趙 毅，王 瀅，趙君楠

(中鹽工程技術(shù)研究有限公司，天津 300450)

1 前言

農(nóng)藥殘留長(zhǎng)期被列為食品安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)的重要對(duì)象，是環(huán)境中常見的污染物，它化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難降解，且易在自然環(huán)境中富集與遷移，可直接或間接的通過(guò)食物鏈被人體吸收，如果吸收量大于每日允許攝入量(ADI)，就會(huì)產(chǎn)生毒性反應(yīng)，嚴(yán)重危害人體健康[1-2]。食用鹽作為重要的調(diào)味品，要警惕生產(chǎn)過(guò)程中受農(nóng)藥污染的可能性，日本對(duì)食用鹽中農(nóng)藥殘留量已監(jiān)測(cè)多年，因此，國(guó)內(nèi)建立食用鹽中多組分農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法具有必要性。

目前，農(nóng)藥殘留主要檢測(cè)技術(shù)有高效液相色譜法(HPLC)、超高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法[3-5]、氣相色譜法(GC)[6]、氣相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法[7-8]等，氣相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法和高效液相—串聯(lián)質(zhì)譜法都具有靈敏度高、選擇性好的優(yōu)勢(shì)，已成為農(nóng)藥殘留定性定量分析主要技術(shù)手段。食品中農(nóng)藥殘留的前處理方法主要有固相微萃取法(SPME)、固相萃取法(SPE)、加速溶劑萃取法(ASE)、QuEChERS法、基質(zhì)固相分散萃取法(MSPD[9-13])等。QuEChERS法是于2003年美國(guó)農(nóng)業(yè)部的Anastassiades等[14]首次提出的方法，該方法分為提取和凈化兩步驟，利用吸附劑與基質(zhì)中各成分的吸附作用，達(dá)到凈化樣品的目的。該方法成本低，操作簡(jiǎn)便，萃取時(shí)間短，提取效果好，已被GB 23200.113-2018《植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定—?dú)庀嗌V—質(zhì)譜聯(lián)用法》[15]采用，廣泛用于水果、蔬菜中的農(nóng)殘檢測(cè)[16-17]，但將QuEChERS前處理方法與GC-MS檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合用于檢測(cè)食鹽中農(nóng)藥殘留的研究較少[18]。因此，文章以食用鹽為研究對(duì)象，采用QuEChERS前處理方法，應(yīng)用氣相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜(gas chromatography-tandem mass spectrometry，GC-MS)檢測(cè)技術(shù)，建立食用鹽中51種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、高效、重現(xiàn)性好，可用于食用鹽中多組分農(nóng)藥殘留的日常檢測(cè)。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 儀器與試劑

7890B—5977B氣相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)安捷倫公司)；NV24A-Ⅱ氮吹儀(天津博納艾杰爾科技有限公司)；VELOCITY14低速離心機(jī)(澳大利亞Dynamica公司)；漩渦混合器(Kylin-bell其林貝爾公司)；VORTEX渦旋混勻器；Eppendorf可調(diào)移液槍；萬(wàn)分之一電子天平(METTLER AE200)；0.22 μm有機(jī)濾膜(天津博納艾杰爾科技有限公司)。

51種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品分三組混標(biāo)：濃度100 μg/mL(純度≥95%，DIKMA)；乙腈、乙酸乙酯(農(nóng)殘級(jí)，DIKMA)；實(shí)驗(yàn)用水為Milli-Q超純水。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)混合溶液的配置

混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。分別精密量取100 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)品10 μL于100 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容，搖勻，配制成10 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

混合標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液。精密量取10μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液逐級(jí)稀釋，用乙酸乙酯稀釋定容，得到濃度為0.001 μg/mL、0.002 μg/mL、0.005 μg/mL、0.010 μg/mL、0.020 μg/mL、0.040 μg/mL、0.050 μg/mL、0.080 μg/mL、0.100 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

2.3 分析條件

2.3.1 色譜工作條件

(1)色譜柱。DB-17MS(30 m×0.25 mm×0.25 μm)；

(2)色譜柱溫度。初始溫度60 ℃，保持1 min，以每分鐘40 ℃的速率升溫至120 ℃，再以3 ℃/min的速率升溫至240 ℃，然后以8 ℃/min的速率升溫至300 ℃，保持10 min；

(3)載氣。氦氣，純度≥99.999%，流速0.9 mL/min；

(4)進(jìn)樣口溫度250 ℃；

(5)進(jìn)樣量1 μL；

(6)進(jìn)樣方式。脈沖不分流進(jìn)樣。

2.3.2 質(zhì)譜工作條件

(1)電子轟擊源(EI)，70 eV；

(2)離子源溫度，230 ℃；

(3)質(zhì)譜傳輸接口溫度，280 ℃；

(4)掃描方式，SIM；

(5)溶劑延遲時(shí)間，5 min。

51種農(nóng)藥化合物名稱、保留時(shí)間、監(jiān)測(cè)離子結(jié)果見表1。

表1 51種農(nóng)藥殘留的CAS號(hào)、保留時(shí)間與質(zhì)譜參數(shù)Tab.1 CAS ,Retention times and MS parameters of 51 pesticides

續(xù)表1 (Continue)

2.4 樣品前處理

稱取食用鹽試樣2 g(精確至0.01 g)于10 mL離心管中，加入2 mL乙腈提取，劇烈震蕩1 min后離心(4 000 r/min)5 min。吸取上清液1 mL到2 mL的離心管中，40 ℃氮?dú)獯抵两?。加? mL乙酸乙酯復(fù)溶，過(guò)0.22 μm微孔濾膜(有機(jī)相)，取續(xù)濾液注入進(jìn)樣瓶中，用于測(cè)定。

3 結(jié)果與分析

3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線、檢出限與定量下限

51種農(nóng)殘混標(biāo)分為A、B、C三組，為消除基質(zhì)效應(yīng)，采用基質(zhì)加標(biāo)法確定標(biāo)準(zhǔn)曲線。準(zhǔn)確稱取空白食用鹽樣品2 g于10 mL離心管中，加入混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，配置成濃度為0.001 μg/mL、0.002 μg/mL、0.005 μg/mL、0.010 μg/mL、0.020 μg/mL、0.040 μg/mL、0.060 μg/mL、0.080 μg/mL、0.100 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)曲線。以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。采用信噪比法，通過(guò)不同濃度的試樣測(cè)定響應(yīng)信號(hào)后，以3倍信噪比(S/N)≥3對(duì)應(yīng)的濃度確定檢出限(LOD)，以S/N ≥10計(jì)算定量下限(LOQ)。結(jié)果顯示，51種農(nóng)殘化合物在0.001 μg/mL～0.100 μg/mL的線性范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)(R2)≥0.995，檢出限(LOD)為(0.005 mg/mL～0.060 mg/mL，定量下限(LOQ)為0.010 mg/mL～0.100 mg/mL(見表2)。

表2 51種農(nóng)藥殘留的線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限、定量限、加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差Tab.2 Line equations, correlation coefficients(R2), LODs, LOQs, spiked recoveries and RSDs of the 51 pesticides

3.2 回收率與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

以空白食用鹽樣品為基質(zhì)，添加低、中、高三個(gè)濃度水平的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度分別為0.025 μg/mL、0.050 μg/mL、0.100 μg/mL，每個(gè)加標(biāo)水平做6份平行樣，以測(cè)得值減去空白值的差值與理論添加量的比值計(jì)算回收率；以RSD表示方法重現(xiàn)性。結(jié)果表明，三個(gè)濃度水平的回收率均在70%～120%之間，RSD為0.5%～5.5%，表明該方法準(zhǔn)確性高，重現(xiàn)性好，滿足分析要求。

續(xù)表2 (Continue)

3.3 實(shí)際樣品含量測(cè)定

取20個(gè)不同廠家的食用鹽樣品依照文章分析方法檢測(cè)51種農(nóng)藥殘留，結(jié)果顯示均未檢出。

4 結(jié)論

文章應(yīng)用氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀(gas chromatography-tandem mass spectrometry，GC-MS)檢測(cè)技術(shù)，建立了食用鹽中51種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法。該檢測(cè)方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、高效、重現(xiàn)性好，可用于食用鹽中多農(nóng)藥殘留的日常檢測(cè)。