胡建，胡忠澤

(安徽科技學院動物科學學院，安徽 鳳陽 233100)

免疫作為一種生理性保護功能，通過識別、排除或消滅非己抗原性物質(zhì)來保證機體功能的平衡，從而對預(yù)防免疫性疾病、保持機體健康具有重要作用[1-2]。環(huán)磷酰胺因免疫抑制作用強，在應(yīng)用過程中常會引起血常規(guī)和血清生化指標的異常，現(xiàn)已多用于構(gòu)建免疫抑制動物模型[3-5]。有研究表明，通過服用補益藥物可以達到增強免疫的效果[6]。而壯腰健腎丸作為補益藥物的一種，已廣泛被用于補腎陽、益腎精和強筋健骨。其藥方由多種益補類中藥組成，其中，狗脊、黑老虎、桑寄生、牛大力、女貞子與菟絲子可以補肝益腎，千斤拔可以舒筋活絡(luò)、消炎止痛，雞血藤可以舒筋活絡(luò)、活血補血，金櫻子可以固精縮尿，因此諸藥合用使壯腰健腎丸擁有滋補肝腎、養(yǎng)血等功效，同時可以提高機體的免疫功能[7]。但是，壯腰健腎丸對血常規(guī)及血清生化指標影響的研究卻很少見。因此，本研究應(yīng)用環(huán)磷酰胺構(gòu)建小鼠免疫抑制模型，從而探究壯腰健腎丸對血常規(guī)和血清生化指標的影響。

1 材料與方法

1.1試驗動物 小白鼠(24只，昆明種，雌性，體重18～22g)，由安徽醫(yī)科大學實驗動物中心提供。在適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d后，每組8只，稱重后隨機分為對照組(CT)、模型組(CTX)和壯腰健腎丸給藥組(ZJT)。飼養(yǎng)環(huán)境為溫度20～24℃、濕度55%～65%，自由采食和飲水。

1.2試驗藥物和儀器 壯腰健腎丸(廣州白云山陳李濟藥廠，國藥準字Z44021369)；環(huán)磷酰胺(上海Aladdin生物公司，批號F1812016)；BC-2600Vet血液細胞分析儀及配套試劑(深圳Mindray生物醫(yī)療公司)；DP180生化分析儀及配套試劑(廣州Dongtang電子公司)。

1.3試驗方法

1.3.1用藥方法 稱重取適量壯腰健腎丸， 加入生理鹽水稀釋至0.2275 g/ml，制成懸液。根據(jù)人和小鼠的劑量換算表，按照60 kg體重的成人一天服用11.2 g進行換算后，連續(xù)14 d給ZJT小鼠進行灌胃1.698 g/kg劑量，每天1次；CT和CTX小鼠灌胃同等劑量的生理鹽水。第12天開始，每天給CTX和ZJT小鼠腹腔注射50 mg/kg劑量的環(huán)磷酰胺，CT注射同等劑量的生理鹽水。第15天，對所有小鼠進行稱重和眼球采血，并分別保存。

1.3.2檢測方法 分別取3組小鼠的抗凝血和血清，根據(jù)BC-2600Vet血液細胞分析儀和DP180生化分析儀的使用要求進行檢測，并記錄、分析所有數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果

2.1壯腰健腎丸對CTX小鼠體重的影響 由圖1可見，CT、CTX與ZJT三組間進行兩兩相比，二者間的體重差異皆無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

圖1 壯腰健腎丸對CTX小鼠體重的影響

2.2壯腰健腎丸對CTX小鼠血常規(guī)的影響

2.2.1壯腰健腎丸對CTX小鼠白細胞、淋巴細胞單核細胞及中性粒細胞的影響 由圖2可見，CTX的白細胞總數(shù)、淋巴細胞總數(shù)、單核細胞總數(shù)與單核細胞百分比顯著低于CT小鼠(P<0.05)；而中性粒細胞總數(shù)、淋巴細胞百分比與中性粒細胞百分比在兩組間比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。ZJT的白細胞總數(shù)、淋巴細胞總數(shù)與單核細胞總數(shù)顯著高于CTX小鼠(P<0.05)；而中性粒細胞總數(shù)、中性粒細胞百分比、淋巴細胞百分比與單核細胞百分比在兩組間比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

2.2.2壯腰健腎丸對CTX小鼠紅細胞的影響 由圖3可見，將CT、CTX與ZJT進行兩組間的相互比較發(fā)現(xiàn)，小鼠的紅細胞總數(shù)、紅細胞壓積、平均紅細胞體積與紅細胞分布寬度差異皆無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

圖3 壯腰健腎丸對CTX小鼠紅細胞的影響

2.2.3壯腰健腎丸對CTX小鼠血小板的影響 由圖4可見，CTX小鼠的血小板數(shù)目、平均血小板體積、血小板分布寬度、血小板壓積與CT相比較，差異皆無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。ZJT的血小板分布寬度高于CTX小鼠(P<0.05)；而血小板數(shù)目、平均血小板體積與血小板壓積差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

注：與CTX比較，#：P<0.05。

2.2.4壯腰健腎丸對CTX小鼠血紅蛋白的影響 由圖5可見，小鼠的血紅蛋白、平均紅細胞血紅蛋白含量與平均紅細胞血紅蛋白濃度在CT、CTX與ZJT間進行兩兩相比，差異皆無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

圖5 壯腰健腎丸對CTX小鼠血紅蛋白的影響

2.3壯腰健腎丸對CTX小鼠血清生化指標的影響

2.3.1壯腰健腎丸對CTX小鼠肝功能4項指標的影響 由圖6可見，CTX的總蛋白含量、白蛋白含量顯著低于CT小鼠(P<0.05)；ZJT的總蛋白、白蛋白含量顯著高于CTX小鼠(P<0.05)。而谷丙轉(zhuǎn)氨酶與谷草轉(zhuǎn)氨酶含量通過在CT、CTX與ZJT間進行兩兩相比表明，差異皆無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

注：與CT比較，*：P<0.05；與CTX比較，#：P<0.05。

2.3.2壯腰健腎丸對CTX小鼠腎功能3項指標的影響 由圖7可見，CTX的尿素氮與尿酸含量與CT小鼠相比，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；而肌酐含量顯著降低(P<0.05)。ZJT小鼠的尿素氮與尿酸含量與CTX小鼠相比，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；而肌酐含量顯著升高(P<0.05)。

注：與CT比較，*：P<0.05；與CTX比較，#：P<0.05。

3 討論

環(huán)磷酰胺作為烷化劑的代表藥物，因其對細胞具有毒性作用，可致機體的免疫功能下降，目前已常用于構(gòu)建免疫抑制模型[5]。有研究表明，在環(huán)磷酰胺使用的過程中，不僅會對血液細胞造成一定的破壞，也會對肝腎功能造成一定的損傷[8-9]。通過本研究發(fā)現(xiàn)，CTX小鼠的白細胞總數(shù)、淋巴細胞總數(shù)與單核細胞百分比顯著低于CT，即說明環(huán)磷酰胺損傷了CTX小鼠的血細胞，進而對其免疫功能產(chǎn)生了一定的不良影響。同時，CTX小鼠的總蛋白、白蛋白與肌酐含量均顯著低于CT，則說明了環(huán)磷酰胺使CTX小鼠的肝、腎器官受損。即表明，在本研究中環(huán)磷酰胺致使CTX小鼠血常規(guī)及血清生化指標產(chǎn)生了異常，成功構(gòu)建了小鼠的免疫抑制模型。

壯腰健腎丸作為一種補益中藥，現(xiàn)多用于滋肝補腎、養(yǎng)血等治療。林飛[10]、劉新玉等[11]研究發(fā)現(xiàn)，壯腰健腎丸處方中的雞血藤、菟絲子等成分可以激活、增殖細胞，還可以促進造血功能的恢復。羅華文[12]通過研究發(fā)現(xiàn)，壯腰健腎丸可以顯著改善腎功能的損傷。有研究表明，通過服用壯腰健腎丸可以對機體的免疫功能進行有效的調(diào)節(jié)，從而進一步增強其抗病的能力[13]。通過本研究可以發(fā)現(xiàn)，較CTX而言，ZJT小鼠的白細胞總數(shù)、淋巴細胞總數(shù)與血小板分布寬度均得到了顯著提升，說明了壯腰健腎丸的服用顯著地改善了小鼠的血細胞的異常，這可能與其成分中的雞血藤、菟絲子有關(guān)。而作為機體防御系統(tǒng)重要組成部分的白細胞指標顯著提升，說明了壯腰健腎丸可以有效的增強機體的免疫力，這與前人的研究結(jié)果相一致。同時，ZJT小鼠與CTX相比，其總蛋白、白蛋白與肌酐含量均得到了顯著提升，而總蛋白、白蛋白與肌酐含量分別作為肝臟、腎臟功能的評價指標，其指數(shù)的顯著提升表明了壯腰健腎丸對肝腎功能具有有益調(diào)節(jié)作用，但具體因其成分中何種物質(zhì)以及通過何種方式產(chǎn)生的作用仍有待進一步探究。

綜上所述，壯腰健腎丸可以有效改善免疫抑制小鼠血液細胞的異常和肝腎功能的損傷，對血常規(guī)和血清生化指標產(chǎn)生了一定的良性影響。為進一步利用壯腰健腎丸增強機體的免疫功能提供了一定的實驗參考。