寧尚福,楊勇,凌振雄,林才華
吳川市人民醫(yī)院腫瘤科,廣東 湛江 524500
骨轉(zhuǎn)移為惡性腫瘤的常見并發(fā)癥,骨轉(zhuǎn)移易引發(fā)高鈣、疼痛、病理性骨折等骨相關事件,嚴重影響患者生活質(zhì)量[1]。流行資料報道,多數(shù)肺癌、乳腺癌及前列腺癌患者可發(fā)生骨轉(zhuǎn)移[2]。目前骨轉(zhuǎn)移的治療缺乏根治性手段,抗骨轉(zhuǎn)移治療僅可延緩骨轉(zhuǎn)移的進展,骨轉(zhuǎn)移的早期診療對惡性腫瘤患者預后改善有重要作用。骨活檢是診斷骨轉(zhuǎn)移的金標準,但其創(chuàng)傷較大,難以用于骨轉(zhuǎn)移治療期間的動態(tài)監(jiān)測。最新研究發(fā)現(xiàn)[3],多種實驗指標和惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移有良好相關性。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)能夠為腫瘤細胞的生長提供有利條件,能夠反映腫瘤惡性程度,臨床研究報道,VEGF 在多種惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移患者中呈過表達[4]。Toll 樣受體4 (TLR4)是介導炎癥反應的重要因子。有研究認為,TLR4的表達和惡性腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移能力有直接關系[5]。循環(huán)腫瘤細胞(CTCs)對于惡性腫瘤預后評價有重要作用。既往研究表明,外周血CTCs 濃度越高提示患者預后越差[6]。本研究旨在探討血清VEGF、TLR4水平及CTCs在肺癌、乳腺癌和前列腺癌骨轉(zhuǎn)移中的臨床意義。
1.1 一般資料回顧性分析吳川市人民醫(yī)院2019年1~12月收治的100例初診肺癌、乳腺癌及前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者(骨轉(zhuǎn)移組)的臨床資料。納入標準[7]:①均符合肺癌、乳腺癌及前列腺癌的診斷標準,并通過穿刺活檢病理確診及手術(shù)切除術(shù)病理檢查確診;②近期ECT骨掃描和MRI均明確診斷骨轉(zhuǎn)移;③預計生存期大于3個月;④均有骨痛癥狀;⑤均予以相關標準抗腫瘤治療,并接受骨轉(zhuǎn)移治療。排除標準:①既往有陳舊性骨折、骨退行性病變、骨慢性感染和其他腫瘤者;②肝功能損傷者;③既往因骨轉(zhuǎn)移接受過相關治療者;④其他腫瘤轉(zhuǎn)移者;⑤重度惡液質(zhì)狀態(tài)的癌癥患者。100 例患者中男性57 例,女性43 例;年齡25~72歲,平均(53.97±5.42)歲;肺癌47例,乳腺癌23例,前列腺癌30例;骨轉(zhuǎn)移灶<3處32例,≥3處68例;骨轉(zhuǎn)移療效判定無效21 例,有效79 例。選擇同期我院收治的94例初診肺癌、乳腺癌及前列腺癌無骨轉(zhuǎn)移患者納入對照組,其一般狀況評分、臨床分期、病理類型、前期治療方式與骨轉(zhuǎn)移組肺癌、乳腺癌及前列腺癌病例分布一致。94 例患者中男性51 例,女性43 例;年齡26~70 歲,平均(52.86±5.61)歲;肺癌47 例,乳腺癌20例,前列腺癌27例。兩組患者的基礎資料比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核通過。
1.2 觀察指標(1) 比較兩組患者的VEGF、TLR4 水平和CTCs 陽性率。收集所有患者清晨空腹外周靜脈血,用酶聯(lián)免疫分析法測定血漿中VEGF 水平。采用Western blot法檢測患者血漿中TLR4 mRNA表達情況。 采用Cellsearch 檢測系統(tǒng)測定外周血CTCs,將7.5 mL 外周血中CTCs 檢出個數(shù)≥5 個納為陽性。(2)比較不同骨轉(zhuǎn)移病灶者的VEGF、TLR4水平和CTCs 陽性率。骨轉(zhuǎn)移組患者均接受12 個月隨訪,將隨訪期間發(fā)生骨轉(zhuǎn)移疼痛加重或重新出現(xiàn)骨轉(zhuǎn)移、骨轉(zhuǎn)移灶增加、病理性骨折、脊髓壓迫均納入發(fā)生骨相關事件。(3)比較不同骨轉(zhuǎn)移療效者的VEGF、TLR4水平和CTCs 陽性率。骨轉(zhuǎn)移療效評價:治療后經(jīng)X線及掃描等檢查,原病變?nèi)肯?,且至?周判定為完全緩解;溶骨性病灶部分縮小或鈣化,或者成骨性病灶密度減低判定為部分緩解;病變無明顯改變判定為穩(wěn)定;原有病灶擴大或發(fā)生新病灶判定為進展[7]。完全緩解、部分緩解判定及穩(wěn)定均判定為有效,進展判定為無效。(4)比較骨轉(zhuǎn)移有無骨相關事件發(fā)生者的VEGF、TLR4水平和CTCs陽性率。
1.3 統(tǒng)計學方法應用SPSS20.0 軟件進行統(tǒng)計學分析,計量資料符合正態(tài)分布,以均數(shù)±標準差(±s)表示,組間均數(shù)比較采用t 檢驗,計數(shù)資料比較采用χ2檢驗,均以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。
2.1 兩組患者的VEGF、TLR4 水平和CTCs 陽性率比較骨轉(zhuǎn)移組患者的VEGF、TLR4 水平和CTCs陽性率明顯高于對照組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表1。
表1 兩組患者的VEGF、TLR4水平和CTCs陽性率比較[±s,例(%))
表1 兩組患者的VEGF、TLR4水平和CTCs陽性率比較[±s,例(%))
組別骨轉(zhuǎn)移組對照組t/χ2值P值例數(shù)100 94 VEGF (pg/mL)341.85±40.68 236.97±28.75 20.619 0.001 TLR4 14.19±1.37 10.15±1.12 22.405 0.001 CTCs陽性率67(67.00)14(14.89)54.094 0.001
2.2 不同骨轉(zhuǎn)移病灶者的VEGF、TLR4 水平和CTCs 陽性率比較骨轉(zhuǎn)移灶數(shù)目≥3 處組患者的VEGF、TLR4、CTCs 陽性率高于骨轉(zhuǎn)移灶數(shù)目<3 處,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表2。
表2 不同骨轉(zhuǎn)移病灶者的VEGF、TLR4 水平和CTCs 陽性率比較[±s,例(%)]
表2 不同骨轉(zhuǎn)移病灶者的VEGF、TLR4 水平和CTCs 陽性率比較[±s,例(%)]
組別骨轉(zhuǎn)移灶數(shù)目≥3處骨轉(zhuǎn)移灶數(shù)目<3處t/χ2值P值例數(shù)68 32 VEGF (pg/mL)355.09±43.29 313.72±35.13 4.720 0.001 TLR4 15.03±1.48 12.41±1.14 8.847 0.001 CTCs陽性率56 (82.35)11 (34.38)22.654 0.001
2.3 不同骨轉(zhuǎn)移療效者的VEGF、TLR4 水平和CTCs陽性率比較治療有效組患者的VEGF、TLR4、CTCs 陽性率低于無效組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表3。
表3 不同骨轉(zhuǎn)移療效者的VEGF、TLR4 水平和CTCs 陽性率比較[±s,例(%)]
表3 不同骨轉(zhuǎn)移療效者的VEGF、TLR4 水平和CTCs 陽性率比較[±s,例(%)]
組別無效組有效組t/χ2值P值例數(shù)21 79 VEGF (pg/mL)371.14±44.27 334.06±39.73 3.711 0.001 TLR4 16.28±1.53 13.63±1.33 7.860 0.001 CTCs陽性率18 (85.71)49 (62.03)4.211 0.040
2.4 骨轉(zhuǎn)移有無骨相關事件發(fā)生者的VEGF、TLR4 水平和CTCs 陽性率比較有骨相關事件發(fā)生組患者的VEGF、TLR4、CTCs陽性率高于無骨相關事件發(fā)生組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表4。
表4 骨轉(zhuǎn)移有無骨相關事件發(fā)生者的VEGF、TLR4 水平和CTCs 陽性率比較[±s,例(%)]
表4 骨轉(zhuǎn)移有無骨相關事件發(fā)生者的VEGF、TLR4 水平和CTCs 陽性率比較[±s,例(%)]
組別有骨相關事件發(fā)生組無骨相關事件發(fā)生組t/χ2值P值例數(shù)39 61 VEGF (pg/mL)363.03±42.26 328.31±39.67 4.162 0.001 TLR4 15.79±1.41 13.17±1.34 9.344 0.001 CTCs陽性率31 (79.49)36 (59.02)4.509 0.034
肺癌、乳腺癌及前列腺癌為臨床常見的惡性腫瘤,此類腫瘤骨轉(zhuǎn)移的風險較高,骨轉(zhuǎn)移不僅影響原發(fā)疾病的治療,且骨質(zhì)破壞所致的病理性骨折、疼痛等也大大降低了患者生活質(zhì)量。但部分骨轉(zhuǎn)移患者早期缺乏相關癥狀,盡早診治對患者生存質(zhì)量改善有重要作用。盡管正電子發(fā)射計算機斷層掃描、磁共振成像對骨轉(zhuǎn)移檢測的特異度及靈敏度高,但其費用高昂,且有一定放射性損傷[8]。近年來有研究發(fā)現(xiàn),實驗室指標對惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移有較高的預測價值[9]。
腫瘤血管生成在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展中有重要作用,VEGF為血管調(diào)控因子,其可促進血管內(nèi)皮細胞發(fā)生有絲分裂,參與腫瘤血管生成,增加血管通透性。臨床研究證實,VEGF 過表達能夠增加實體腫瘤的瘤負荷,增強侵襲、轉(zhuǎn)移能力[10]。既往研究也表明,隨著惡性腫瘤患者病理分級及臨床分期的增加,其VEGF水平相應上升[11]?,F(xiàn)有研究指出,VEGF和骨組織的生長有一定關系,可通過旁分泌、自分泌形式,調(diào)控細胞增殖、遷移、分化等反應,參與骨發(fā)育、修復和癌癥骨轉(zhuǎn)移[12]。本研究結(jié)果顯示,有骨轉(zhuǎn)移組VEGF水平顯著高于無骨轉(zhuǎn)移組,提示VEGF水平和惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移有一定關系。分析原因可能為VEGF高表達能夠參與病灶微血管形成,增強腫瘤細胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力,促進腫瘤病灶的遠處播散,從而導致骨轉(zhuǎn)移的發(fā)生。同時本研究發(fā)現(xiàn),骨轉(zhuǎn)移數(shù)目>3處患者VEGF水平相對較高,治療后有效者VEGF水平明顯低于無效者,提示通過測定VEGF水平能夠一定程度的反映療效。隨訪研究發(fā)現(xiàn),發(fā)生骨相關事件者VEGF水平明顯高于未發(fā)生骨相關事件者,進一步表明,VEGF對患者預后有一定預測作用。
一項研究證明,炎癥反應能夠參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展[13],TLR4 是炎癥反應中的重要因子,其可在多種惡性腫瘤中高表達,和腫瘤增殖、侵襲等惡性生物學行為有關聯(lián)。TLR4可誘導血管生成因子抗凋亡蛋白的生成,促進腫瘤細胞生存,并引起免疫抑制,提高腫瘤細胞的侵襲能力。臨床研究指出,TLR4 是惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移的危險因素,TLR4 水平較高者更易發(fā)生骨轉(zhuǎn)移[14]。本研究觀察顯示,骨轉(zhuǎn)移患者TLR4 水平相對較高,隨著骨轉(zhuǎn)移灶數(shù)目的增加,患者TLR4水平相應上升,表明TLR4 水平和惡性腫瘤患者骨轉(zhuǎn)移有一定關系。經(jīng)治療發(fā)現(xiàn),骨轉(zhuǎn)移治療有效者TLR4 水平較低,且未發(fā)生骨相關事件者TLR4 水平更低,提示TLR4水平和骨轉(zhuǎn)移患者療效和預后有一定關系。
CTCs 是由腫瘤脫落進入機體外周血的細胞,CTCs為惡性腫瘤擴散的主要表現(xiàn)形式。CTCs和原發(fā)腫瘤細胞的遺傳特性或抗原相似,但其獲取方式較為簡便,且創(chuàng)傷更小,可重復性高。有關研究顯示,CTCs具有侵襲性高、惡性程度高,可逃避機體的免疫監(jiān)視等特點。血液中檢出CTCs為實體瘤發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移的必需條件,CTCs 可降低細胞粘附力,減少上皮表達,導致細胞結(jié)構(gòu)改變,增加間質(zhì)表達,誘導腫瘤細胞遷移及浸潤,從而參與惡性腫瘤轉(zhuǎn)移灶的形成[16]。張孝欽等[17]研究報道,CTCs可反映惡性腫瘤患者腫瘤轉(zhuǎn)移和病情改變特征,對惡性腫瘤的療效和復發(fā)預測均有重要作用,可為疾病的診療提供參考依據(jù)。結(jié)合以上報道,提示CTCs 在惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移中有一定作用。本研究中,發(fā)生骨轉(zhuǎn)移組CTCs陽性率相對較高,且骨轉(zhuǎn)移灶數(shù)目>3者CTCs陽性率更高,提示CTCs對惡性腫瘤的骨轉(zhuǎn)移有一定預測價值。另外本研究中,骨轉(zhuǎn)移治療有效者CTCs 陽性率更低,且未發(fā)生骨相關事件者CTCs陽性率也相對較低,說明CTCs能夠一定程度的反映骨轉(zhuǎn)移患者效果和轉(zhuǎn)歸情況。
TLR4能夠促進VEGF的分泌,增強腫瘤細胞的侵襲能力。BANYS-PALUCHOWSKI 等[18]研究報道,VEGF的表達下調(diào)能夠抑制惡性腫瘤轉(zhuǎn)移,減少CTCs計數(shù)。以上研究間接表明VEGF、TLR4 及CTCs 之間可能有一定相關性,但本研究尚未進一步分析三者之間的關系,有待后續(xù)研究循證。
綜上所述,血管調(diào)控因子VEGF、TLR4及CTCs的檢測有利于肺癌、乳腺癌及前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者病情、療效和預后的判斷。