■張 泰 高 暢 耿 凱 耿春銀 張 敏 金英海* 房家琛

（1.延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院，吉林延吉 133000；2.弘前大學(xué)農(nóng)學(xué)生命科學(xué)部，日本弘前036-8560）

在現(xiàn)代集約化養(yǎng)殖中，為優(yōu)化整個豬群的生產(chǎn)，通常使仔豬在出生后15～28 d 之內(nèi)進行早期斷奶。然而，斷奶這一做法會引起仔豬胃腸道結(jié)構(gòu)和功能的改變。仔豬斷奶時會因飼料組成和外界環(huán)境的突然變化等而產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，這些應(yīng)激源會引起仔豬消化功能的紊亂，從而導(dǎo)致仔豬的采食量及對營養(yǎng)消化吸收的能力降低，且仔豬斷奶時易受到革蘭氏陰性菌的感染，增加仔豬腹瀉等疾病的發(fā)生率[1-2]。為了有效緩解仔豬腹瀉等問題，飼料抗生素生長促進劑被應(yīng)用于仔豬日糧中以抑制仔豬腸道病原菌生長，從而使仔豬正常發(fā)育并增加其育成率。但是，由于抗生素耐藥性和食物鏈污染等潛在問題威脅到人類健康，在許多國家已經(jīng)禁止或限制了抗生素的使用。益生菌微生物與腸道菌群相互作用影響腸胃功能。通過防止腸內(nèi)病原體進入腸內(nèi)，增加消化能力，降低pH 或改善黏膜免疫力來調(diào)節(jié)腸內(nèi)免疫系統(tǒng)[3]。研究表明，多菌種聯(lián)合使用的作用效果，遠比單一菌種發(fā)酵效果好。復(fù)合菌種發(fā)酵時可以利用各菌種間的協(xié)同共生作用，完成發(fā)酵過程中更為復(fù)雜的轉(zhuǎn)化過程，從而產(chǎn)生更多有益的代謝產(chǎn)物，起到增強畜牧生產(chǎn)力的效果[4]。中草藥是最容易被動物體接納的純天然物質(zhì)，能從多角度調(diào)動機體自身的抗病及適應(yīng)能力，達到防治疾病、恢復(fù)健康的目的[5]。中草藥中的有效成分多糖、生物堿、苦味素等具有抗菌、抗病毒作用，可用于替代抗生素降低動物腹瀉率[6]。益生菌和中草藥二者協(xié)同作用，發(fā)揮更高水平的作用效果。研究表明，將益生菌與中草藥配伍使用益生菌能夠增強中草藥活性成分，同時中草藥提升了益生菌的益生性，二者協(xié)同作用，改善腸道菌群結(jié)構(gòu)，抑制有害菌群的生長繁殖[7]。本試驗通過研究多菌種與中草藥聯(lián)合使用對斷奶仔豬生長性能、腹瀉率、生長激素水平的影響，為三菌中藥合劑在斷奶仔豬在實際生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗材料

試驗材料有三菌培養(yǎng)物（乳酸菌、酵母菌和枯草芽孢桿菌比例為1∶1∶1，延邊大學(xué)營養(yǎng)試驗室自制，35 ℃發(fā)酵48 h 進行制備，所使用的培養(yǎng)基為PDA 培養(yǎng)基、MRS 瓊脂培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和混合發(fā)酵培養(yǎng)基）、中藥制劑（由神曲、石榴皮、白術(shù)、甘草及茯苓、紅棗、麥芽、山楂按一定比例混合而成，毫州市眾益堂中藥材銷售有限公司提供），將上述成分過40目篩后，按一定比例混合制成三菌中藥合劑，飼料添加劑隨配隨用。

1.2 試驗設(shè)計及飼養(yǎng)管理

試驗隨機選擇體況良好、遺傳性狀相同、體重為（8.47±0.02）kg、35 日齡（杜×長×大）三元雜交斷奶仔豬80 頭，并按照完全隨機的方式將仔豬分為4 個組，每組4個重復(fù)，每個重復(fù)5頭豬，且保證每組仔豬公母比例一致。對照組仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧，三菌組仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧+0.5%三菌培養(yǎng)物，中藥組仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧+0.5%中藥制劑，三菌中藥組仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧+0.5%三菌中藥合劑（其中三菌培養(yǎng)物與中藥制劑比例為1∶1）。預(yù)試期5 d，正試期42 d。試驗場地在圖們市富巖養(yǎng)殖專業(yè)合作社。試驗開始前，對豬舍進行全面的清洗消毒。

1.3 試驗動物基礎(chǔ)日糧組成

根據(jù)養(yǎng)殖場的飼養(yǎng)管理方法，分別在斷奶后15、28、42 d時對仔豬進行階段性換料。各組仔豬日糧均為粉狀，具體組成及營養(yǎng)水平見表1和表2。

表1 仔豬各階段基礎(chǔ)日糧組成（風(fēng)干樣品，%）

表2 各階段基礎(chǔ)日糧營養(yǎng)水平（風(fēng)干樣品）

1.4 樣品采集

1.4.1 飼料樣品采集

在各組仔豬階段性換料前1 d，用四分法采集適量的飼料樣品，在65 ℃干燥箱中烘至恒重，制成風(fēng)干樣品后將其粉碎過40 目篩，而后裝入密封袋內(nèi)放入冰箱保存。

1.4.2 糞樣采集

養(yǎng)分表觀消化率測定：在階段換料前3 d，每天每組從各重復(fù)中隨機收集糞樣200 g，其中取50 g 混入適量的10%硫酸溶液混合均勻用于測定糞中粗蛋白含量，放在-20 ℃冰箱內(nèi)保存。試驗結(jié)束后，將各重復(fù)收集到的糞樣充分混勻，在65 ℃烘干箱中烘至恒重，制成風(fēng)干樣品后將其粉碎過40目篩，而后裝入密封袋內(nèi)放入冰箱保存。

1.4.3 血樣采集

全期試驗結(jié)束后，各組隨機選取4 頭仔豬（每個重復(fù)選擇1 頭接近平均體重的豬），在晨飼前用采血器對其進行頸下采血，血液在常溫下靜置15 min 后，3 000 r/min 離心15 min，將獲得的血清儲存在-80 ℃冰箱中備用。

1.5 指標(biāo)測定

1.5.1 生長性能指標(biāo)測定

在階段性換料的前1 d（即第1 d、第14 d、第28 d、第42 d）對斷奶仔豬逐頭進行空腹稱重，并記錄好耳標(biāo)號與體重；以重復(fù)為單位，每天早6：00 對仔豬進行飼喂，并根據(jù)前后兩天耗料量來計算各組仔豬日采食量。試驗開始前和結(jié)束后記錄初重（IW）和末重（FW）試驗結(jié)束后根據(jù)所得數(shù)據(jù)計算各組仔豬平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.5.2 養(yǎng)分表觀消化率的測定

本試驗運用內(nèi)源指示劑法以測定飼料與糞便中的養(yǎng)分含量，其中所用的內(nèi)源指示劑為鹽酸不溶灰分（AIA），所測指標(biāo)包括干物質(zhì)（DM）、粗蛋白（CP）、粗灰分（Ash）、粗脂肪（EE）、粗纖維（CF）。所得數(shù)據(jù)根據(jù)下述公式以計算各養(yǎng)分表觀消化率的含量：

某養(yǎng)分表觀消化率（%）=100-100×（飼料中AIA含量/糞中AIA 含量）×（糞中該養(yǎng)分含量/飼料中該養(yǎng)分含量）

1.5.3 腹瀉率指標(biāo)測定

每天早8：00觀察并記錄各組仔豬腹瀉情況。試驗結(jié)束后根據(jù)所得數(shù)據(jù)計算各組仔豬腹瀉率（DR）。

1.5.4 血清生長類激素指標(biāo)測定

測定生長激素（GH）、生長抑制素（SS）、三碘甲狀腺原氨酸（T3）、甲狀腺素（T4）、胰島素樣生長因子-1（IGF-1）的濃度。上述指標(biāo)測定所需試劑盒及檢測結(jié)果均來自北京華英生物技術(shù)研究所。

1.6 統(tǒng)計方法

試驗數(shù)據(jù)用Excel軟件整理，并用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行ANOVA分析，LSD法進行多重比較，結(jié)果表示為“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”，P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 對斷奶仔豬生長性能的影響（見表3）

表3 各組對斷奶仔豬生長性能的影響

通過表3 數(shù)據(jù)比對可知，在試驗各個階段，各試驗組均能不同程度地提高斷奶仔豬的生長性能。與對照組相比，三菌組和中藥組仔豬的末重均顯著提高（P<0.05），而三菌中藥組仔豬的末重極顯著提高（P<0.01）。在試驗第一階段，與對照組相比，三菌組和三菌中藥組ADG 顯著提高（P<0.05），各試驗組ADFI、F/G 均極顯著提高（P<0.01）。在試驗第二階段，與對照組相比，三菌中藥組ADG、ADFI、F/G 差異顯著（P<0.05）。在試驗第三階段，與對照組相比，三菌中藥組ADG顯著提高（P<0.05），中藥組、三菌中藥組ADFI顯著提高（P<0.05），各試驗組F/G 均有所降低但差異不顯著（P>0.05）。在全期試驗中，與對照組相比，各試驗組ADG 顯著或極顯著提高（P<0.05、P<0.01），各試驗組ADFI均極顯著提高（P<0.01），三菌中藥組F/G顯著降低（P<0.05）。

2.2 對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響（見表4）

通過表4數(shù)據(jù)比對可知，在試驗各個階段，各試驗組均能在不同程度上促進斷奶仔豬對DM、CP、EE、CF、Ash的消化吸收。在試驗第一階段，三菌組、中藥組DM均顯著高于對照組（P<0.05）；在試驗第二階段，三菌中藥組DM 顯著高于對照組（P<0.05）；在試驗第三階段，各試驗組DM 均極顯著高于對照組（P<0.01）。在各不同試驗階段，各試驗組CP 均極顯著高于對照組（P<0.01）。在前兩個試驗階段，與對照組相比，三菌中藥組EE 差異顯著或極顯著提高（P<0.05、P<0.01）；在試驗第三階段，與對照組相比，各試驗組EE均差異顯著或極顯著提高（P<0.05、P<0.01）。在試驗第一、第三兩個階段，三菌中藥組Ash 均顯著高于對照組（P<0.05）。在試驗第一階段，中藥組、三菌中藥組CF 均顯著或極顯著高于對照組（P<0.05；P<0.01）；在試驗第二階段，中藥組、三菌中藥組CF 極顯著高于對照組（P<0.01）；在試驗第三階段，與對照組相比，中藥組、三菌中藥組CF均有明顯增長（P<0.05、P<0.01）。

表4 各組對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響（%）

2.3 對斷奶仔豬腹瀉率的影響（見表5）

通過表5 數(shù)據(jù)比對可知，在各試驗階段，各試驗組均能在不同程度上有效地改善斷奶仔豬腹瀉。在試驗第一階段，各試驗組DR 均極顯著低于對照組（P<0.01）。在試驗第二階段，與對照組相比，中藥組、三菌中藥組DR極顯著降低（P<0.01），三菌組DR顯著降低（P<0.05）。在試驗第三階段，各試驗組DR 均低于對照組，但均無顯著差異（P>0.05）。

表5 各組對斷奶仔豬腹瀉率（DR）的影響（%）

2.4 對斷奶仔豬血清生長類激素濃度的影響（見表6）

通過表6 數(shù)據(jù)比對可知，各試驗組均有在不同水平上增強斷奶仔豬的生長發(fā)育的功效。三菌中藥組GH 含量極顯著高于對照組（P<0.01），并顯著高于三菌組（P<0.05），中藥組GH 含量顯著高于對照組（P<0.05），其他各組間無顯著差異。三菌中藥組仔豬血清中T3含量顯著高于對照組（P<0.05）。各試驗組T4含量均極顯著高于對照組（P<0.01），各試驗組間相比，中藥組、三菌中藥組兩組的T4含量與三菌組相比差異極顯著提高（P<0.01），三菌中藥組T4含量較中藥組有所提高（P<0.05）。各試驗組SS 含量均極顯著低于對照組（P<0.01），各試驗組間相比，三菌中藥組SS 含量較三菌組有所降低（P<0.05）。

表6 各組對斷奶仔豬血清生長類激素濃度的影響

3 討論

仔豬斷奶時，容易受到飼養(yǎng)環(huán)境、條件改變帶來應(yīng)激反應(yīng)，產(chǎn)生腹瀉。通常斷奶仔豬腹瀉是由大腸桿菌感染和日糧更改所致, 易引起仔豬分泌功能改變、腸道受損和腸道微生物區(qū)系紊亂[8]，不利于營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。益生菌培養(yǎng)物及部分中藥中具有能夠改善動物機體胃腸道微生態(tài)環(huán)境及胃腸道結(jié)構(gòu)的有效成分，能夠?qū)C體的生理活動進行有益的調(diào)控，促進機體的正常生長。

研究表明微生態(tài)制劑[9]和中草藥飼料添加劑[8]對提高動物生長性能，降低腹瀉率作用效果顯著。Giang 等[10]在仔豬日糧中分別添加不同的復(fù)合菌制劑，結(jié)果顯示復(fù)合菌制劑均能提高仔豬的日增重及日采食量，促進仔豬生長。楊東吉等[11]研究表明，酵母培養(yǎng)物能增強仔豬的生長性能和養(yǎng)分消化率，從而起到促進生長的作用。Zhao等[12]研究發(fā)現(xiàn)，動物日糧中添加復(fù)合乳酸菌制劑，能夠有效降低仔豬腹瀉率。Lee 等[13]研究發(fā)現(xiàn)，仔豬補飼枯草芽孢桿菌LS1-2 能明顯增強其ADG、ADFI和飼料轉(zhuǎn)化率，增強仔豬的生長性能。酵母菌發(fā)酵后產(chǎn)生的氨基酸、多肽、酯類、醇類等，它們可以通過提高飼料的適口性，從而刺激畜禽的食欲，增加機體的采食量[14]?？莶菅挎邨U菌在到達腸道后，能快速生長繁殖，消耗大量O2，創(chuàng)造厭氧環(huán)境，同時在生長繁殖的過程中生成有機酸（乳酸、乙酸等）、氧化氫和細菌素等抗菌物質(zhì)，降低pH，抑制了大腸桿菌等致病菌有的生長繁殖，且促進了乳酸菌等厭氧菌的增殖[15-16]。乳酸菌增殖產(chǎn)生大量乳酸，降低pH值，調(diào)節(jié)胃腸道菌群平衡，降低動物腹瀉率。通過乳酸菌和枯草桿菌協(xié)同作用，成發(fā)酵過程中更為復(fù)雜的轉(zhuǎn)化過程，產(chǎn)生更好效果。

中草藥中有機酸、生物堿等部分有效成分能通過機體的非特異性免疫系統(tǒng)抑制機體胃腸道內(nèi)的病原微生物的增殖，從而起到抗菌的作用[17-19]。據(jù)報道，神曲、茯苓、山楂、甘草、麥芽等中草藥均具有補氣健脾的功效，能夠刺激機體的食欲，增強機體對養(yǎng)分的消化吸收[20]。

神曲具有健脾消食，促進消化的功效。山楂中含有的有機酸可提高蛋白酶活性，增加胃中消化酶分泌，促進胃腸消化。山楂中的有機酸明顯增強飼料適口性，提高斷奶動物采食量和日增重，降低腹瀉率[21]。麥芽中含有的淀粉酶也對胃酸和胃蛋白酶的分泌具有促進作用，增強對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力。研究發(fā)現(xiàn),日糧中添加植物多糖能不同程度地提高斷奶仔豬的生產(chǎn)性能[22]，提高免疫力。石榴皮、白術(shù)、茯苓、紅棗中均含有多糖物質(zhì)。多糖代謝主要在腸胃中進行，可對胃腸道菌群起調(diào)節(jié)作用。紅棗多糖可作為免疫促進劑，增強淋巴細胞增殖能力，增強機體免疫力，和白術(shù)合用可增進食欲。白術(shù)富含豐富的內(nèi)酯類、氨基酸類和白術(shù)多糖，具有補脾益胃功效，可用于治療脾胃氣虛和腹瀉。白術(shù)內(nèi)酯I 具有較強的促進腸管吸收、調(diào)節(jié)腸管功能等生物活性作用[23]；白術(shù)內(nèi)富含有的氨基酸類物質(zhì)可為生物體提供一部分營養(yǎng)，在生長過程中起到一定作用。白術(shù)煎劑通過膽堿介導(dǎo)，促進胃腸道蠕動[24]，增強腸道的消化吸收能力。Li 等[27]研究發(fā)現(xiàn)日糧中補充白術(shù)多糖能提高仔豬的飼料轉(zhuǎn)化率，從而改善仔豬生長性能，還能降低其腹瀉情況。研究表明，日糧中添加白術(shù)、茯苓、甘草等中藥制劑能有效改善仔豬的胃腸道健康，抑制腹瀉的發(fā)生率[26]。茯苓和甘草中含有的三萜類物質(zhì)可通過提高機體免疫力，調(diào)節(jié)胃腸道菌群，進而起到降低腹瀉率的作用。同時，甘草中含有三萜皂苷和甘草酸使甘草具有甜味，能夠作為甜味劑，提供動物采食量。石榴皮有明顯的抑菌和收斂功效，使腸黏膜收斂，對大腸桿菌也有較好的抑制作用，有效治療腹瀉。為更好體現(xiàn)試驗效果，試驗選用的中草藥為超微粉，進一步降低因中草藥中纖維的帶入影響試驗結(jié)果。試驗中腹瀉率數(shù)值偏高主要體現(xiàn)在第一階段，主要是由于前期應(yīng)激，對斷奶仔豬換料、換舍等外界環(huán)境的改變，使斷奶仔豬產(chǎn)生應(yīng)激，造成腹瀉率偏高。本試驗中經(jīng)乳酸菌、酵母菌及枯草芽孢桿菌復(fù)合發(fā)酵后的米糠中粗蛋白含量提高了11%，多菌種復(fù)合發(fā)酵，在發(fā)酵過程中協(xié)同作用，并利用其生物學(xué)特性提高了米糠的利用價值，提供更高水平的蛋白質(zhì)營養(yǎng)。

本試驗中三菌中藥合劑組促進斷奶仔豬生長發(fā)育，降低腹瀉率效果更佳。三菌培養(yǎng)物、中藥制劑及三菌中藥合劑這三種飼料添加劑均能在不同程度上提高仔豬的ADG、ADFI 和飼料利用率，降低腹瀉率，促進機體生長發(fā)育，其中三菌中藥組效果最佳?？赡苁怯捎谌囵B(yǎng)物和中草藥的協(xié)同作用有關(guān)，飼料添加劑中含有大量健胃消食、提高適口性的中草藥，同時通過益生菌改善胃腸道菌群狀態(tài)，改善了對養(yǎng)分的消化吸收情況，提高了飼料利用率。

影響動物生長發(fā)育除上述因素外，還有一些機體內(nèi)存在的生長激素，也對機體生長發(fā)育起到?jīng)Q定性作用。GH 與受體結(jié)合后誘導(dǎo)肝細胞生成IGF-1，在IGF-1的介導(dǎo)下對機體發(fā)揮促生長的作用[27]，GH的分泌和釋放情況還會受到SS的調(diào)控。T3、T4是由甲狀腺分泌的，能調(diào)控機體蛋白質(zhì)、脂肪及糖類的代謝能力，而且它們還能加強GH和IGF-1的效用。湯志宏等[28]研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)合益生菌和酵母培養(yǎng)物能明顯增加熱應(yīng)激奶牛血液中T3濃度。通過調(diào)控T3等激素濃度，進一步調(diào)節(jié)動物體生長發(fā)育。研究發(fā)現(xiàn)中藥制劑能明顯增加仔豬血清中GH、T3、T4的濃度[22，29]。結(jié)果表明三種飼料添加劑均能通過調(diào)節(jié)機體內(nèi)激素水平改善生長性能，促進機體生長，其中以三菌中藥合劑作用效果最佳。

4 結(jié)論

綜上所述，三菌培養(yǎng)物、中藥制劑及三菌中藥合劑均能在不同程度上提高仔豬的生長性能和養(yǎng)分表觀消化率，降低腹瀉率。還能通過調(diào)控仔豬血清相關(guān)指標(biāo)參數(shù)，促進仔豬生長。且通過綜合分析比較發(fā)現(xiàn)，三菌中藥合劑的飼喂效果最佳。