鐘愷欣, 張欣宗, 葉桂芳, 林維新, 伍欣, 羅璐璐, 王奇玲

國家衛(wèi)生健康委員會男性生殖與遺傳重點實驗室、廣東省計劃生育科學(xué)技術(shù)研究所男性科、廣東省計劃生育專科醫(yī)院人類精子庫(廣東廣州 510600)

據(jù)研究表明，目前全球有大約15%的夫婦受不孕不育困擾，其中男性因素占40%～50%[1]。泌尿生殖道感染是男性不育的重要因素之一，可由細菌、支原體、衣原體及病毒等多種微生物引起，從而影響精子的發(fā)生、發(fā)育和成熟。有報道顯示，男性支原體的感染率可達5%～42%，且感染率有逐年上升的趨勢[2]。解脲脲原體(ureaplasma urealyticum, UU)是常見的致病性泌尿生殖道支原體，主要寄居在人體泌尿生殖道的黏膜和上皮細胞，當(dāng)機體免疫力下降或局部環(huán)境改變等情況下，可引起泌尿生殖道感染。有研究報道男性UU感染會使精子濃度和活力降低[3-4]?，F(xiàn)有法規(guī)[5]明確要求人類精子庫合格捐精志愿者無UU感染。近年越來越多報道顯示捐精志愿者合格率有下降的趨勢[6]，志愿者招募愈加困難[7]。對于單純感染UU的捐精志愿者，精子庫常規(guī)給予抗生素治療，復(fù)查結(jié)果轉(zhuǎn)陰后可允許其進行捐精。廣東省人類精子庫對于單純UU感染的志愿者通常給以口服四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素治療。關(guān)于抗生素治療對不育男性精液質(zhì)量的影響已有研究報道，而對捐精者精液質(zhì)量影響的相關(guān)研究較少見。本研究旨在評估捐精志愿者支原體感染后用藥治療對其精液質(zhì)量的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對象來源于2016年1月至2019年12月在廣東省人類精子庫接受UU篩查的445例捐精志愿者。匯總統(tǒng)計第1次UU篩查結(jié)果陽性的志愿者用藥治療后UU復(fù)查結(jié)果及精液質(zhì)量的變化情況。第1次篩查單純UU陽性率約為22.9%。

1.2 研究方法

1.2.1 志愿者UU篩查方案 廣東省人類精子庫執(zhí)行以下UU篩查方案：精液檢查達到捐精標準的篩選期志愿者如果其他檢查結(jié)果正常，僅僅UU檢查結(jié)果異常，則給予用藥處理：使用鹽酸多西環(huán)素0.1 g，飯后口服，2次/d，連續(xù)服用2周，停藥1周后回來精子庫取精復(fù)查；對復(fù)查結(jié)果陽性者給予阿奇霉素1 g，單次口服，停藥1周后再次回來復(fù)查精液；再次復(fù)查結(jié)果陽性者予以淘汰；UU復(fù)查結(jié)果為陰性且其他檢查正常者可合格捐精。

1.2.2 UU檢測方法 用無菌滴管吸取志愿者精液0.2 mL，接種于支原體培養(yǎng)基中，在37℃溫箱中培養(yǎng)48 h后觀察結(jié)果，培養(yǎng)基由橙黃色變?yōu)榧t色即判斷為陽性。實驗采用珠海麗珠試劑股份有限公司生產(chǎn)的試劑盒，操作步驟和結(jié)果判斷均嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.2.3 精液檢查 按照世界衛(wèi)生組織《人類精液檢查與處理實驗室手冊》第5版的方法，采用人工計數(shù)的方法檢測志愿者用藥前、用藥后1周及2個月的精液標本。禁欲時間均為3～5 d。檢測指標包括精液量、精子濃度、前向運動精子(progressive motility, PR)百分率、非前向運動精子(non-progressive motility, NP)百分率、不活動精子(immotility, IM)百分率，并計算總精子數(shù)和前向運動精子總數(shù)。

1.2.4 質(zhì)量控制 全部精液分析檢測均由精子庫實驗室技術(shù)人員完成。全部技術(shù)人員均接受WHO第5版手冊的規(guī)范化培訓(xùn)，實驗室每年定期開展精液分析內(nèi)部質(zhì)量控制和參加精液分析外部質(zhì)量控制，結(jié)果均在控。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件，采用重復(fù)測量設(shè)計的方差分析比較用藥前后精液質(zhì)量的變化趨勢，不同時間點的精液質(zhì)量的比較采用多重比較法。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 用藥對捐精志愿者精液質(zhì)量的影響 445例捐精志愿者UU感染后用藥治療對其精液量沒有顯著影響(P=0.362)。精子濃度相較于用藥前有所下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.008)。用藥治療對于精子活力也是有影響的，主要表現(xiàn)為PR下降(P=0.004)及IM上升(P=0.004)。用藥治療對于精子數(shù)量有影響，表現(xiàn)為總精子數(shù)和前向運動精子數(shù)顯著減少(P<0.05)。見表1。

表1 捐精志愿者UU感染用藥治療前后各時期精液質(zhì)量

2.2 志愿者用藥后不同時期精液質(zhì)量的變化 精子濃度、精子活力PR在用藥后1周下降(P=0.001)，但PR用藥后2個月與用藥前相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.125),用藥后2個月與用藥后1周比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.076)?？偩訑?shù)和前向運動精子數(shù)在用藥后均減少(P<0.01)，用藥后1周與用藥后2個月的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 志愿者用藥前、用藥后1周及2個月精液質(zhì)量的比較

3 討論

近年來，生殖道支原體因感染率高，越來越受到人們的關(guān)注，但其對精液質(zhì)量的影響一直存在較多爭議。有研究報道，由于支原體侵入到生精小管后會破壞生精細胞，引發(fā)精母細胞結(jié)構(gòu)的改變，干擾精子的發(fā)生和成熟，從而降低精子濃度；以及UU能夠附著在精子的表面，其頸部形態(tài)發(fā)生改變，尾部出現(xiàn)卷曲，形態(tài)學(xué)上的改變使精子的活力、運動能力降低以及精子畸形率上升，影響精卵結(jié)合，從而引發(fā)不育[8-9]。也有報道稱支原體感染對精液質(zhì)量無明顯影響[10-11]。人類精子庫的供精精液主要用于輔助生殖技術(shù)，采集精液時要求精液不得有UU感染。本研究資料提示在捐精志愿者中約存在22.9%單純UU感染，在用藥治療后94.7%去除了UU感染進行合格捐精。

文獻報道UU感染后男性精液質(zhì)量包括精液量、精子濃度、活力、正常形態(tài)等參數(shù)都有降低[12-13]。在本研究中，有52.8%接受了抗UU感染的用藥治療。目前臨床上治療UU主要依靠抗生素，由于UU沒有細胞壁結(jié)構(gòu)，故干擾細胞壁合成的抗生素對其無效，但干擾蛋白質(zhì)合成的抗生素如四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對UU較敏感。本研究中采用的鹽酸多西環(huán)素是四環(huán)素類抗生素，為廣譜抑菌劑，高濃度具有殺菌作用，口服吸收良好，不良反應(yīng)較少，志愿者服藥的依從性較好，初次復(fù)查UU的轉(zhuǎn)陰率達到90.3%。關(guān)于抗生素治療對精液質(zhì)量的影響，朱桂杰[14]、Ahmadi等[15]研究結(jié)果顯示，存在生殖道支原體感染的男性不育患者經(jīng)過抗生素治療后，精液質(zhì)量有明顯改善。本研究結(jié)果顯示捐精志愿者UU感染用抗生素治療后對精液質(zhì)量有較大影響，主要體現(xiàn)在精子濃度降低、精子PR下降、總精子數(shù)和前向運動精子數(shù)顯著降低。這一結(jié)果差異的原因可能與研究對象的來源有關(guān)，本研究對象是精液質(zhì)量達到人類精子庫捐精要求(精子濃度≥60×106·mL-1，PR≥60%)的健康人群，而文獻報道的研究對象均為男性不育患者；另一方面提示UU感染對精液質(zhì)量的影響并不會隨著UU的消除而馬上去除。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)UU感染的志愿者用藥后1周精子前向運動精子百分比降低，但在用藥2個月后又上升，且用藥2個月后的PR與服用抗生素前差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，提示隨著志愿者停用抗生素的時間延長，UU感染志愿者經(jīng)抗生素治療后的精液質(zhì)量越來越好，精子活力可恢復(fù)到用藥前水平。

綜上所述，生殖道支原體感染服用抗生素治療后短時間內(nèi)會降低精子濃度和活力，但停藥時間延長精子活力有所恢復(fù)，建議人類精子庫對于支原體陽性的捐精志愿者治療轉(zhuǎn)陰后開始合格捐精的間隔期適當(dāng)延長，可提高精液質(zhì)量。