聶啟鴻 彭衛(wèi)衛(wèi) 王于理 張學(xué)兵 鐘麗婷 江西省贛州市人民醫(yī)院 341000

結(jié)直腸癌是一種在我國較為常見的惡性腫瘤，化療依舊是治療結(jié)直腸癌的主要手段之一。目前，雖然分子靶向和新藥聯(lián)合化療已經(jīng)在結(jié)直腸癌的治療中較為普遍，仍無法取代氟尿嘧啶(5-FU)在結(jié)直腸癌基礎(chǔ)化療中的地位[1-2]。但在臨床中按個(gè)體體表面積給藥時(shí)，由于個(gè)體差異所產(chǎn)生的療效和不良反應(yīng)也大為不同，一些不良反應(yīng)甚至威脅患者生命。一些學(xué)者通過研究5-FU的耐藥機(jī)制發(fā)現(xiàn)，二氫嘧啶脫氫酶(DPD)和胸苷酸合成酶(TS)的表達(dá)與5-FU敏感性有著密切的聯(lián)系[3]。目前，DPD、TS基因多態(tài)性與晚期結(jié)直腸癌5-FU化療相關(guān)性的研究較少，本研究將尋找DPD、TS基因多態(tài)性與晚期結(jié)直腸癌5-FU化療敏感性之間的關(guān)系，為晚期結(jié)直腸癌患者的臨床個(gè)體化治療提供重要依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年6月—2020年9月住院治療的結(jié)直腸癌患者100例，經(jīng)病理證實(shí)均為結(jié)直腸癌，其中男52例，年齡41～62歲、平均年齡(54.72±5.82)歲；女48例，年齡40～65歲、平均年齡(53.53±6.08)歲。存在嚴(yán)重心腦血管疾病、嚴(yán)重肝腎功能不全，年齡≥70歲者不予入組。患者生存時(shí)間必須≥3個(gè)月同時(shí)具有可測病灶方予入組。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 治療方案：所有患者化療前抽取5ml靜脈血，離心，保留血清，并接受全面檢查(心電圖、血常規(guī)、肝腎功能等)從而評估患者化療耐受性，隨后以FOLFOX6方案化療：第1天，靜脈滴注奧沙利鉑2h，100mg/m2；靜脈滴注亞葉酸鈣2h，200mg/m2；靜脈推注5-FU，400mg/m2，之后靜脈滴注46h，劑量改為3 000mg/m2，每2周重復(fù)。每個(gè)周期靜脈持續(xù)滴注5-FU后12h時(shí)抽取患者靜脈血2ml，用高效液相色譜對5-FU血藥濃度進(jìn)行測定。

1.2.2 TS、DPD蛋白表達(dá)檢測：采用SP免疫組化法對所有患者病理標(biāo)本中腫瘤組織ST、DPD蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測。判斷標(biāo)準(zhǔn)：以胞漿和胞核中出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒為陽性染色，選擇5個(gè)400×視野，各視野分別計(jì)數(shù)200個(gè)腫瘤細(xì)胞，計(jì)算其中陽性細(xì)胞所占百分比，最終計(jì)算平均值。其中陽性細(xì)胞百分率>10%為陽性，≤10%則為陰性。

1.3 評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 治療療效按RECIST實(shí)體瘤療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)以及進(jìn)展(PD)，其中CR+PR為有效率(RR)[4]。治療后毒副反應(yīng)則按美國國立癌癥研究所通用毒性標(biāo)準(zhǔn)(NCI-CTC)分為Ⅰ～Ⅳ度[5]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0數(shù)理統(tǒng)計(jì)軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料以百分比(%)表示，組間計(jì)數(shù)資料比較用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性比較采用Pearson相關(guān)性分析，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 療效 經(jīng)過治療后，所有患者CR 3例，PR 48例，SD 35例，PD 14例。TS和DPD檢測為陰性患者RR均高于檢測為陽性的患者(61.02% VS 36.59%、62.90% VS 31.58%，P<0.05)，詳見表1。

表1 結(jié)直腸癌患者TS、DPD表達(dá)與療效關(guān)系

2.2 不良反應(yīng) 經(jīng)過治療后患者所出現(xiàn)的不良反應(yīng)包括消化道反應(yīng)(腹瀉、嘔吐、惡心以及口腔黏膜潰爛)、皮膚色素沉淀、脫發(fā)、血液學(xué)毒性(血小板和白細(xì)胞下降)。93例發(fā)生胃腸道反應(yīng)的患者中，以Ⅰ度和Ⅱ度為主，共74例；剩余19例患者均為Ⅲ度以上。89例發(fā)生血液學(xué)毒性的患者同樣以Ⅰ度和Ⅱ度為主，共71例；剩余18例患者均為Ⅲ度以上。具體見表2。

表2 患者化療后主要毒副反應(yīng)

2.3 TS、DPD與血液5-FU濃度相關(guān)性 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，TS、DPD與血液5-FU濃度均呈負(fù)相關(guān)(r=-0.976，P=0.005；r=-0.941，P=0.017)。

3 討論

5-FU作為一種嘧啶類代謝拮抗藥物，40多年來一直應(yīng)用于胃腸、胸、頸等部位惡性腫瘤的治療之中。對于晚期結(jié)直腸癌，其仍然是首選化療藥物。雖然按患者體表面積給藥，5-FU治療的緩解率能夠達(dá)到10%～15%，但仍有患者對以5-FU為主的化療并不敏感，進(jìn)而導(dǎo)致化療失敗[6]。因此，對5-FU化療及耐藥機(jī)制進(jìn)行闡述，尋找5-FU化療的敏感性指標(biāo)對于巨大臨床意義。一些國內(nèi)外學(xué)者認(rèn)為，TS與DPD在體內(nèi)的表達(dá)與5-FU化療敏感性有著密切的關(guān)系[7]。

DPD是一種嘧啶分解代謝的起始和限速酶，體內(nèi)超過80%的5-FU是經(jīng)過DPD代謝從而失去活性的，其能夠?qū)Ⅲw內(nèi)5-FU還原成為二氫氟尿嘧啶(FUH2)，隨后其環(huán)狀結(jié)構(gòu)被二氫嘧啶酶打開，產(chǎn)生5-氟-β-酰脲丙酸(FUPA)，最終在β-丙氨酸合成酶的作用下形成最終產(chǎn)物5-氟-β-丙氨酸(FBAL)，并由腎臟排出體外。若機(jī)體DPD活性降低將導(dǎo)致5-FU半衰期延長，從而使患者化療毒性風(fēng)險(xiǎn)升高，因此，個(gè)體DPD活性高低是5-FU毒性嚴(yán)重程度的關(guān)鍵。Bai等對比了結(jié)直腸癌患者和正常組織中DPD的mRNA水平情況，發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌患者水平要明顯高于正常者，同時(shí)，相關(guān)分析顯示化療效果與DPD表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，這提示化療效果不佳與DPD的高表達(dá)相關(guān)[8-9]。TS是一種由兩個(gè)相同亞單位所組成的二聚體蛋白質(zhì)，其基因位于第18號染色體上。TS在正常機(jī)體內(nèi)活性較低，而在腫瘤患者體內(nèi)，其活性則顯著增強(qiáng)。5-氟尿嘧啶脫氧核苷(5-FdUMP)是5-FU的活性代謝產(chǎn)物，TS能夠與5-FdUMP形成穩(wěn)定的三元復(fù)合物，因此在機(jī)體TS過度表達(dá)時(shí)，5-FU的療效將顯著降低，由此可將TS作為結(jié)直腸癌患者進(jìn)行化療藥物選擇時(shí)的一項(xiàng)參考指標(biāo)，并對預(yù)后情況進(jìn)行判斷[10]。有研究顯示，使用氟尿嘧啶類化療藥物的TS高表達(dá)胃癌患者反應(yīng)率要明顯低于TS低表達(dá)患者。本文結(jié)果顯示，TS、DPD表達(dá)與血液5-FU濃度均呈負(fù)相關(guān)，即TS與DPD在體內(nèi)的高劑量表達(dá)將影響5-FU的療效，這與相關(guān)研究結(jié)果相一致。

綜上所述，結(jié)直腸癌患者TS、DPD蛋白表達(dá)與5-FU存在一定的相關(guān)性，在臨床上具有一定的應(yīng)用價(jià)值。