吳逝寒

吉林省柳河縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，吉林柳河 135300

近年來，禽流感在全世界各地都有發(fā)生，對(duì)家禽養(yǎng)殖業(yè)帶來了不可估量的巨大損失，同時(shí)也給人們生活帶來了嚴(yán)重危害。目前我國家禽生產(chǎn)形式、生產(chǎn)規(guī)模都發(fā)生了極為顯著地變化，規(guī)?；a(chǎn)是今后家禽生產(chǎn)和存在的一個(gè)主要形式。但是，隨著集約化、規(guī)模化生產(chǎn)不斷升級(jí)，家禽疫病已經(jīng)成為家禽生產(chǎn)的重要制約因素，禽流感（AI）的不斷發(fā)生，依然是家禽生產(chǎn)的頭號(hào)威脅，直接影響著家禽存欄、禽產(chǎn)品行情及養(yǎng)殖者的積極性。如今，我國已經(jīng)研制生產(chǎn)針對(duì)主要流行株亞型的禽流感油乳劑滅活疫苗，2004年開始，已在全國所有省份強(qiáng)制推行使用，取得了非常好的免疫保護(hù)效果，證明了禽流感油乳劑滅活疫苗能有效地預(yù)防同亞型禽流感發(fā)生。本研究通過禽流感抗體監(jiān)測(cè)技術(shù)測(cè)定柳河地區(qū)不同雞群不同日齡的商品蛋雞產(chǎn)蛋期的N7N9-Re3株禽流感免疫抗體滴度，并對(duì)其進(jìn)行規(guī)律研究分析，進(jìn)而制定較為科學(xué)合理且適合本地區(qū)的禽流感免疫程序。

1 采樣

1.1 樣品

在全縣商品代雞場(chǎng)共31個(gè)雞群進(jìn)行采樣。樣品來自安口鎮(zhèn)、柳河鎮(zhèn)、圣水鎮(zhèn)、亨通鎮(zhèn)、孤山子鎮(zhèn)，對(duì)監(jiān)測(cè)點(diǎn)雞群從120日齡開始，每30 d采樣一次，每個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)按養(yǎng)殖總數(shù)的1%進(jìn)行隨機(jī)采樣，每場(chǎng)不能少于10份，共采集樣品1 638份，每個(gè)樣品采血量2 mL。記錄采樣日期、雞群的品種、日齡、養(yǎng)殖數(shù)量及禽流感的免疫情況。采血采用翅靜脈采血，分離血清。

表1 樣品采集情況表

1.2 抽樣雞群免疫情況

這些抽樣雞只全部免疫接種過禽流感二價(jià)滅活疫苗（H5N1 Re-11株+Re-12株，H7N9Re-3株），由青島易邦生物工程有限公司或乾元浩生物股份有限公司生產(chǎn)，免疫情況大致分為以下三種情況，見表2。

表2 免疫程序表

2 方法

采用血凝（HA）試驗(yàn)（微量法）和血凝抑制（HI）試驗(yàn)（微量法），測(cè)定抗體效價(jià)。

3 結(jié)果判定

以完全抑制4個(gè)HAU抗原的血清最高稀釋倍數(shù)作為HI滴度。只有陰性對(duì)照孔血清滴度不大于21og2，陽性對(duì)照孔血清誤差不超過1個(gè)滴度，試驗(yàn)結(jié)果才有效。HI價(jià)小于或等于31og2判定HI試驗(yàn)陰性（抗體效價(jià)不合格）；HI價(jià)等于41og2為可疑，需重新進(jìn)行試驗(yàn)（重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果如繼續(xù)為41og2，及判定為陽性）；HI效價(jià)大于或等于51og2為陽性（抗體效價(jià)合格）。

4 監(jiān)測(cè)結(jié)果及分析

將三種不同免疫程序假設(shè)為A、B、C三組，通過實(shí)驗(yàn)室測(cè)定抗體效價(jià)，記錄所有樣品H7N9亞型禽流感免疫抗體效價(jià)值，計(jì)算抗體合格率，合格率情況見圖1。

圖1 H7N9亞型禽流感抗體合格率曲線圖

5 討論

根據(jù)抗體合格率分析可以看到，B組雞群30日齡前只免疫一次禽流感二價(jià)滅活疫苗（H5N1 Re-11株+Re-12株，H7N9Re-3株），開產(chǎn)后抗體幾乎為零，所以說這種免疫程序完全不可取，A組和C組雞群120日齡開產(chǎn)時(shí)H7亞型禽流感抗體合格率都在90%以上，證明A組和C組開產(chǎn)前的H5亞型禽流感免疫合格，能起到很好的免疫效果，但是A組雞群120日齡開產(chǎn)后就沒再免疫過H7亞型禽流感疫苗，所以抗體一直在下降，C組在260日齡免疫了一次禽流感二價(jià)滅活疫苗（H5N1 Re-11株+Re-12株，H7N9Re-3株），所以C組雞群H7亞型禽流感抗體一直維持在較高水平。

推薦適合本地區(qū)商品蛋雞禽流感（H7亞型）的免疫程序?yàn)椋?7日齡頸背部皮下注射0.3 mL禽流感二價(jià)滅活疫苗（H5N1 Re-11株+Re-12株，H7N9Re-3株）；60日齡頸背部皮下注射0.5 mL禽流感二價(jià)滅活疫苗（H5N1 Re-11株+Re-12株，H7N9Re-3株）；120日齡頸背部皮下注射0.5 mL禽流感二價(jià)滅活疫苗（H5N1 Re-11株+Re-12株，H7N9Re-3株）；230日齡之后每隔4個(gè)月免疫禽流感二價(jià)滅活疫苗（H5N1 Re-11株+Re-12株，H7N9Re-3株）。