唐萬(wàn)鵬

（遼陽(yáng)市第二人民醫(yī)院病理科，遼寧 遼陽(yáng) 111000）

乳腺癌是女性常見(jiàn)及多發(fā)的惡性腫瘤，具有較高病發(fā)率，可發(fā)生于任何年齡，嚴(yán)重影響女性身心健康及生活質(zhì)量[1]。據(jù)病理學(xué)研究[2]顯示，乳腺癌可細(xì)分為管腔A型、基底細(xì)胞樣型乳腺癌（BLBC）、正常乳腺型、管腔B 型、HER-2 過(guò)表達(dá)型5 種亞型，而不同亞型治療方案與預(yù)后存在較大差異。BLBC 是乳腺癌的5 種亞型中預(yù)后較差的一種，其病理形態(tài)特征與免疫表型較復(fù)雜，且臨床治療難度較大。分子病理檢測(cè)是目前臨床判斷BLBC 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與預(yù)后的重要檢查手段，可為臨床治療提供有效指導(dǎo)[3]。而明確BLBC 病理形態(tài)特征及免疫表型與分子病理檢測(cè)相關(guān)性對(duì)臨床治療具有重要意義，但現(xiàn)階段相關(guān)報(bào)道較少。基于此，本研究旨在分析BLBC 病理的形態(tài)特征及免疫表型與分子病理檢測(cè)相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性分析本院2016年6月至2019年4月收治的97 例BLBC 患者的臨床資料。年齡27～54 歲，平均年齡（40.35±3.56）歲；體重指數(shù)（BMI）17～26 kg/m2，平均BMI（21.34±1.24）kg/m2；TNM 分期：Ⅰ期37 例，Ⅱ期41 例，Ⅲ期19例；組織學(xué)類(lèi)型：浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌56例，浸潤(rùn)性微乳頭狀癌4例，髓樣癌34例，化生性癌3例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移76例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移21 例。所有患者均對(duì)本研究知情，并自愿簽署知情同意書(shū)。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：均符合《中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)乳腺癌診治指南與規(guī)范（2015版）》[4]中關(guān)于BLBC的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)手術(shù)病理確診；年齡≥18 歲；臨床資料及手術(shù)病理組織完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重心、肝、腎等重要臟器功能不全；凝血功能障礙；合并其他惡性腫瘤；妊娠期或哺乳期女性；合并免疫系統(tǒng)疾病。

1.2 方法 提取所有患者的病理組織，應(yīng)用10%福爾馬林溶液固定，然后進(jìn)行常規(guī)石蠟包埋、切片，并以蘇木精伊紅染色法（HE）染色。①CK5/6、表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）表達(dá)測(cè)定：以免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連結(jié)法（SP）法測(cè)定CK5/6、EGFR 表達(dá)，一抗選用鼠抗人單克隆抗體，抗體及相關(guān)檢測(cè)試劑盒均由福建邁新生物科技有限公司提供，檢測(cè)流程需嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行；CK5/6與EGFR均呈漿染色或胞膜。②EGFR基因擴(kuò)增檢測(cè)：以熒光原位雜交法（FISH）測(cè)定EGFR基因擴(kuò)增情況，檢測(cè)試劑盒由廣州安必平醫(yī)藥科技有限公司提供，檢測(cè)流程嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行；檢測(cè)結(jié)果呈桔紅色為EGFR基因，呈綠色為CEP7基因，若兩者比值＞2∶1，則提示EGFR基因存在擴(kuò)增。

1.3 觀(guān)察指標(biāo) 分析BLBC病理的形態(tài)特征及免疫表型與分子病理檢測(cè)的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 BLBC患者病理組織形態(tài)特征 97例BLBC患者中，核分級(jí)多以Ⅲ級(jí)為主，且四周多伴有淋巴細(xì)胞，多呈地圖樣壞死，具體參數(shù)詳見(jiàn)表1。

表1 BLBC患者病理組織形態(tài)特征分布

2.2 不同形態(tài)特征病理組織EGFR 基因擴(kuò)增情況比較 核分級(jí)Ⅲ級(jí)、四周伴有淋巴細(xì)胞、呈地圖樣壞死病理組織EGFR 基因有擴(kuò)增表達(dá)均高于核分級(jí)Ⅰ～Ⅱ級(jí)、四周無(wú)淋巴細(xì)胞、無(wú)地圖樣壞死病理組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 不同形態(tài)特征病理組織EGFR基因擴(kuò)增情況比較[n（%）]

2.3 BLBC 患者病理組織免疫表型分析 97 例BLBC 患者中，CK5/6 陽(yáng)性表達(dá)81 例，占83.51%（81/97）；EGFR 陽(yáng)性表達(dá)83例，占85.57%（83/97）。

2.4 不同免疫表型病理組織EGFR 基因擴(kuò)增情況比較CK5/6、EGFR陽(yáng)性病理組織基因有擴(kuò)增表達(dá)均高于CK5/6、EGFR陰性病理組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 不同形態(tài)特征病理組織EGFR基因擴(kuò)增情況比較[n（%）]

2.4 病理組織免疫表型與分子檢測(cè)相關(guān)性分析 經(jīng)雙變量Spearman 相關(guān)性檢驗(yàn)分析證實(shí)，CK5/6、EGFR 陽(yáng)性表達(dá)與EGFR 基因有擴(kuò)增均呈正相關(guān)（r=0.526、0.505，P=0.000、0.000）。

3 討論

BLBC 屬于一種特殊類(lèi)型乳腺癌，相較其他類(lèi)型乳腺癌，具有組織學(xué)及分子病理檢測(cè)復(fù)雜等特點(diǎn)，且預(yù)后較差，嚴(yán)重威脅患者身心健康及生命安全[5]。目前，臨床治療BLBC尚無(wú)有效方式，僅采用常規(guī)化療方案，但療效不佳，難以有效抑制疾病發(fā)展，而盡早明確BLBC組織學(xué)特征與分子病理相關(guān)性，可為臨床診治提供指導(dǎo)。

本研究結(jié)果顯示，核分級(jí)Ⅲ級(jí)、四周伴有淋巴細(xì)胞、呈地圖樣壞死、CK5/6、EGFR陽(yáng)性病理組織EGFR基因有擴(kuò)增表達(dá)均高于核分級(jí)Ⅰ～Ⅱ級(jí)、四周無(wú)淋巴細(xì)胞、無(wú)地圖樣壞死、CK5/6、EGFR陰性病理組織（P＜0.05），提示核分級(jí)較高、四周伴有淋巴細(xì)胞、呈地圖樣壞死、CK5/6、EGFR 陽(yáng)性表達(dá)的病理組織EGFR 擴(kuò)增率較高。分析原因?yàn)椋瑩?jù)臨床研究顯示，約15%的浸潤(rùn)性乳腺癌為亞型BLBC，而浸潤(rùn)性乳腺癌病理形態(tài)特征多為核分裂活躍，可見(jiàn)核仁，組織多呈好巢狀或片狀排列，腫瘤細(xì)胞四周存在大量浸潤(rùn)性淋巴細(xì)胞，且呈地圖樣壞死等表現(xiàn)，故BLBC病理組織形態(tài)多以上述形態(tài)為主[6-7]。CK5/6、EGFR蛋白屬于BLBC檢測(cè)標(biāo)志物，其于腫瘤發(fā)展過(guò)程中，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖與轉(zhuǎn)移，推進(jìn)疾病發(fā)展[8]。EGFR基因是目前臨床分子病理學(xué)檢測(cè)主要項(xiàng)目之一，其觀(guān)察腫瘤EGFR 基因擴(kuò)增情況，可評(píng)估其腫瘤轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)而判斷患者預(yù)后[9-10]。而本研究經(jīng)雙變量Spearman相關(guān)性檢驗(yàn)分析證實(shí)，CK5/6、EGFR陽(yáng)性表達(dá)與EGFR基因有擴(kuò)增均呈正相關(guān)，提示CK5/6、EGFR 陽(yáng)性表達(dá)較高的BLBC 患者其EGFR基因擴(kuò)增風(fēng)險(xiǎn)較高，而臨床針對(duì)CK5/6、EGFR陽(yáng)性表達(dá)較高的患者，可將抑制EGFR 基因擴(kuò)增作為治療目標(biāo)之一，以抑制疾病發(fā)展，預(yù)防腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移。同時(shí)臨床可考慮將檢測(cè)CK5/6、EGFR 陽(yáng)性表達(dá)作為評(píng)估腫瘤轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)的指標(biāo)之一。

綜上所述，BLBC病理的形態(tài)特征及免疫表型與分子病理檢測(cè)密切相關(guān)，臨床需通過(guò)觀(guān)察病理形態(tài)特征及CK5/6、EGFR陽(yáng)性表達(dá)情況，以評(píng)估EGFR基因擴(kuò)增情況，并予以針對(duì)性治療方案。