李立鵬，王寶典，陳素芹，邵 靜

冠心病是目前全球死亡率和發(fā)病率最高的心血管疾病之一，其死亡率和發(fā)病率呈逐年增長趨勢，并且呈現(xiàn)年輕化趨勢[1]。早發(fā)冠心病是指男性發(fā)病年齡<55歲或者女性<65歲的冠心病，此類病人的預(yù)后較差且生活質(zhì)量下降[2]。早發(fā)冠心病主要由冠狀動脈粥樣硬化引起，血管堵塞引起心肌缺血和壞死，心臟功能嚴(yán)重下降[3]。早發(fā)冠心病的診斷主要依賴于病人的心電圖變化以及臨床表現(xiàn)，近年來，隨著心臟生化標(biāo)志物的不斷發(fā)現(xiàn)及應(yīng)用，心臟生化標(biāo)志物在早發(fā)冠心病診斷中的作用逐漸引起廣泛關(guān)注[4]。同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)是甲硫氨酸和胱氨酸的代謝中間產(chǎn)物，正常生理?xiàng)l件下Hcy能夠被分解代謝，使Hcy濃度維持在較低水平[5]。病理?xiàng)l件下，Hcy分解受抑制，使Hcy水平迅速升高，與腦卒中和腦梗死等心腦血管疾病的發(fā)生密切相關(guān)[6-7]。膽紅素主要由單核巨噬細(xì)胞吞噬分解衰老的紅細(xì)胞產(chǎn)生，在體內(nèi)主要起抗氧化作用，在高血壓和缺血性腦卒中等心腦血管疾病病人中均能夠檢測到膽紅素水平升高，在高血壓和缺血性腦卒中的診斷中具有一定臨床價(jià)值[8-9]。巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1α(macrophage inflammatory protein 1α，MIP-1α)主要由單核巨噬細(xì)胞分泌產(chǎn)生，能夠激活中性粒細(xì)胞、自然殺傷性細(xì)胞和T細(xì)胞，與高血壓和腦卒中等心腦血管疾病的發(fā)生密切相關(guān)，在高血壓和腦卒中病人預(yù)后預(yù)測中具有一定臨床意義[10-11]。目前，早發(fā)冠心病仍然缺乏有效的心臟生化標(biāo)志物，本研究旨在探討早發(fā)冠心病病人血清Hcy、膽紅素及MIP-1α的變化及其與病人預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016年2月—2019年10月洛陽市第三人民醫(yī)院診治的75例早發(fā)冠心病病人作為早發(fā)組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①病人均符合美國紐約心臟病學(xué)會制定的冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)[12]；②女性<65歲，男性<55歲；③臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并腫瘤；②存在肝腎功能損傷；③存在自身免疫性疾?。虎艽嬖谌砀腥拘约膊。虎萑朐呵?個(gè)月內(nèi)接受過抗炎抗菌治療。其中，男41例，女34例；體質(zhì)指數(shù)(body mass index，BMI)19～25(23.36±2.44)kg/m2；18例有吸煙史，10例有酗酒史，44例有高血壓史，24例有糖尿病史。根據(jù)是否發(fā)生不良心血管事件將病人分為預(yù)后良好組(59例)和預(yù)后不良組(16例)。選取同期我院診治的75例非早發(fā)冠心病病人作為對照組(女性≥65歲，男性≥55歲)，其中，男44例，女31例；BMI 19～24(23.01±2.59)kg/m2；17例有吸煙史，11例有酗酒史，42例有高血壓史，22例有糖尿病史。兩組性別、BMI和吸煙史等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。病人均簽署知情同意書，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核通過。

1.2 血清Hcy、膽紅素、MIP-1α水平及相關(guān)指標(biāo)檢測 病人入院后抽取空腹靜脈血5 mL，室溫靜置30 min后，5 000 r/min離心20 min，離心半徑12.5 cm。將上清液轉(zhuǎn)移至另一潔凈離心管中，-80 ℃凍存用于后續(xù)檢測。采用全自動生化分析儀(美國貝克曼庫爾特科技有限公司，型號：AU5800)檢測總膽固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、載脂蛋白、白蛋白、血清Hcy和膽紅素水平，采用酶聯(lián)免疫吸附法，應(yīng)用MIP-1α檢測試劑盒(美國Abcam科技有限公司，貨號ab214569)檢測血清MIP-1α水平，實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。采用血糖檢測儀(美國羅氏診斷科技有限公司，型號：2519069)檢測血糖水平。

1.3 評價(jià)指標(biāo) 比較對照組和早發(fā)組的血清Hcy、總膽紅素及MIP-1α水平，收集預(yù)后良好組和預(yù)后不良組的基本資料，包括性別、年齡、BMI、吸煙史、酗酒史、高血壓史、糖尿病史，檢測兩組生化指標(biāo)，包括血糖、總膽固醇、三酰甘油、LDL-C、HDL-C、載脂蛋白、白蛋白、血清Hcy、總膽紅素及MIP-1α水平，確定早發(fā)冠心病病人預(yù)后的影響因素。

2 結(jié) 果

2.1 對照組與早發(fā)組血清Hcy、總膽紅素和MIP-1α水平比較 早發(fā)組血清Hcy和MIP-1α水平明顯高于對照組，而總膽紅素水平明顯低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表1。

表1 對照組與早發(fā)組血清Hcy、總膽紅素 和MIP-1α水平比較(±s) 單位：μmol/L

2.2 預(yù)后良好組與預(yù)后不良組臨床資料比較 預(yù)后良好組與預(yù)后不良組性別、年齡、BMI、吸煙史、酗酒史況、高血壓史、糖尿病史、血糖、三酰甘油、LDL-C、HDL-C、載脂蛋白和白蛋白水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。預(yù)后不良組總膽固醇、Hcy和MIP-1α水平明顯高于預(yù)后良好組，而總膽紅素水平明顯低于預(yù)后良好組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 預(yù)后良好組與預(yù)后不良組臨床資料比較

2.3 早發(fā)冠心病預(yù)后影響因素的Logistic回歸分析 以病人是否發(fā)生不良心血管事件為因變量，0=不發(fā)生，1=發(fā)生，以表2中有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的變量為自變量進(jìn)行多元逐步Logistic回歸分析(α入=0.05，α出=0.10)，結(jié)果顯示，血清Hcy和MIP-1α是早發(fā)冠心病病人預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(OR值分別為1.496、1.806，P均<0.05)，總膽紅素是早發(fā)冠心病病人預(yù)后的保護(hù)因素(OR=0.737，P<0.05)。變量賦值情況見表3，結(jié)果見表4。

表3 變量賦值

表4 早發(fā)冠心病預(yù)后影響因素的多元Logistic回歸分析

2.4 血清Hcy、總膽紅素及MIP-1α對早發(fā)冠心病病人預(yù)后的診斷價(jià)值 采用ROC曲線評估血清Hcy、總膽紅素及MIP-1α對早發(fā)冠心病病人預(yù)后的診斷價(jià)值，結(jié)果顯示，血清Hcy、總膽紅素聯(lián)合MIP-1α對早發(fā)冠心病病人預(yù)后的診斷價(jià)值高于各項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測，詳見表5，ROC曲線見圖1。

表5 血清Hcy、總膽紅素及MIP-1α對早發(fā)冠心病病人預(yù)后的診斷價(jià)值

圖1 血清Hcy、總膽紅素及MIP-1α對早發(fā)冠心病病人預(yù)后診斷價(jià)值的ROC曲線

3 討 論

目前認(rèn)為早發(fā)冠心病的發(fā)病機(jī)制是由于脂質(zhì)分子在血管內(nèi)壁沉積造成冠狀動脈硬化，心肌功能不足而引發(fā)心肌缺血，病情嚴(yán)重時(shí)病人出現(xiàn)心臟衰竭而死亡[13]。心臟生化標(biāo)志物在早發(fā)冠心病的診斷中具有重要作用，因此，探究與早發(fā)冠心病發(fā)病密切相關(guān)的生化標(biāo)志物并將其應(yīng)用于冠心病的診斷尤為必要。

本研究發(fā)現(xiàn)早發(fā)冠心病病人血清Hcy水平明顯升高，Hcy水平升高與早發(fā)冠心病的發(fā)生發(fā)展存在一定相關(guān)性。分析其原因可能是由于Hcy會誘導(dǎo)心肌纖維化的發(fā)生，Han等[14]研究發(fā)現(xiàn)Hcy通過誘導(dǎo)經(jīng)典瞬間受體電位通道蛋白3的表達(dá)，活化去乙?；?信號通路，進(jìn)而促進(jìn)心肌纖維化的發(fā)生。因此，在早發(fā)冠心病病人中Hcy水平升高會活化乙?；?和腫瘤生長因子-β等心肌纖維化相關(guān)信號通路，使心肌纖維化水平提高，進(jìn)而導(dǎo)致早發(fā)冠心病的發(fā)生[15]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)高血清Hcy水平病人的預(yù)后較差，分析其原因可能是由于Hcy會促進(jìn)氧化應(yīng)激的發(fā)生，Kumar等[16]研究結(jié)果顯示Hcy水平升高會引起細(xì)胞中的線粒體功能障礙，最終導(dǎo)致氧化應(yīng)激的發(fā)生。而Ma等[17]研究發(fā)現(xiàn)Hcy能夠活化核因子-κB信號通路，進(jìn)而誘導(dǎo)氧化應(yīng)激的發(fā)生。線粒體是細(xì)胞內(nèi)調(diào)節(jié)氧化還原反應(yīng)和進(jìn)行電子傳遞鏈的重要細(xì)胞器，線粒體功能紊亂會導(dǎo)致電子傳遞出現(xiàn)障礙，富余的電子與氧氣反應(yīng)產(chǎn)生大量的過氧離子和超氧離子而形成氧自由基，導(dǎo)致氧化應(yīng)激的產(chǎn)生。由于心肌細(xì)胞中的線粒體極為豐富，氧自由基會對病人的心肌造成嚴(yán)重?fù)p傷，最終引起病人心臟衰竭而導(dǎo)致死亡[18]。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)膽紅素會抑制早發(fā)冠心病的發(fā)生，分析其原因可能是由于膽紅素對膽固醇水平具有一定調(diào)節(jié)作用，Bulmer等[19]研究顯示膽紅素能夠降低膽固醇水平、氧化型脂蛋白水平以及血壓；總膽紅素水平升高會抑制膽固醇水平，進(jìn)而抑制早發(fā)冠心病的發(fā)生[20]。進(jìn)一步研究表明總膽紅素水平下降與病人的不良預(yù)后密切相關(guān)。分析其原因可能是由于膽紅素能夠抑制動脈粥樣硬化以及炎癥反應(yīng)。Vogel等[21]研究發(fā)現(xiàn)膽紅素能夠抑制血小板活化，保護(hù)心臟免受缺血再灌注損傷。血小板的過度活化使得血液處于高凝狀態(tài)，導(dǎo)致血液流動性下降，心臟局部微環(huán)境處于缺氧狀態(tài)，容易對心臟功能造成損傷，而膽紅素通過抑制血小板活化使得血液流動性恢復(fù)，心臟氧供應(yīng)充足，從而減少早發(fā)冠心病病人的心臟負(fù)荷。同時(shí)Cheng等[22]研究發(fā)現(xiàn)膽紅素主要由血紅素氧化酶催化產(chǎn)生，并且血紅素氧化酶具有抗氧化、抗凋亡和抗炎癥等多種生物學(xué)功能。因此，早發(fā)冠心病病人血清膽紅素水平下降會導(dǎo)致氧化應(yīng)激、心肌細(xì)胞凋亡和心臟炎癥水平升高，對心臟功能造成嚴(yán)重?fù)p傷，進(jìn)而導(dǎo)致病人死亡[23]。

本研究發(fā)現(xiàn)MIP-1α?xí)龠M(jìn)早發(fā)冠心病的發(fā)生，分析其原因可能是由于MIP-1α可促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生，Wu等[24]研究發(fā)現(xiàn)MIP-1α是一種促炎癥因子，能夠活化腫瘤壞死因子-α信號通路。由于腫瘤壞死因子-α信號通路的下游靶基因多為白細(xì)胞介素和腫瘤生長因子等促炎癥因子，因此，MIP-1α活化腫瘤壞死因子-α信號通路會促進(jìn)白細(xì)胞介素和腫瘤生長因子等促炎癥因子的產(chǎn)生和釋放，導(dǎo)致心臟微環(huán)境的炎癥水平升高，促進(jìn)心臟損傷而導(dǎo)致早發(fā)冠心病的發(fā)生。進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)MIP-1α水平升高與早發(fā)冠心病病人的不良預(yù)后相關(guān)，分析其原因可能是由于MIP-1α水平升高會促進(jìn)血管損傷，Relster等[25]研究顯示MIP-1α?xí)种蒲軆?nèi)皮生長因子的表達(dá)。由于血管內(nèi)皮生長因子在血管新生和損傷修復(fù)過程中起重要作用，因此，MIP-1α水平升高會抑制血管新生并促進(jìn)血管損傷，導(dǎo)致心臟氧氣和營養(yǎng)供應(yīng)不足出現(xiàn)衰竭[26]。

本研究結(jié)果還顯示，血清Hcy、總膽紅素聯(lián)合MIP-1α預(yù)測早發(fā)冠心病病人預(yù)后的價(jià)值較高，ROC曲線下面積為0.868，靈敏度、特異度分別為87.26%、83.79%，明顯優(yōu)于血清Hcy、總膽紅素、MIP-1α單獨(dú)預(yù)測的價(jià)值。提示檢測早發(fā)冠心病病人血清Hcy、總膽紅素、MIP-1α水平，可作為臨床預(yù)測早發(fā)冠心病病人預(yù)后的重要生化標(biāo)志物。

綜上所述，血清Hcy和MIP-1α水平升高以及總膽紅素水平下降與早發(fā)冠心病的發(fā)生以及不良預(yù)后密切相關(guān)，血清Hcy、總膽紅素聯(lián)合MIP-1α檢測有助于預(yù)測早發(fā)冠心病病人預(yù)后，在早發(fā)冠心病病人預(yù)后預(yù)測中具有一定臨床價(jià)值。