陳偉

（雷州市疾病預(yù)防控制中心 廣東雷州 524200）

1 前言

艾滋病是一類社會危害性極大的疾病，被稱為超級癌癥，進(jìn)行艾滋病篩查意義重大?，F(xiàn)今針對艾滋病診斷多以抗HIV抗體篩查的形式完成，篩查方式可分為2類，ELISA法與ECLIA法[1]。本文納入艾滋病檢測的11 250名受檢者分別展開樣本陽性篩查，旨在比較兩者篩查準(zhǔn)確度，以期為臨床抗HIV抗體檢驗提供研究數(shù)據(jù)。

2 資料與方法

2.1 一般資料

選取2018年1月—2020年1月于我院檢驗科接受艾滋病檢測的11 250例受檢者的血液樣本為研究對象。靜脈血液樣本采集全程隔離無菌，未發(fā)生交叉感染，樣本采集后，儲存于低溫冷藏室中，供后續(xù)檢驗。

2.2 儀器和設(shè)備

ELISA檢驗：選用ELISA試劑盒（美國Cell Signaling Technology有限公司）、選用儀器均配套。ELISA雙抗體夾心法；ECLIA檢驗選用羅氏四代試劑（上海羅氏制藥有限公司），選用儀器均配套。

2.3 方法

ELISA檢驗將待檢血液樣本高速離心（800r/min）至血清分離后，參照本院《艾滋病ELISA檢測規(guī)范》與ELISA試劑說明書，展開陽性血液樣本初篩。

ECLIA檢驗：（1）制備抗原抗體復(fù)合物：抽取待檢樣本+抗HIV1p24單克隆抗體一并制備；（2）剔除未反應(yīng)物質(zhì)：收集磁性粒子，并借助磁石，把未反應(yīng)物質(zhì)清除；（3）促進(jìn)抗原抗體特異性反應(yīng)生成：取已吸附HIV抗體的磁性粒子+已標(biāo)記ALP物質(zhì)的HIV抗原，促進(jìn)兩者抗原抗體非特異性反應(yīng)的進(jìn)行；（4）再次剔除未反應(yīng)物質(zhì)：清理磁石后，步驟同2；（5）分散磁性粒子：借助反應(yīng)底物（發(fā)光底物）、起到分散磁性粒子、促進(jìn)檢驗反應(yīng)進(jìn)行的作用；（6）檢測ALP發(fā)光強(qiáng)度，間接推導(dǎo)HIV抗體陽性水平[2]。ALP與發(fā)光底物相互反應(yīng)，反應(yīng)越劇烈，ALP發(fā)光強(qiáng)度越強(qiáng)，表明抗HIV抗體數(shù)越多。以發(fā)光強(qiáng)度為依據(jù)，明確最終檢驗結(jié)果。

2.4 觀察指標(biāo)

ELISA法、ECLIA法檢測結(jié)果；其中，血清樣本OD值＞cutoff值則為陽性，反之為陰性。2種方法檢查結(jié)果與確認(rèn)結(jié)果差異比對；2種方法檢查結(jié)果篩查陽性份數(shù)與確認(rèn)陽性份數(shù)比對。

2.5 統(tǒng)計學(xué)方法

通過SPSS 23.0軟件錄入數(shù)據(jù)，選用GraphPad Prism8.0軟件比對數(shù)據(jù)，計量資料行t檢驗。將P<0.05視為統(tǒng)計學(xué)差異顯著。

3 結(jié)果

3.1 ELISA法、ECLIA法檢測結(jié)果（見表1）

表1 ELISA法、ECLIA法檢測結(jié)果[n（%）]

3.2 2組檢查結(jié)果與確認(rèn)結(jié)果差異比對（見表2）

表2 2組檢查結(jié)果與確認(rèn)結(jié)果差異比對

3.3 2組檢查結(jié)果篩查陽性份數(shù)與確認(rèn)陽性份數(shù)比 對（見表3）

表3 2組檢查結(jié)果篩查陽性份數(shù)與確認(rèn)陽性份數(shù)比對[n（%）]

4 討論

艾滋病在我國的發(fā)病率逐年升高，其傳播途徑的私密化，使得人們加強(qiáng)對該病的防范意識。正因如此，我國廣泛開展針對HIV抗體的篩查，使患病者能夠及時接受治療。但由于檢驗樣本量較為龐大，可能會出現(xiàn)樣本檢驗假陽性的結(jié)果。為向患者提供權(quán)威性的檢測意見，于初篩檢驗陽性的樣本需送至當(dāng)?shù)丶膊】刂浦行挠枰詮?fù)檢，最終確定檢驗結(jié)果?？紤]到HIV疾病對于患者身心影響較大，故針對其診斷的通知需尤為謹(jǐn)慎，只有采用了檢驗準(zhǔn)確度較高的初篩方式，才有可能獲得更為及時地陽性篩查結(jié)果。ELISA法屬生物檢測范疇，該項技術(shù)在我國大中型醫(yī)院均有著廣泛的應(yīng)用，臨床上針對其相關(guān)研究較為成熟，且在檢驗精準(zhǔn)度上得到了臨床認(rèn)可。但缺陷表現(xiàn)在檢驗流程繁瑣，需將抗原抗體分離，反復(fù)洗樣后方可開展。如對于急診檢測，ELISA法不推薦，雖然其檢測結(jié)果精準(zhǔn)度也較高，但受限于生物反應(yīng)特點，導(dǎo)致其在篩查應(yīng)用上存在著一定的局限性。ECLIA法屬化學(xué)檢驗范疇，發(fā)展時間稍短于ELISA法，其中包含的核心檢驗技術(shù)含有磁珠包被技術(shù)、電化學(xué)發(fā)光技術(shù)、生物親和技術(shù)等。檢驗原理主要為：在抗原抗體反應(yīng)過程中，人為加入發(fā)光物質(zhì)APL，待反應(yīng)底物與所加入發(fā)光物質(zhì)充分混合反應(yīng)后，加入氧化劑或酶底物，以保持發(fā)光物質(zhì)光源，此時即刻借助光電倍增管，測量光密度、測量光源參數(shù)、并將數(shù)據(jù)納入有限元模型中，即可得出解的范圍，從而確定HIV抗體的濃度與含量。多種技術(shù)的融合，使得其在檢驗精準(zhǔn)度上也可保持較高水平[3]。當(dāng)今在三甲醫(yī)院檢驗室中，偶見ECLIA法的應(yīng)用，其能有效滿足急診檢驗時限要求，20 min內(nèi)即可完成檢驗，也可實現(xiàn)HIV抗體自動化監(jiān)測，有效地彌補(bǔ)了ELISA檢測法操作繁雜的缺陷，可有效降低外源性因素對檢驗結(jié)果造成的影響，故各大醫(yī)院已廣泛推廣并應(yīng)用此類檢測方式[4]。

本文結(jié)果數(shù)據(jù)比較的差異均衡，無統(tǒng)計學(xué)意義。通過試驗表明，同一樣本的檢測，可選取多種檢驗方式，且要保證選取檢驗的試劑具備高準(zhǔn)確度。針對HIV抗體初篩，涉及到較為廣泛的樣本，但對檢驗時限無明確要求，在考慮低成本，高精準(zhǔn)度條件下，擇取ELISA法更為適合[5]。因為ECLIA檢測法在造價上要求較高，導(dǎo)致在部分縣級醫(yī)院進(jìn)行推廣應(yīng)用，存在一定的局限性。故在無明確緊急時間要求下，選擇ELISA法性價比更高。

綜上所述，針對抗HIV抗體人群進(jìn)行初篩，ELISA法與ECLIA法在篩查陽性率，檢驗準(zhǔn)確度方面無顯著差異，應(yīng)用價值均較高，可推廣。