園藍(lán)”及高叢類(lèi)藍(lán)莓“萊克西”“藍(lán)雨”作為試驗(yàn)材料。

1.2 基地簡(jiǎn)介

麻江縣宣威鎮(zhèn)龍奔基地，海拔800 m，地處貴州省東部云貴高原向湘桂丘陵過(guò)度的斜坡地帶，樣地地勢(shì)北高南低；土壤為酸性黃壤。麻江縣藍(lán)之靈基地，海拔 1 100 m，地處貴州省東部云貴高原向湘桂丘陵過(guò)度的斜坡地帶，樣地地勢(shì)西高東低；土壤為酸性黃壤。六盤(pán)水市玉舍鎮(zhèn)前進(jìn)村藍(lán)莓基地，海拔2 000 m，位于貴州省西北部，地形起伏較大，屬于典型的喀斯特地貌，土壤為酸性黃壤。

1.3 試驗(yàn)方法

于2018 年5—7 月對(duì)5 年生樹(shù)體健壯、長(zhǎng)勢(shì)大致相同的兔眼藍(lán)莓“燦爛”“圓藍(lán)”和高叢藍(lán)莓“萊克西”“藍(lán)雨”成熟果實(shí)進(jìn)行采樣。3 個(gè)種植基地均按照高叢藍(lán)莓行距 2 m、株距1 m，兔眼藍(lán)莓行距2.5 m、株距1.5 m 進(jìn)行種植。實(shí)驗(yàn)地田間施肥、栽培技術(shù)及后期管理措施均保持一致。在藍(lán)莓園內(nèi)上、中、下3 個(gè)坡位設(shè)定有代表性的采樣點(diǎn)，每個(gè)樣點(diǎn)選擇3 株，每株植株的上、中、下部隨機(jī)選取無(wú)病蟲(chóng)害、無(wú)機(jī)械損傷的果實(shí)，采用液氮速凍處理后，立即帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行測(cè)定。

原花青素的測(cè)定：參考保健食品原花青素的測(cè)定［11］；

類(lèi)黃酮含量的測(cè)定：參照Wolfe 等人的方法測(cè)定［12］；

總酚含量的測(cè)定：采用福林酚法［13］，結(jié)果以沒(méi)食子酸含量表示（mg·g-1）；

總抗氧化能力、羥基清除率和DPPH 自由基清除力的測(cè)定：使用蘇州科銘生物技術(shù)有限公司提供的試劑盒。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2016 進(jìn)行數(shù)據(jù)的錄入，SPSS 22.0 進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同海拔生態(tài)區(qū)3個(gè)藍(lán)莓品種果實(shí)抗氧化活性特性

從表1 中可以看出，高叢類(lèi)藍(lán)莓中“藍(lán)雨”的類(lèi)黃酮含量、總酚含量、原花青素含量、總抗氧化能力、羥基清除率、DPPH 清除率均高于“萊克西”，且隨著海拔的升高而增加、增強(qiáng)。在兔眼藍(lán)莓中，“燦爛”和“圓藍(lán)”在相同海拔區(qū)，類(lèi)黃酮含量、總酚含量、原花青素含量、總抗氧化能力、羥基清除率、DPPH 清除率均為“圓藍(lán)”含量高于“燦爛”。高叢類(lèi)藍(lán)莓中，在高海拔地區(qū)整體含量高于低海拔地區(qū)，兔眼藍(lán)莓中“燦爛”在中海拔地區(qū)的各測(cè)定值是最高的，說(shuō)明“燦爛”在中海拔地區(qū)的抗氧化活性最強(qiáng)，而“圓藍(lán)”在高海拔地區(qū)的抗氧化活性最強(qiáng)。4 個(gè)品種的類(lèi)黃酮、總酚和原花青素整體呈高海拔地區(qū)高于低海拔地區(qū)，其產(chǎn)生的原因可能是因?yàn)榄h(huán)境中溫度和光照會(huì)直接影響這些化合物的產(chǎn)生，不同的環(huán)境會(huì)導(dǎo)致它們含量上的差異。光照弱的高海拔地區(qū)，溫度低，晝夜溫差大，更有利于它們的積累，所以含量較低海拔地區(qū)要高。而藍(lán)莓的抗氧化能力與類(lèi)黃酮、總酚和原花青素的含量相關(guān)，含量高抗氧化能力更強(qiáng)，含量低抗氧化能力較弱。

表1 貴州3 個(gè)生態(tài)區(qū)內(nèi)4 個(gè)藍(lán)莓品種類(lèi)黃酮、總酚、原花青素含量

2.2 不同海拔生態(tài)區(qū)藍(lán)莓果實(shí)活性物質(zhì)與抗氧化活性相關(guān)性分析

由表2 可知，藍(lán)莓果實(shí)中原花青素含量、類(lèi)黃酮含量、總酚含量與植株抗氧化活性顯著相關(guān)（p＜0.01）。其中?OH 清除率與原花青素含量相關(guān)系數(shù)最強(qiáng)，相關(guān)系數(shù)為0.954；其次是與類(lèi)黃酮含量的相關(guān)性，與總酚相關(guān)性最差；DPPH 清除率與原花青素含量相關(guān)性系數(shù)最大，其次與總酚，與類(lèi)黃酮含量相關(guān)性最?。豢偪寡趸芰εc原花青素和總酚相關(guān)系最大，與類(lèi)黃酮含量相關(guān)性最小。

表2 藍(lán)莓果實(shí)活性物質(zhì)與抗氧化活性相關(guān)性分析

2.3 不同海拔生態(tài)區(qū)果實(shí)抗氧化能力綜合比較

由于?OH 清除率、DPPH 清除率、總抗氧化能力這3 種方法對(duì)不同海拔生態(tài)區(qū)不同藍(lán)莓品種的抗氧化活性高低的評(píng)價(jià)不一致，因此，本研究采用張桂偉等［14］的抗氧化評(píng)價(jià)指數(shù)（APCI）對(duì)不同品種抗氧化活性高低排序，APCI=∑［（樣品抗氧化值?最大抗氧化值× 3）×100］。結(jié)果顯示（見(jiàn)表3），“園藍(lán)”果實(shí)抗氧化能力分別在高、中、低海拔地區(qū)綜合評(píng)價(jià)為第1、第2、第3；“藍(lán)雨”果實(shí)和“萊克西”果實(shí)在高、中、低海拔地區(qū)均為高海拔地區(qū)抗氧化活性最強(qiáng)，“燦爛”在中海拔地區(qū)抗氧化活性最強(qiáng)。

表3 不同海拔生態(tài)區(qū)藍(lán)莓果實(shí)抗氧化活性

3 討論與結(jié)論

貴州省不同海拔生態(tài)區(qū)3個(gè)藍(lán)莓品種的抗氧化能力不同，整體上是高海拔地區(qū)果實(shí)抗氧化能力強(qiáng)于低海拔地區(qū)。研究發(fā)現(xiàn)，海拔對(duì)植物活性物質(zhì)積累和抗氧化能力具有相關(guān)性［15-16］，當(dāng)海拔升高時(shí)，環(huán)境條件變得更加惡劣，迫使植物抵抗逆境脅迫能力增強(qiáng)，從而提高了抗氧化能力［17］。也有研究表面，高海拔地區(qū)太陽(yáng)紫外線(xiàn)比較強(qiáng)，UV-B 輻射中部分光譜到達(dá)地面，這些光譜與植物生長(zhǎng)密切相關(guān)，可以改變植物胞質(zhì)膜的酶系統(tǒng)，改變植物質(zhì)膜的結(jié)構(gòu)［18］，導(dǎo)致抗氧化能力增強(qiáng)。不同品種果實(shí)抗氧化能力也存在差異，本試驗(yàn)4 個(gè)品種中“園藍(lán)”的抗氧化能力最強(qiáng)，這可能與“園藍(lán)”中花青素種類(lèi)最豐富相關(guān)，兔眼類(lèi)藍(lán)莓中“園藍(lán)”抗氧化能力強(qiáng)于“燦爛”，高叢類(lèi)藍(lán)莓中抗氧化能力“藍(lán)雨”強(qiáng)于“萊克西”。本研究中，藍(lán)莓果實(shí)中原花青素含量、類(lèi)黃酮含量、總酚含量與植株抗氧化活性顯著相關(guān)（p＜0.01），其中?OH清除率與原花青素含量相關(guān)系數(shù)最強(qiáng)，表明原花青素、類(lèi)黃酮、總酚是藍(lán)莓果實(shí)抗氧化能力的重要物質(zhì)。本研究中單一的抗氧化能力并不能說(shuō)明果實(shí)真實(shí)的抗氧化能力的強(qiáng)弱，果實(shí)總抗氧化能力也不是單個(gè)物質(zhì)抗氧化能力的疊加，需要多種物質(zhì)協(xié)同和拮抗作用影響總的抗氧化能力，評(píng)價(jià)也需要多個(gè)指標(biāo)綜合分析。本研究中只檢測(cè)了果實(shí)中最基本的抗氧化指標(biāo)，對(duì)于藍(lán)莓果實(shí)中其他的活性物質(zhì)指標(biāo)還需進(jìn)一步研究。