徐端妙 朱新宇 林秀君 雷延菊 朱志柳*

（1景寧畬族自治縣生態(tài)林業(yè)發(fā)展中心，浙江麗水323500；2中國科學(xué)院微生物研究所真菌學(xué)國家重點實驗室，北京100101；3皇太后大學(xué)卓越真菌研究中心，泰國清萊57100）

真菌是真核生物中除了動物和植物外的第三類生物，其中能形成肉眼可見的大型子實體稱為大型真菌。大型真菌是生態(tài)系統(tǒng)中不可或缺的分解者，在地球生物圈的物質(zhì)循環(huán)和能量流動中發(fā)揮著不可替代的作用，在全球物質(zhì)循環(huán)，尤其是碳元素循環(huán)中具有重要的生態(tài)價值；同時大型真菌中的許多食藥用菌與人類生產(chǎn)、生活密切相關(guān)，具有重大的經(jīng)濟價值[1]。如早在2000年前東漢的《神農(nóng)本草經(jīng)》中已經(jīng)把靈芝列為上藥。自2004年來，食用菌已成為我國僅次于糧、油、果、菜的第五大類農(nóng)產(chǎn)品。除食藥用菌外，毒蘑菇亦是大型真菌中不可忽視的部分，我國每年都有因誤食毒蘑菇中毒的報道，并且毒蘑菇中毒是食物中毒死亡的主要原因之一[2]。

浙江省景寧縣大仰湖濕地群省級自然保護區(qū)地處浙江省景寧畬族自治縣東南部，屬洞宮山脈中段，位于麗水市景寧畬族自治縣內(nèi)，包括縣域中東部的大仰、草魚塘、荒田湖三個分場，其地理坐標為東經(jīng)119°41′00″～119°45′25″、北緯27°50′47″～27°58′11″，海 拔613.8～1556.9 m，相 對 高 差943.1 m，海 拔1 500 m以上山峰有12座。該保護區(qū)是飛云江水系和甌江水系的發(fā)源地之一，屬中亞熱帶季風(fēng)氣候，年平均溫度約12.8℃、無霜期196 d左右、降水量1824.8 mm、相對濕度80%以上，具有溫暖濕潤、雨量充沛、四季分明、中亞熱帶資源豐富的特點。該保護區(qū)地貌以深切割山地為主，次級地貌有山地地貌、夷平地地貌和山區(qū)流水地貌，境內(nèi)峰巒起伏，地形復(fù)雜，植被類型以松科、杉科、柏科、殼斗科、槭樹科、胡桃科、樺木科和金縷梅科為主[3-4]。

三年來，景寧畬族自治縣生態(tài)林業(yè)發(fā)展中心與中國科學(xué)院微生物所的聯(lián)合考察隊對大仰湖自然保護區(qū)大型真菌的種類和分布進行調(diào)查，初步查清該地區(qū)的大型真菌資源狀況，為大仰湖自然保護區(qū)真菌資源的保護和利用提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 研究材料

研究材料由聯(lián)合考察隊于2015、2016、2019年間采自景寧畬族自治縣大仰湖自然保護區(qū)的大仰、草魚塘、荒田湖三個林場，共計375份，經(jīng)編號、分類、鑒定、烘干后存放于中國科學(xué)院菌物標本館（HMAS）。

1.2 研究方法

1.2.1 形態(tài)學(xué)鑒定

野外采集過程中對子實體進行原生態(tài)拍照并詳細記錄新鮮子實體生境及宏觀特征，包括：菌蓋大小、顏色、表面有無鱗片或絨毛；菌褶厚度、顏色、是否具有小菌褶；菌柄長寬、形態(tài)、氣味、受傷后的顏色變化；菌環(huán)（若有）大小、形狀、上下表面是否光滑或者覆蓋鱗片。微觀解剖特征由干標本切片于光學(xué)顯微鏡（ZEISSIMAGERA2）下觀察所得。切片以5%～10%的KOH溶液為浮載劑，用1%的剛果紅試劑染色。測量并記錄孢子、擔(dān)子、褶緣囊體（若有）、菌蓋表皮菌絲等結(jié)構(gòu)（每個特征測量至少20次，并拍照）。統(tǒng)計孢子的長寬平均值（X）、孢子長寬的標準差（SD）以及擔(dān)孢子的長寬比（Q）[5]。

1.2.2 真菌DNA ITS序列分析

DNA提取采用試劑盒（北京博邁德生物技術(shù)有限公司的廣譜植物基因組DNA快速提取試劑盒、長春市志昂生物科技有限公司的快速植物DNA磁珠法提取試劑盒GO-GPLF-400）提取法，提取方法參照試劑盒說明書；對真菌DNA條形碼基因ITS（核糖體RNA基因內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)）進行擴增。設(shè)定PCR反應(yīng)體系為25μL，包 括2×Taq Plus PCR MasterMix（200 mol/L dNTPsP、4.0 mm MgCl2、2.5 U TaqDNA聚合酶）、DNA模板、ddH2O和正反向兩種引物。引物為ITS1（5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’）和ITS4（5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’）。PCR擴增產(chǎn)物送入北京華大基因研究中心有限公司測序。

1.2.3 標本鑒定

獲得的標本ITS序列通過檢測后，在GenBank中進行BLAST比對和同源序列的檢索，并結(jié)合標本的形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果進行最后的鑒定[6-7]。

分類系統(tǒng)參照最新?lián)泳T分類體系以及子囊菌門分類體系[8]。

1.2.4 大型真菌信息分析

大型真菌經(jīng)濟用途參照文獻[9]和文獻[10]。

2 結(jié)果與分析

2.1 大仰湖自然保護區(qū)大型真菌名錄

375份真菌標本形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定結(jié)果：大型真菌有107種，隸屬于2門4綱13目34科67屬，其中食用菌21種，藥用菌21種，毒菌20種（表1）。

表1 大仰湖自然保護區(qū)大型真菌名錄

（續(xù)表1）

（續(xù)表1）

2.2 大仰湖自然保護區(qū)大型真菌統(tǒng)計分析

大仰湖自然保護區(qū)大型真菌調(diào)查結(jié)果，大型真菌分屬于34個科；大型真菌種類最豐富的3個科（優(yōu)勢科）為牛肝菌科、紅菇科、蘑菇科，共有39種，優(yōu)勢科占保護區(qū)總科數(shù)的8.82%，但包含的種數(shù)占總種數(shù)的36.44%（表2），其中牛肝菌科種數(shù)最多，但是單科單屬也是不可忽略的重要組成部分。

表2 大仰湖自然保護區(qū)大型真菌種類豐富科（≥10種）統(tǒng)計

大仰湖大型真菌共有67個屬，6個優(yōu)勢屬，分別為蘑菇屬、乳菇屬、鵝膏屬、紅菇屬、粉褶菌屬、多汁乳菇屬，共有27種（表3），雖然優(yōu)勢屬僅占保護區(qū)總屬數(shù)的8.96%，但包含的種數(shù)占保護區(qū)總種數(shù)的25.24%。其中紅菇屬Russula、乳菇屬Lactarius的大型真菌與殼斗科Fagaceae和松科Pinaceae等植物為共生關(guān)系[11-12]，這與大仰湖自然保護區(qū)溫帶屬性的植被分布有著密不可分的關(guān)系。

表3 大仰湖自然保護區(qū)大型真菌種類豐富屬（≥4種）統(tǒng)計

3 小結(jié)與討論

近年大仰湖自然保護區(qū)發(fā)現(xiàn)并已發(fā)表3個新種：磚紅紅菇Russula carnea、短鏈蘑菇Agaricuscatenariocystidiosus和景寧蘑菇Agaricusjingningensis，發(fā)現(xiàn)2個國內(nèi)新記錄種：南方喙囊乳菇Lactarius austrorostratus和巴德茲脆柄菇Psathyrella badhyzensis，其中景寧蘑菇Agaricus jingningensis為大仰湖自然保護區(qū)特有種。

在對自然保護區(qū)的大型真菌調(diào)查過程中，發(fā)現(xiàn)該地區(qū)野生食藥用資源豐富，一些重要的食用菌，如雞油菌Cantharelluscibarius，被當(dāng)?shù)氐拇迕駨V泛采食；但是如中華鵝膏Amanita sinensis，因其外觀與一些劇毒鵝膏難以分辨，采集該食用菌存在一定的風(fēng)險；一些重要的藥用菌，如蟬花Cordycepscicadae，具有抗菌、抗氧化、抗腫瘤，提高免疫力等功效，具有較好的開發(fā)價值。該地區(qū)存在20種毒蘑菇，其中劇毒種類有灰花紋鵝膏Amanita fuliginea、長條棱鵝膏Amanita longistriata等。因此，當(dāng)?shù)卣枰哟笮麄?，避免?dāng)?shù)厝罕娬`食毒蘑菇中毒。

調(diào)查初步明確了大仰湖自然保護區(qū)大型真菌資源，今后，需進一步對當(dāng)?shù)卣湎〈笮驼婢Y源進行評估和保護。

致謝：感謝中國科學(xué)院微生物研究所真菌學(xué)國家重點實驗室趙瑞琳研究員和賀茂強博士對本文指導(dǎo)。