湯逸飛 屠雨晨 朱靜娜 謝建萍 陳欣慰 黃芳 張國(guó)平 / .嘉興市農(nóng)業(yè)綜合檢驗(yàn)檢測(cè)中心；.浙江省嘉興生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)中心；.嘉興市土肥植保與農(nóng)村能源站

0 引言

小蔥屬于百合科蔥屬植物，烹飪中用于調(diào)鮮提香[1]?！八{(lán)色”小蔥指表皮經(jīng)白色紙巾擦拭后有明顯藍(lán)色物質(zhì)的小蔥[2]，主流觀點(diǎn)為小蔥上的藍(lán)色物質(zhì)是波爾多液中銅離子殘留。作為小眾農(nóng)產(chǎn)品的小蔥，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)沒(méi)有限制使用波爾多液，小蔥呈藍(lán)色可能只是農(nóng)藥超標(biāo)的表象。種植戶為了保證防治病蟲(chóng)害效果，可能盲目提高濃度稀釋農(nóng)藥倍數(shù)，也可能在里面混合其他化學(xué)農(nóng)藥協(xié)同防治。因此，有必要對(duì)“藍(lán)色”小蔥中農(nóng)業(yè)農(nóng)村部明令禁止或限制使用的高毒農(nóng)藥和生產(chǎn)中使用的常見(jiàn)的49種農(nóng)藥進(jìn)行農(nóng)藥殘留及10種重金屬含量的篩查，明確小蔥中主要的農(nóng)藥殘留種類以及需重點(diǎn)關(guān)注的農(nóng)藥風(fēng)險(xiǎn)因子，為小蔥的安全生產(chǎn)、消費(fèi)以及質(zhì)量安全監(jiān)管提供一定的借鑒和依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 樣品來(lái)源

“藍(lán)色”小蔥送樣樣品來(lái)源于流通環(huán)節(jié)產(chǎn)品，經(jīng)白色紙巾擦拭后，目測(cè)確認(rèn)有明顯藍(lán)色物質(zhì)。樣品質(zhì)量不少于1 kg，將樣品連同根部勻漿后，分正副樣品。

1.2 儀器及試劑

農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀器采用Agilent7890B/7000C氣相色譜/質(zhì)譜儀，重金屬含量檢測(cè)儀器采用Agilent7700X電感耦合等離子體質(zhì)譜儀。49種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均溯源于北京曼哈格生物科技有限公司，10種重金屬標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溯源于國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)種類等信息詳見(jiàn)表1。49種農(nóng)藥殘留質(zhì)控品采用空白基質(zhì)添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，現(xiàn)配現(xiàn)用；10種重金屬質(zhì)控品采用植物和人發(fā)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（GBW07603），溯源于地球物理地球化學(xué)勘查研究所。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品有機(jī)前處理及檢測(cè)方法

有機(jī)前處理方法中，將樣品勻漿后，兩次準(zhǔn)確稱取10.0 g樣品，加入10 mL乙腈、4.0 g 硫酸鎂、1.0 g 氯化鎂、1.0 g 檸檬酸鈉、0.5 g 檸檬酸氫二鈉和1枚陶瓷均質(zhì)子，振搖1 min，以4 200 r/min轉(zhuǎn)速離心5 min。取上清提取液6 mL，轉(zhuǎn)移至含有150 mg N-丙基-乙二胺、900 mg 硫酸鎂的凈化管中，渦旋1 min，以4 200 r/min轉(zhuǎn)速離心5 min。取上清凈化液2 mL，氮吹至近干。乙酸乙酯復(fù)溶至1 mL，進(jìn)樣1 μL，提取離子流色譜圖進(jìn)行篩查。

農(nóng)藥多殘留檢測(cè)方法中，色譜柱采用HP-5MS Ultra Inert （30 m×0.25 mm，0.25 μm）；程序升溫為初始柱溫50 ℃保持4 min，以25 ℃/min的速率升至125 ℃，再以10 ℃/min的速度升至300 ℃，保持4 min，后運(yùn)行保持5 min；載氣為氦氣（純度≥99.999%），流量3.5 mL/min，后運(yùn)行反吹氣流量3.5 mL/min；不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣體積為1 μL。質(zhì)譜條件采用電子電離源為電子能量70 eV；進(jìn)樣口溫度250 ℃，檢測(cè)器溫度280 ℃，離子源溫度300 ℃；MRM模式為溶劑延遲時(shí)間4.5 min，檢測(cè)參數(shù)等信息詳見(jiàn)表1。定量分析通過(guò)氣相色譜/質(zhì)譜儀獲得數(shù)據(jù)，使用Mass Hunter工作站定量分析軟件和Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和圖像處理。

1.3.2 樣品無(wú)機(jī)前處理及檢測(cè)方法

無(wú)機(jī)前處理方法中，將樣品勻漿后，2次稱取固體試樣0.422 g和0.440 g置于微波消解罐中，加入10 mL硝酸，微波消解程序設(shè)定為溫度用5 min升溫至120 ℃，保持5 min，調(diào)整設(shè)定溫度用5 min升溫至160 ℃，保持10 min，調(diào)整設(shè)定溫度用5 min升溫至180 ℃，保持10 min。冷卻后取出消解罐，在140 ℃電熱板上趕酸，濃縮至1 mL左右。消解罐冷卻后，將消化液轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中，用少量水洗滌消解罐3次，合并洗滌液于容量瓶中，用水定容至刻度，混勻備用。

重金屬含量檢測(cè)方法中，射頻功率1 550 W，掃描方式為跳峰，霧化器氣流量1.08 L/min，等離子體氣流量15 L/min，輔助氣流量0.9 L/min，積分時(shí)間0.3 s，檢測(cè)參數(shù)等信息詳見(jiàn)表1。定量分析通過(guò)電感耦合等離子體質(zhì)譜儀獲得數(shù)據(jù)，使用Mass Hunter工作站定量分析軟件和Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

農(nóng)藥殘留初篩為分別精密吸取各標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)儲(chǔ)備液，農(nóng)藥殘留以基質(zhì)乙酸乙酯溶液配制成100 μg/L濃度，按照保留時(shí)間順序分段檢測(cè)，采用定量離子對(duì)的峰面積單點(diǎn)校正篩選；根據(jù)初篩結(jié)果，定量待測(cè)農(nóng)藥殘留檢測(cè)用基質(zhì)乙酸乙酯溶液配制成1 mg/L、2 mg/L、3 mg/L、4 mg/L和5 mg/L 5種濃度基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行測(cè)定。重金屬篩查以水溶液配制成25 μg/L濃度，采用定量離子響應(yīng)值單點(diǎn)校正篩選；根據(jù)初篩結(jié)果，定量待測(cè)元素選擇用多元素混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，由1%硝酸溶液逐級(jí)稀釋到0.5 μg/L、5 μg/L、10 μg/L、25 μg/L、50 μg/L、100 μg/L 6種濃度基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行測(cè)定。

1.3.4 空白試驗(yàn)

基質(zhì)和溶劑在檢測(cè)中可能存在干擾，本研究對(duì)基質(zhì)和溶劑預(yù)先進(jìn)行檢測(cè)確認(rèn)，基質(zhì)和溶劑在檢測(cè)農(nóng)藥殘留過(guò)程中不會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性，不會(huì)影響定性檢測(cè)；重金屬檢測(cè)項(xiàng)目空白測(cè)量的10倍標(biāo)準(zhǔn)差為定量限，當(dāng)測(cè)定結(jié)果大于定量限時(shí)，報(bào)告定量結(jié)果。

1.3.5 檢測(cè)結(jié)果的報(bào)告方法

定量檢測(cè)結(jié)果參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB 2763-2019）[3]，判定農(nóng)藥殘留量是否超過(guò)限量。小蔥產(chǎn)品重金屬限量規(guī)定的結(jié)果參考慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，其值可用%ADI表示，計(jì)算公式[4]為

式中：NEDI—— 估計(jì)每日平均攝入量，以不同人群日消耗平均攝入的平均單一重金屬含量為依據(jù)，mg/d；

ADI—— 每日允許攝入量，該數(shù)值引用中國(guó)居民膳食營(yíng)養(yǎng)素成年人可耐受攝入量[5]，mg/d

式中：p—— 每標(biāo)準(zhǔn)人日平均小蔥產(chǎn)品的攝入量，此處的小蔥產(chǎn)品攝入量參照腌菜類別每標(biāo)準(zhǔn)人日攝入量（0.010 2 kg/d[6]）計(jì)算，kg/d；

R—— 蔬菜樣品中檢測(cè)到種類的農(nóng)藥殘留平均值，mg/kg

%ADI數(shù)值均應(yīng)小于100%，超過(guò)或接近100%（大于或等于90%）被認(rèn)為該農(nóng)藥殘留“有風(fēng)險(xiǎn)”[4]。

2 結(jié)果與分析

2.1 初篩結(jié)果

小蔥的提取、凈化和檢測(cè)均依照文中1.3.1和1.3.2。初篩結(jié)果顯示，49種農(nóng)藥殘留中，嘧霉胺殘留定性確認(rèn)存在（圖1），定量結(jié)果超過(guò)定量限；10種重金屬含量中，銅和鈷元素含量超過(guò)定量限（表1）。

表1 49種農(nóng)藥和10種重金屬標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)量分析參數(shù)

圖1 小蔥中嘧霉胺殘留的離子流圖

續(xù)表1

2.2 定量檢測(cè)

該批小蔥樣品，經(jīng)初篩后依據(jù)1.3.1進(jìn)行定量檢測(cè)。精密吸取嘧霉胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)儲(chǔ)備液，用基質(zhì)乙酸乙酯溶液配制成1 mg/L、2 mg/L、3 mg/L、4 mg/L和5 mg/L系列濃度，采用定量離子對(duì)的峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果顯示，嘧霉胺在此范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，線性回歸方程為Y= 7.564 9X+ 2.265 4，線性回歸曲線的相關(guān)系數(shù)r2為0.997 8。

繼續(xù)進(jìn)行回收率和精密度驗(yàn)證，添加農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，使之對(duì)應(yīng)添加量分別為1 mg/kg、2 mg/kg、3 mg/kg、4 mg/kg和5 mg/kg的質(zhì)控品；經(jīng)過(guò)提取和凈化步驟處理后，氣相色譜三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定，重復(fù)3次，根據(jù)線性回歸方程自動(dòng)計(jì)算嘧霉胺的殘留量,加標(biāo)回收率為嘧霉胺的殘留量與加標(biāo)量的百分比；質(zhì)控品中嘧霉胺殘留量計(jì)算3次，平均加標(biāo)回收率分別為94.41%、93.18%、92.51%、90.97%和88.81%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為1.40%、2.94%、2.91%、1.56%和1.38%。

在重金屬定量檢測(cè)中，銅元素線性回歸方程為Y=0.054 8X+0.007 2，線性回歸曲線的相關(guān)系數(shù)r2為0.999 8；鈷元素線性回歸方程為Y=0.051 0X+ 0.000 2，線性回歸曲線的相關(guān)系數(shù)r2為0.999 9。采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法對(duì)質(zhì)控品進(jìn)行回收試驗(yàn)，結(jié)果銅和鈷元素均在標(biāo)準(zhǔn)值范圍（6.6±0.8 mg/kg和0.41±0.05 mg/kg）內(nèi)。

待檢測(cè)樣品連續(xù)循環(huán)測(cè)試兩次。結(jié)果顯示，小蔥中嘧霉胺殘留測(cè)定平均值為3.79 mg/kg，在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差分別為算術(shù)平均值的0.38%，符合要求[7]；小蔥中銅元素和鈷元素含量測(cè)定平均值為3.76 mg/kg和0.11 mg/kg，在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差分別為算術(shù)平均值的2%和10%，均符合要求[8]。

2.3 檢測(cè)結(jié)果

該批次小蔥產(chǎn)品檢出的嘧霉胺殘留根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)限值[3]（≤3 mg/kg）判定為不符合要求。而小蔥中銅元素%ADI值計(jì)算結(jié)果顯示，銅元素在中國(guó)成年居民（≥18歲）和幼兒（1～4歲）可耐受攝入量分別為8 mg/d和2 mg/d[5]，通過(guò)食用該批次小蔥，銅元素的慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)分別為0.48%和1.92%，數(shù)值遠(yuǎn)小于90%；鈷元素國(guó)內(nèi)外均未限定攝入量。因此，重金屬含量數(shù)值均處在可接受的安全水平[4]。

3 結(jié)語(yǔ)

以某批次“藍(lán)色”小蔥為樣品，分別采用氣相色譜三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜法和電感耦合等離子體質(zhì)譜法，對(duì)49種農(nóng)藥殘留和10種重金屬含量進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明銅元素和鈷元素初篩結(jié)果雖然超過(guò)定量限，但慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估處在可接受的安全水平。

嘧霉胺殘留初篩確認(rèn)存在，定量檢測(cè)結(jié)果顯示：在1～5 mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法對(duì)加標(biāo)量分別為1 mg/kg、2 mg/kg、3 mg/kg、4 mg/kg和5 mg/kg的空白基質(zhì)樣品進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，加標(biāo)回收率均滿足準(zhǔn)確度和精密度要求。