王欣

（遼寧省撫順市第四醫(yī)院，遼寧 撫順 113123）

結(jié)核病作為一種常見的慢性傳染疾病，是由于結(jié)核分枝桿菌感染所致，經(jīng)飛沫傳播，表現(xiàn)為咳嗽、咳痰、發(fā)熱、消瘦等癥狀，嚴重影響患者的身體健康[1-3]。因此，及時診治結(jié)核病已成為改善患者臨床癥狀及預后的關(guān)鍵。結(jié)核菌快速培養(yǎng)法、結(jié)核分歧桿菌抗酸染色涂片是診斷結(jié)核病的常規(guī)方法，雖然能取得一定效果，但無法滿足快速診斷的需求，尤其是結(jié)核菌快速培養(yǎng)法，其確診時間需3～4 周。聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction，PCR）檢測法因操作簡便、特異性及敏感度高等特點被廣泛用于診斷結(jié)核病，但該檢測法費用昂貴，且對設(shè)備要求較高。因此，積極探尋一種高效、快速的檢測技術(shù)方法已成為臨床研究的重點。γ-干擾素釋放試驗（interferon gamma releaseassay，IGRA）作為一項新型的體外免疫檢測技術(shù)，已逐漸用于結(jié)核分枝桿菌潛伏感染患者的診斷，診斷率較高，且安全可靠[4]。本研究旨在探究結(jié)核菌快速培養(yǎng)法、γ-干擾素釋放試驗在診斷結(jié)核病中的臨床意義，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年2月至2020年3月本院收治的疑似結(jié)核病患者66例作為研究對象，其中男36例，女30例；年齡28～75 歲，平均（57.21±17.10）歲。本研究經(jīng)醫(yī)學倫理委員會審核批準。

納入標準：神志清楚，依從性高；接觸結(jié)核病患者時間≥3年，且表現(xiàn)出不同程度癥狀體征（咳嗽及咳痰≥2周、胸痛、呼吸急促、發(fā)熱、咯血、消瘦等）；診斷性抗結(jié)核治療療程≥1 個月；患者對本研究知情，并自愿簽署知情同意書。排除標準：書寫、理解、表達等困難；合并心理疾病、占位性病變、艾滋病陽性、免疫系統(tǒng)疾病等；因自身原因主動退出本研究。

1.2方法所有患者均行結(jié)核菌快速培養(yǎng)法、γ-干擾素釋放試驗。結(jié)核菌快速培養(yǎng)法：①采用BD960結(jié)核菌快速培養(yǎng)儀器；②采集患者痰標本，按照1:3比例加入消化液，然后置于漩渦振蕩器內(nèi)，留取上清液，3 000 r/min持續(xù)振蕩5～10 min；③取PBS重懸細胞沉淀加入上清液內(nèi)，再對其進行培養(yǎng)、鑒定，待干燥，借助光學顯微鏡進行鏡檢；④分離致病菌，其濃度≥105CFU/mL，為陽性。

γ-干擾素釋放試驗：①采用結(jié)核桿菌特異性細胞免疫反應檢測試劑盒（?？诰S瑅璦生物研究所）；②采集患者晨起空腹狀態(tài)下的靜脈血3 mL，置于試管內(nèi)，充分混勻，取1 mL標本分別置入陽性對照組培養(yǎng)管、檢測培養(yǎng)管、本底對照培養(yǎng)管，混勻后再置于培養(yǎng)箱（溫度37 ℃），3 000 r/min 離心10 min，留取上清液；③按照酶聯(lián)免疫法測定各管上清液吸光度，并制作標準曲線，計算血清IFN-γ含量。

1.3 觀察指標 以結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)試驗為金標準比較兩種檢測方法的診斷符合率、特異性、敏感度。診斷符合率=（真陽性例數(shù)+真陰性例數(shù)）/總例數(shù)×100%；特異性=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù)）×100%；敏感度=真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 25.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床診斷情況 經(jīng)結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)試驗診斷66例疑似結(jié)核病患者中，確診結(jié)核病患者29例，非結(jié)核病患者37例。

2.2 結(jié)核菌快速培養(yǎng)法和γ-干擾素釋放試驗法診斷結(jié)果比較γ-干擾素釋放試驗診斷符合率（89.39%）、敏感度（82.76%）、特異性（94.59%）均高于結(jié)核菌快速培養(yǎng)法（69.70%、58.62%、78.38%），差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1～3。

表1 結(jié)核菌快速培養(yǎng)法診斷結(jié)果分析

3 討論

結(jié)核病的發(fā)生除與結(jié)核分歧桿菌感染相關(guān)外，還與免疫力低下、吸煙及飲酒、通風不良、前往高發(fā)地區(qū)等因素密切相關(guān)，因感染部位不同，可分為肺內(nèi)結(jié)核、肺外結(jié)核，同時，按照耐藥狀況也可分為耐藥結(jié)核病、非耐藥結(jié)核病，需以呼吸系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、消化道系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等結(jié)合癥狀進行診斷。目前，結(jié)核病已成為危及我國居民健康安全的重要疾病及公共衛(wèi)生問題。據(jù)統(tǒng)計，全球2018年結(jié)核病新發(fā)病例為1 000萬左右，而我國2018年結(jié)核病新發(fā)病例為86.6萬左右，死亡病例為3.94萬左右[5-6]。近年來，隨著我國環(huán)境、飲食結(jié)構(gòu)及生活方式的改變，結(jié)核病發(fā)生率仍呈不斷增長的趨勢，直接加重家庭及社會負擔。因此，加強防控結(jié)核病具有重要意義，而如何做好結(jié)核病的診斷則是預防、治療結(jié)核病的關(guān)鍵。

表2 γ-干擾素釋放試驗法診斷結(jié)果分析

表3 結(jié)核菌快速培養(yǎng)法與γ-干擾素釋放試驗法診斷效果比較（%）

結(jié)核菌快速培養(yǎng)法因操作簡便、檢測快速而被廣泛用于臨床，且已成為診斷結(jié)核病的有效方法，然而該檢測技術(shù)接種量較少，因此，易造成陽性檢出率偏低，影響診斷效果的準確性[7]。此外，該檢測技術(shù)診斷敏感度較低，結(jié)果易受潛伏性結(jié)核感染的干擾影響，進而降低特異性[8-9]。γ干擾素釋放試驗技術(shù)作為一項新技術(shù)，可通過檢測結(jié)核感染患者體內(nèi)的特異性效應T淋巴細胞，效應T淋巴細胞再次受結(jié)核抗原刺激時，分泌的INF-r水平會升高，可明確診斷結(jié)果，如陽性、陰性、不確定[10]。近年來，該技術(shù)因檢測快速、實驗室質(zhì)量控制效果好等優(yōu)勢逐漸運用于臨床。相關(guān)研究表明，該技術(shù)在高質(zhì)量實驗室準確率可達96%[11-12]。臨床實踐發(fā)現(xiàn)，γ干擾素釋放試驗的敏感性、陰性預測值較高，可有效輔助診斷結(jié)核病，以指導醫(yī)生制定科學的治療方案[13]。

本研究結(jié)果表明，γ 干擾素釋放試驗診斷符合率、敏感度、特異性均高于結(jié)核菌快速培養(yǎng)法（P＜0.05），表示γ 干擾素釋放試驗整體診斷效果優(yōu)于核菌快速培養(yǎng)法，更有助于保證結(jié)核病患者的診斷質(zhì)量，同時，γ干擾素釋放試驗具有操作簡便、實驗周期短、特異性及成本效益較等優(yōu)勢。此外，與傳染源接觸后的感染結(jié)核桿菌患者比例為30%左右，感染結(jié)核桿菌后的活動性結(jié)核病患者占比為10%左右。而γ 干擾素釋放試驗并不能判斷結(jié)核桿菌感染后患者是否會發(fā)展為活動性結(jié)核病，如若過度使用γ 干擾素釋放試驗，易增加結(jié)核病誤診率；且對于結(jié)核病中、低收入國家，特別是結(jié)核病/HIV高負擔地區(qū)，仍缺乏開展γ 干擾素釋放試驗檢測的條件，因此，在資源有限地區(qū)并不建議將γ干擾素釋放試驗替代結(jié)核菌素皮膚試驗作為公共衛(wèi)生干預措施。

綜上所述，γ-干擾素釋放試驗對結(jié)核病的診斷效果優(yōu)于結(jié)核菌快速培養(yǎng)法，利于保證結(jié)核病患者診斷效果，提高敏感性及特異度，使其盡早得到相應的治療，從而控制病情，改善癥狀，促進預后恢復。但本研究存在樣本量不足、結(jié)局指標不完善等局限性，今后工作中還需深入探究結(jié)核病患者診斷情況，進一步明確結(jié)核菌快速培養(yǎng)法、γ-干擾素釋放試驗的效果差異，以提升我國結(jié)核病患者診治水平，降低結(jié)核病發(fā)生率。