賈建靜 馬育彪

（成都苑東生物制藥股份有限公司 四川成都 611731）

1 前言

近年來，元素雜質(zhì)在藥品中的檢測方法越來越受藥品監(jiān)督管理機(jī)構(gòu)的重視。因?yàn)樵仉s質(zhì)不能為患者提供任何治療作用，所以其在藥品中的含量需要被控制在可接受的限度范圍內(nèi)。ICH Q3D規(guī)定，鋰屬于第三類元素雜質(zhì)，在注射劑中要考慮鋰元素的含量。帕瑞昔布鈉是注射劑注射用帕瑞昔布鈉的原料，帕瑞昔布鈉的起始物料中可能會添加鋰元素，進(jìn)而殘留在帕瑞昔布鈉中，故需對其中的鋰進(jìn)行研究控制。本實(shí)驗(yàn)旨在建立帕瑞昔布鈉中元素雜質(zhì)鋰含量的測定方法。

鋰的檢測方法通常有ICP-AES[1-2]、ICP-MS[3]、ICP-OES[4]、離子色譜法[5]、滴定法[6]。文獻(xiàn)[3]報(bào)導(dǎo)火焰原子吸收分光光度法與ICP-MS分別對2.00 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)鋰溶液進(jìn)行測定，結(jié)果在2種檢測方法下，結(jié)果無顯著差異。

原子吸收分光光度法操作簡單、準(zhǔn)確度高[7]、成本較低，廣泛應(yīng)用于飲用水、環(huán)保和醫(yī)藥行業(yè)的元素雜質(zhì)檢測[1]。

2 儀器與試藥

儀器：原子吸收分光光度計(jì)，鋰空心陰極燈，電子天平。

硝酸（優(yōu)級純），鋰單元素標(biāo)準(zhǔn)液：1 000μg/mL（國家有色金屬及電子材料分析測試中心，批號15C0 47-1）；帕瑞昔布鈉（青木制藥，批號0-171002）。

3 方法與結(jié)果

3.1 測定條件

儀器：原子吸收分光光度計(jì)。

光源：鋰空心陰極燈。

火焰類型：空氣/乙炔。

波長：670.8nm。

工作電流：2mA。

空白溶劑：2%硝酸溶液。

3.2 對照品溶液的制備

精密量取鋰單元素標(biāo)準(zhǔn)液（1 000μg/mL），用溶劑分別定量稀釋制成每1 mL含鋰0～2.0μg/mL的溶液，作為對照品溶液。

3.3 供試品溶液的制備

取本品約32 mg，加溶劑溶解并稀釋制成每1 mL中約含0.32 mg的溶液，過濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

精密量取鋰單元素標(biāo)準(zhǔn)液（1 000μg/mL）2 mL，用2%硝酸稀釋至50 mL，作為對照儲備液；取儲備液稀釋制成0.4μg/mL、0.8μg/mL、1.2μg/mL、1.6μg/mL、2.0μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)鋰溶液，按照擬定的條件進(jìn)行測定，將測得的吸光度減去空白溶液的吸光度后，以吸光度為橫坐標(biāo)，濃度為縱坐標(biāo)，繪制鋰的標(biāo)準(zhǔn)曲線，如表1所示。

表1 Li的標(biāo)準(zhǔn)曲線

3.5 方法的檢測限與定量限

按照實(shí)驗(yàn)方法對空白溶液重復(fù)測定11次，由儀器讀出吸光度的標(biāo)準(zhǔn)偏差，然后計(jì)算出儀器的檢測限與定量限。

元素檢測限公式：DL=3×SD×K。

定量限公式：DL=10×SD×K。

其中，SD為11次空白標(biāo)準(zhǔn)偏差，K為“3.4”中標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率。

由表2可知，檢測限為5.0 ng/mL，定量限為16.6 ng/mL。按ICH Q3D指導(dǎo)原則，Li為第三類元素雜質(zhì)，其PDE為250μg/d[8]，帕瑞昔布鈉制劑最大日劑量為80 mg，計(jì)算鋰的限度約為0.3%，當(dāng)擬定供試品濃度為0.32 mg/mL，鋰限度濃度約為1.0μg/mL。根據(jù)檢測限和定量限，該方法可滿足定量檢測要求。

表2 空白測定結(jié)果

3.6 濾膜吸附試驗(yàn)

本品可溶于水，但在硝酸溶劑中有帕瑞昔布析出，實(shí)驗(yàn)采用過濾方法除去析出的固體后進(jìn)樣測定，因此進(jìn)行了濾膜吸附考察。

取供試品約32 mg置100 mL量瓶，加入“2.4”項(xiàng)下的對照儲備液制成含鋰量100%的加標(biāo)樣品。分別采用纖維素過濾頭（0.45μm，濾頭1）及聚醚砜過濾頭（0.45μm，濾頭2）過濾樣品，分別棄去2 mL及5 mL初濾液，取續(xù)濾液進(jìn)行測定，由儀器讀出吸光度，根據(jù)“3.4”項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算鋰的含量。試驗(yàn)結(jié)果見表3。

表3 濾膜吸附試驗(yàn)測定結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果吸附率均<2%，表明采用不同材質(zhì)過濾頭測定對樣品結(jié)果無影響。

3.7 重復(fù)性試驗(yàn)

按“2.6”項(xiàng)下的方法平行制備6份含鋰量100%的加標(biāo)樣品（其中，供試品中鋰的含量為0），由儀器讀出吸光度，根據(jù)“3.4”項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算鋰的含量。試驗(yàn)結(jié)果見表4。

表4 重復(fù)性試驗(yàn)測定結(jié)果

由表4可知，6份樣品的平均鋰含量為102.2%，RSD為0.91%，表明重復(fù)性好。

3.8 中間精密度試驗(yàn)

2個(gè)試驗(yàn)者，按“3.6”項(xiàng)下的方法分別平行制備6份含鋰量100%的加標(biāo)樣品，由儀器讀出吸光度，根據(jù)“3.4”項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算鋰的含量。

由表5可知，2個(gè)試驗(yàn)者的12份樣品的平均鋰含量為101.1%，12份樣品的RSD為1.57%，表明方法中間精密度良好。

表5 中間精密度試驗(yàn)測定結(jié)果

3.9 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

精密量取鋰單元素標(biāo)準(zhǔn)液（1 000μg/mL）2 mL與50 mL量瓶，作為對照儲備液。精密稱取供試品（0-171002）約32 mg置100 mL量瓶，加對照儲備液分別制成含鋰量80%、100%、120%的加標(biāo)樣品，各濃度平行制備3份；按“3.1”項(xiàng)下的方法進(jìn)行測定，由儀器讀出吸光度，按“3.4”項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算測得量，并計(jì)算回收率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表6。

表6 準(zhǔn)確度試驗(yàn)測定結(jié)果

由表5可知，9份樣品的回收率在100.83%～103.40%之間，平均回收率為101.9%，RSD為0.77%，表明該方法準(zhǔn)確度高。

3.10 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液約32 mg置100 mL量瓶，加入對照儲備液制成含鋰量100%的加標(biāo)樣品，置室溫下分別于0、20、80、110、120 min后，由儀器讀出吸光度，按“3.4”項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算鋰的濃度。

由表7可知，供試品溶液在室溫下考察120min保持穩(wěn)定。

表7 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)測定結(jié)果

3.11 進(jìn)樣精密度

精密量取鋰單元素標(biāo)準(zhǔn)液1 mL分別制成0.4、0.8、1.2、1.6、2.0μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)鋰溶液，按照擬定的條件進(jìn)行測定，并以吸收值為橫坐標(biāo)，濃度為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得出回歸方程。一份含鋰量100%的加標(biāo)樣品平行測定6次，由儀器讀出吸光度，根據(jù)此回歸方程計(jì)算鋰的含量。試驗(yàn)結(jié)果見表8。

表8 進(jìn)樣精密度試驗(yàn)測定結(jié)果

由表8可知，樣品平行測定6次，平均鋰含量為100.3%，RSD為0.54%，表明進(jìn)樣精密度良好。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)采用火焰原子吸收分光光度法測定帕瑞昔布鈉中元素雜質(zhì)鋰元素的含量，9份樣品的平均回收率為101.9%，RSD為0.77%；檢測限和定量限分別為5.0 ng/mL，16.6 ng/mL。濾膜對供試品的吸附率均<2%，重復(fù)性、中間精密度、進(jìn)樣精密度的RSD（%）均<5%，實(shí)驗(yàn)表明，該方法簡單，準(zhǔn)確度、精密度、靈敏度均較好，可實(shí)現(xiàn)元素鋰元素的批量快速測定。

除此之外，可通過同時(shí)測定試劑空白、標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品，盡量減少時(shí)間間隔，消除儀器誤差。