孫平鴿 李坤彬 李娜 吳志遠(yuǎn) 李小杏 溫小鵬 方樺 吳少璞

1.鄭州大學(xué)附屬鄭州中心醫(yī)院 鄭州 450006 2.鄭州市第七人民醫(yī)院 3.河南省人民醫(yī)院

帕金森病（Parkinson's disease，PD）是臨床常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，以中老年人群為高發(fā)人群，近年來隨著我國(guó)人口老齡化加劇，PD發(fā)病率逐年升高[1]。目前，臨床尚無治療PD的理想方法，多采用對(duì)癥干預(yù)治療，效果不甚理想，因此探究PD發(fā)病機(jī)制并尋找有效治療藥物具有重要意義。病理學(xué)研究顯示，黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元（dopaminergic neurons，DN）進(jìn)行性喪失是PD的主要病理改變，而氧化應(yīng)激是DN損傷的機(jī)制之一[2]。損傷導(dǎo)致氧化應(yīng)激相關(guān)因子丙二醛（malondialdehyde，MDA）、 超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、 谷 胱 甘 肽 過 氧 化 物 酶 （glutathione peroxidase，GSH-Px）等表達(dá)紊亂，最終誘導(dǎo)DN凋亡，影響神經(jīng)功能。

核因子E2相關(guān)因子2（nuclear factor E2 related factor 2，Nrf2）-Notch1信號(hào)軸在氧化應(yīng)激損傷過程中發(fā)揮重要調(diào)控作用，參與多種器官、組織及細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷過程。黃芩苷（baicalin，BA）是從傳統(tǒng)中草藥黃芩中提取的有效活性成分，具有清除自由基、抗谷氨酸毒性等作用[3]。已有研究證實(shí)，BA對(duì)腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)功能具有保護(hù)作用，并能夠拮抗離體神經(jīng)細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷[4]。BA抗氧化作用顯著，但其對(duì)PD的神經(jīng)保護(hù)作用及相關(guān)機(jī)制研究尚少，因此本研究擬通過制備PD大鼠模型，觀察BA對(duì)PD大鼠黑質(zhì)DN氧化應(yīng)激損傷相關(guān)因子及對(duì)Nrf2-Notch1信號(hào)軸的調(diào)控作用，初步闡明其調(diào)控機(jī)制，以期為PD的防治提供理論參考。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康無特定病原體動(dòng)物（specific pathogen free，SPF）級(jí)雄性SD大鼠60只，7周齡，體質(zhì)量180～220g，購于斯貝福（北京）生物技術(shù)有限公司[實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)碼：SCXK （京）2019-0020]，飼養(yǎng)于鄭州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)碼：SYXK（豫）2020-0008]，實(shí)驗(yàn)過程符合減少（reduction）、替代（replacement）和優(yōu)化（refinement）的3R原則。

1.2 主要試劑和儀器 BA（含量＞99%）購于南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司（批號(hào)：20170310）；Nrf2通路抑制劑Brusatol購于成都植標(biāo)化純生物技術(shù)有限公司（批號(hào)：PCS1050）；Notch1通路抑制劑γ分泌酶抑制劑DAPT購于瑞士Alexis公司（批號(hào)：ALX-270-416-M005）；MDA、SOD、GSH-Px檢測(cè)試劑盒均購于南京建成生物工程研究所（批號(hào)：A003-1-2、A001-1-1、A005-1-2）；TdT介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記（TdT-mediated dUTP nick-end labeling，TUNEL）細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒、總RNA提取試劑盒購于北京索萊寶科技有限公司（批號(hào)：T2190、R1200）；Trizol試劑盒購于美國(guó)Invitrogen公司（批號(hào)：15596-018）； 二喹啉 甲酸（bicinchoninic acid，BCA）蛋白定量分析試劑盒購于上海碧云天生物技術(shù)有限公司（批號(hào)：P0009）；兔抗大鼠Nrf2、血紅素加氧酶1（heme oxygenase 1，Hmox1）、Notch1、Split多毛增強(qiáng)子1 （hairy and enhancer of Split 1，Hes1）一抗均購于美國(guó)Abcam公司（批號(hào)：ab89443、ab13248、ab128076、ab137530）；辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）二抗購于美國(guó)CST公司（批號(hào)：7074）。 StepOnePlus型實(shí)時(shí)熒光定量多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Real-time polymerase chain reaction，Real-time PCR）儀購于美國(guó)Thermo Fisher公司；CheniDoc XRS型化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng)為美國(guó)Bio-rad公司產(chǎn)品。

1.3 方法

1.3.1 動(dòng)物模型制備及分組 大鼠麻醉后仰臥位固定，參照腦立體定位圖譜標(biāo)注注藥點(diǎn)：（1）右側(cè)腦黑質(zhì)：硬膜下7.0mm，矢狀線右2.5mm，前囟后5.0mm；（2）前腦內(nèi)側(cè)束：硬膜下7.5mm，矢狀線右2.5mm，前囟后1.0mm。以牙科鉆在標(biāo)注點(diǎn)鉆直徑2mm的孔，60只大鼠中隨機(jī)選擇50只，采用微量注射器分別于注藥點(diǎn)注射濃度為4g·L-1、含0.02%抗壞血酸6-羥基多巴胺（6-hydroxydopamine，6-OHDA）溶液，各點(diǎn)2.5μL，注射速率1μL·min-1；其余10只設(shè)為對(duì)照組，分別于坐標(biāo)點(diǎn)注射含0.02%抗壞血酸的0.9%氯化鈉溶液，各點(diǎn)2.5μL，操作方法同前。術(shù)后2周，每只大鼠腹腔注射0.5mg·kg-1阿撲嗎啡，10min后開始觀測(cè)大鼠旋轉(zhuǎn)行為，以30min內(nèi)左側(cè)旋轉(zhuǎn)圈數(shù)超過210圈為建模成功[5]。共36只大鼠建模成功，將建模成功大鼠隨機(jī)分為模型組、BA組、BA-Nrf2抑制劑組及BA-Notch1抑制劑組，每組各9只，并將10只未制備模型的大鼠設(shè)為對(duì)照組。

1.3.2 干預(yù)方法 根據(jù)《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》[6]計(jì)算得出大鼠BA的臨床等效劑量為78mg·kg-1，BA組以78mg·kg-1的BA 0.9%氯化鈉溶液灌胃，模型組和對(duì)照組以等量0.9%氯化鈉溶液灌胃，同時(shí)均以0.9%氯化鈉溶液2mL·kg-1腹腔注射，1次/d， 連續(xù)2周；BA-Nrf2抑制劑組在BA組基礎(chǔ)上腹腔注射Brusatol 2mg·kg-1，BA-Notch1抑制劑組在BA組基礎(chǔ)上腹腔注射DAPT 10mg·kg-1，1次/d，連續(xù)2周。

1.3.3 組織取材 干預(yù)結(jié)束后，每組選擇4只大鼠進(jìn)行麻醉，立即用4%多聚甲醛進(jìn)行心臟灌流，分離全腦組織，置于4%多聚甲醛中固定備用；每組余下5只大鼠處死，分離全腦組織，于冰面上剝離雙側(cè)腦黑質(zhì)，取部分制備成10%組織勻漿，-70℃凍存?zhèn)溆茫溆嗖糠帜X黑質(zhì)直接于-70℃凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.4 腦黑質(zhì)氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測(cè) 取10%腦黑質(zhì)組織勻漿液，4℃下3 000r/min離心10min，離心半徑10cm，取勻漿上清液，參照試劑盒說明書步驟操作，采用硫代巴比妥那比色法檢測(cè)MDA水平，鄰苯三酚自氧化法檢測(cè)SOD活力，二硫代二硝基苯甲酸法檢測(cè)GSH-Px活力。

1.3.5 腦黑質(zhì)DN細(xì)胞凋亡情況檢測(cè) 取4%多聚甲醛中固定的全腦組織，將腦黑質(zhì)部分常規(guī)石蠟包埋，5μm切片，脫蠟至水，按照TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒說明書步驟操作，3，3-二氨基聯(lián)苯胺（diaminobezidin，DAB）法顯色，蘇木素復(fù)染、常規(guī)脫水及透明后晾干，中性樹脂封片。光鏡下觀察拍照，以染成棕黃色或棕色的細(xì)胞為凋亡陽性，取5個(gè)隨機(jī)視野，計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，計(jì)算細(xì)胞凋亡率，取平均值。

1.3.6 腦黑質(zhì)Nrf2、Hmox1、Notch1、Hes1 mRNA表達(dá)檢測(cè) 取-70℃保存的腦黑質(zhì)組織，Trizol法提取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，以之為模板鏈進(jìn)行Realtime PCR，按照試劑盒說明書設(shè)定反應(yīng)體系，經(jīng)42個(gè)循環(huán)擴(kuò)增后，以甘油醛-3-磷酸脫氫酶 （glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH） 為 內(nèi) 參照，采用2-△△CT法計(jì)算為目的基因的相對(duì)表達(dá)量。引物設(shè)計(jì)和合成均由生工生物工程（上海）股份有限公司完成，引物序列見表1。

表1 引物序列Tab.1 Primer sequences

1.3.7 腦黑質(zhì)中Nrf2、Hmox1、Notch1、Hes1蛋白表達(dá)檢測(cè) 取-70℃保存的腦黑質(zhì)組織，經(jīng)研磨、裂解后進(jìn)行蛋白定量，沸水水浴變性后進(jìn)行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，經(jīng)封閉及一抗、二抗孵育，進(jìn)行電化學(xué)發(fā)光法顯影和定影，凝膠成像系統(tǒng)掃描，以目的蛋白灰度值與內(nèi)參GAPDH灰度值比值表示蛋白相對(duì)表達(dá)量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料均以±s表示，多樣本間比較采用單因素方差分析，兩兩樣本比較采用SNK-q檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠一般狀態(tài)比較 干預(yù)期間對(duì)照組大鼠全部存活，未發(fā)生旋轉(zhuǎn)行為，一般狀態(tài)無異常。模型組大鼠毛色發(fā)黃，進(jìn)食量明顯減少，出現(xiàn)旋轉(zhuǎn)、驚厥等癥狀，并隨時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸加重，部分出現(xiàn)瀕死狀態(tài)。BA組毛色發(fā)黃稍減輕，進(jìn)食量稍有增加，旋轉(zhuǎn)、驚厥等癥狀有所減輕，但仍較對(duì)照組明顯。BA-Nrf2抑制劑組和BA-Notch1抑制劑組癥狀較BA組更重，但較模型組稍減輕，較少出現(xiàn)驚厥或?yàn)l死狀態(tài)。

2.2 各組大鼠腦黑質(zhì)中MDA、SOD活力及GSH-Px水平比較 與對(duì)照組比較，模型組、BA組、BA-Nrf2抑制劑組及BA-Notch1抑制劑組MDA水平較高，SOD和GSH-Px活力均較低（P＜0.05）。 與模型組比較，BA組、BA-Nrf2抑制劑組及BA-Notch1抑制劑組MDA水平降低，其中BA-Nrf2抑制劑組和BA-Notch1抑制劑組高于BA組（P＜0.05）；與模型組比較，BA組、BA-Nrf2抑制劑組及BA-Notch1抑制劑組SOD和GSH-Px活力均升高，其中BA-Nrf2抑制劑組和BA-Notch1抑制劑組低于BA組 （P＜0.05），BA-Nrf2抑制劑組和BA-Notch1抑制劑組MDA、SOD及GSH-Px水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見表2。

表2 各組大鼠腦黑質(zhì)MDA水平、SOD及GSH-Px活力比較（±s，n=5）Tab.2 Comparison of MDA level， SOD and GSH-Px activity of substantia nigra in each group（±s，n=5）

表2 各組大鼠腦黑質(zhì)MDA水平、SOD及GSH-Px活力比較（±s，n=5）Tab.2 Comparison of MDA level， SOD and GSH-Px activity of substantia nigra in each group（±s，n=5）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05；與BA組比較，△P＜0.05Note:Compared with control group， *P＜0.05;compared with model group， #P＜0.05;compared with BA group， △P＜0.05

組別 MDA（mmol·mg-1） SOD（U·mg-1） GSH-Px（U·mg-1）對(duì)照組 2.10±0.51 175.26±16.87 80.59±10.24模型組 6.80±0.70* 90.22±13.91* 23.75±6.10*BA 組 3.74±0.63*# 151.30±15.87*# 65.20±8.35*#BA-Nrf2 抑制劑組 5.07±0.75*#△ 122.78±16.02*#△ 38.25±8.91*#△BA-Notch1 抑制劑組 5.19±0.84*#△ 123.51±15.14*#△ 37.43±7.44*#△

2.3 各組大鼠腦黑質(zhì)DN凋亡情況比較 對(duì)照組、模型組、BA組、BA-Nrf2抑制劑組及BA-Notch1抑制劑組腦黑質(zhì)DN凋亡率分別為（9.25±2.10）%、（43.80±2.05）%、（20.26±2.18）%、（35.46±2.25）%、（36.81±2.19）%。 與對(duì)照組比較，模型組、BA組、BA-Nrf2抑制劑組及BANotch1抑制劑組腦黑質(zhì)DN凋亡率均較高（P＜0.05）；與模型組比較，BA組、BA-Nrf2抑制劑組及BA-Notch1抑制劑組腦黑質(zhì)DN凋亡率均降低，其中BA-Nrf2抑制劑組和BA-Notch1抑制劑組高于BA組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），BA-Nrf2抑制劑組和BA-Notch1抑制劑組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見圖1。

圖1 各組大鼠腦黑質(zhì)DN凋亡情況（TUNEL染色，400×）Fig.1 Apoptosis of DN in substantia nigra in each group(TUNEL staining， 400×)

2.4 各 組 大 鼠 腦 黑 質(zhì) 中Nrf2、Hmox1、Notch1、Hes1 mRNA表達(dá)比較 與對(duì)照組比較，模型組、BA組、BANrf2抑制劑組及BA-Notch1抑制劑組Nrf2、Hmox1、Notch1、Hes1 mRNA相對(duì)表達(dá)量均較低（P＜0.05）；與模型組比較，BA組、BA-Nrf2抑制劑組及BA-Notch1抑制劑組Nrf2、Hmox1、Notch1、Hes1 mRNA相對(duì)表達(dá)量均升高，其中BA-Nrf2抑制劑組和BA-Notch1抑制劑組低于BA組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），BANrf2抑制劑組和BA-Notch1抑制劑組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見表3。

表3 各組大鼠腦黑質(zhì)Nrf2、Hmox1、Notch1、Hes1 mRNA相對(duì)表達(dá)量比較（±s，n=5）Tab.3 Comparison of the relative expressions of Nrf2， Hmox1， Notch1， Hes1 mRNA of substantia nigra in each group（±s，n=5）

表3 各組大鼠腦黑質(zhì)Nrf2、Hmox1、Notch1、Hes1 mRNA相對(duì)表達(dá)量比較（±s，n=5）Tab.3 Comparison of the relative expressions of Nrf2， Hmox1， Notch1， Hes1 mRNA of substantia nigra in each group（±s，n=5）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05；與BA組比較，△P＜0.05Note:Compared with control group， *P＜0.05;compared with model group， #P＜0.05;compared with BA group， △P＜0.05

組別 Nrf2 Hmox1 Notch1 Hes1對(duì)照組 1.05±0.07 0.95±0.08 1.23±0.09 1.10±0.08模型組 0.32±0.04* 0.23±0.04* 0.54±0.06* 0.40±0.05*BA 組 0.84±0.08*# 0.80±0.06*# 0.95±0.07*# 0.86±0.06*#BA-Nrf2 抑制劑組 0.45±0.06*#△ 0.37±0.04*#△ 0.67±0.05*#△ 0.55±0.05*#△BA-Notch1 抑制劑組 0.49±0.06*#△ 0.40±0.05*#△ 0.63±0.05*#△ 0.51±0.04*#△

2.5 各組大鼠腦黑質(zhì)中Nrf2、Hmox1、Notch1、Hes1蛋白表達(dá)比較 與對(duì)照組比較，模型組、BA組、BA-Nrf2抑制劑組及BA-Notch1抑制劑組Nrf2、Hmox1、Notch1、Hes1蛋白相對(duì)表達(dá)量均較低（P＜0.05）； 與模型組比較，BA組、BA-Nrf2抑制劑組及BA-Notch1抑制劑組Nrf2、Hmox1、Notch1、Hes1蛋白相對(duì)表達(dá)量均升高，其中BA-Nrf2抑制劑組和BA-Notch1抑制劑組低于BA組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），BA-Nrf2抑制劑組和BA-Notch1抑制劑組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見圖2。

圖2 各組大鼠腦黑質(zhì)中Nrf2、Hmox1、Notch1、Hes1蛋白表達(dá)情況Fig.2 Expressions of Nrf2， Hmox1， Notch1 and Hes1 of substantia nigra in each group

3 討論

PD病因及發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，至今尚未完全闡明。研究認(rèn)為，環(huán)境毒素、家族遺傳、免疫系統(tǒng)異常及氧化應(yīng)激均與PD發(fā)病相關(guān)[7-8]。近年來研究證實(shí)，DN變性壞死是PD的主要病理改變，DN缺乏可導(dǎo)致紋狀體多巴胺分泌減少，從而引起DN與膽堿能神經(jīng)元功能失調(diào)，進(jìn)而引發(fā)一系列臨床癥狀[9]。PD一旦發(fā)病，需終身干預(yù)，目前臨床上主要采用多巴胺受體激動(dòng)劑、多種酶抑制劑等進(jìn)行治療，改善臨床癥狀的近期效果較好，但長(zhǎng)期用藥不良反應(yīng)較強(qiáng)，而且無法逆轉(zhuǎn)DN進(jìn)行性喪失的病理改變[10]。氧化應(yīng)激損傷是DN凋亡主要機(jī)制之一，尋找高效低毒的藥物，抑制DN氧化應(yīng)激損傷現(xiàn)已成為PD治療研究的新方向。

近年來中醫(yī)藥在多種慢性疾病的治療中表現(xiàn)出較大優(yōu)勢(shì)，逐漸成為臨床和基礎(chǔ)研究的熱點(diǎn)[11]。BA是從黃芩中提取的黃酮類小分子化合物，水解后可通過血腦屏障，具有顯著的抗氧化應(yīng)激作用。本研究應(yīng)用BA干預(yù)后PD模型大鼠的癥狀減輕，腦黑質(zhì)MDA水平低于模型組，SOD、GSH-Px活力高于模型組，提示BA可有效改善PD大鼠腦黑質(zhì)DN氧化應(yīng)激損傷。李慧艷等[12]研究發(fā)現(xiàn)，BA可有效降低急性胰腺炎大鼠血清MDA水平，升高SOD、GSH-Px活力；另有研究顯示，BA可有效減輕創(chuàng)傷性腦損傷小鼠腦皮質(zhì)氧化應(yīng)激損傷，說明BA具有抗氧化應(yīng)激作用[13]。以上兩項(xiàng)研究與本研究結(jié)果一致。本研究進(jìn)一步顯示，BA干預(yù)后PD大鼠DN凋亡率較模型組降低，提示BA可有效抑制PD大鼠DN凋亡，與Zheng等[14]研究結(jié)果相似。該研究提示BA干預(yù)后，類神經(jīng)元PC-12細(xì)胞受氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的凋亡減少，說明BA可減輕氧化應(yīng)激損傷，具有細(xì)胞保護(hù)作用。

Nrf2-Notch1信號(hào)軸是機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)中重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，其中Nrf2信號(hào)通路與Notch1信號(hào)通路相互作用、相互影響，共同參與神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變、腫瘤等疾病的發(fā)生和發(fā)展。Hes1是Notch1通路下游關(guān)鍵位點(diǎn)之一，已有研究證實(shí)，Notch1/Hes1信號(hào)通路抑制與糖尿病視網(wǎng)膜神經(jīng)元損傷關(guān)系密切[15]。Nrf2含有亮氨酸拉鏈蛋白，在氧化應(yīng)激反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用，Hmox1是其下游靶蛋白[16]。Nrf2信號(hào)通路在細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷過程中的調(diào)控作用已有報(bào)道。Moreira等[17]發(fā)現(xiàn)Nrf2信號(hào)通路在PD小鼠模型中可誘導(dǎo)腦黑質(zhì)致密部DN的缺失，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激損傷。Sampath等[18]研究表明Nrf2信號(hào)通路抑制可抑制PD小鼠的胃腸組織中抗氧化基因的表達(dá)，從而導(dǎo)致胃腸運(yùn)動(dòng)功能障礙。Yamaguchi等[19]研究顯示，Notch1-Nrf2軸在肌源性干細(xì)胞中參與了抗氧化調(diào)控過程，Notch1作為Nrf2上游通路發(fā)揮作用，以輔助維持肌源性干細(xì)胞的自我更新能力及表型。目前Notch1-Nrf2軸在神經(jīng)元中的抗氧化能力研究報(bào)道尚少。本研究結(jié)果提示，與對(duì)照組比較， 模型組Nrf2、Hmox1、Notch1、Hes1 mRNA和蛋白相對(duì)表達(dá)量降低，說明PD大鼠Nrf2-Notch1信號(hào)軸被抑制；應(yīng)用BA干預(yù)后，BA組上述指標(biāo)較模型組升高，說明BA可能通過激活Nrf2-Notch1信號(hào)軸發(fā)揮抗氧化應(yīng)激損傷作用；在BA基礎(chǔ)上分別應(yīng)用Nrf2抑制劑和Notch1抑制劑干預(yù)后，上述指標(biāo)較BA組均降低，且腦黑質(zhì)中SOD、GSH-Px活力也較BA組降低，MDA水平及DN凋亡率較BA組升高，進(jìn)一步證明BA可通過激活Nrf2-Notch1信號(hào)軸，發(fā)揮抗氧化應(yīng)激損傷作用。

綜上所述，BA可有效改善PD大鼠腦黑質(zhì)DN氧化應(yīng)激損傷，其機(jī)制可能與激活Nrf2-Notch1信號(hào)軸，發(fā)揮調(diào)控作用有關(guān)。本研究結(jié)果可為臨床中BA及其相關(guān)藥物用于PD的防治提供理論依據(jù)。