馬弘財，王冬經，元振杰，石 斌，曾江勇，德 吉

（西藏自治區(qū)農牧科學院畜牧獸醫(yī)研究所，西藏拉薩 850009）

巴氏桿菌（Pasteurella multocida）為革蘭氏陰性的人獸共患微生物，能在多種家畜和野生動物中流行和傳播。根據細菌莢膜抗原不同，巴氏桿菌分為A、B、C、D、E 5 種血清型，同時它還有16個脂多糖血清型[1-5]。我國流行最多的血清型為A型和D型[6]。巴氏桿菌是牛呼吸系統(tǒng)疾病的主要病原之一，屬于條件致病菌，常存在于健康牛呼吸道內，在應激條件下容易使牛發(fā)病。國內研究最多的為A型多殺性巴氏桿菌。該血清型具有多種毒力因子，如莢膜多糖、脂多糖、膜外蛋白等。這些毒力因子在巴氏桿菌致病過程中發(fā)揮了關鍵作用，而缺乏毒力因子的菌株不致病[4，7-8]。

牛巴氏桿菌病在全球范圍內流行，給全球養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大經濟損失。據統(tǒng)計，在印度所有的病死牛中，46%～55%是由巴氏桿菌引起的出血性敗血癥造成的，直接經濟損失達8 億美元；巴基斯坦每年因該病造成約305 億美元的經濟損失[7]。我國各地均有牛感染巴氏桿菌的報道。雖沒有具體統(tǒng)計造成的經濟損失，但對于一個畜牧業(yè)大國來說損失是巨大的。同時，巴氏桿菌可通過貓、狗等動物的咬傷、抓傷感染人類[7]，因此該菌也是危害生物安全的主要病原之一。

當雄縣下轄6 鄉(xiāng)2 鎮(zhèn)，為拉薩市最大的畜牧業(yè)縣，主要養(yǎng)殖家畜為牦牛，存欄約27 萬頭。西藏曾有大肆暴發(fā)牛多殺性巴氏桿菌病的歷史。隨著各級政府加大對該病防控的重視力度，近幾年發(fā)病率有所降低。而當雄縣海拔在4 500 m 以上，氣候環(huán)境多變，每年有很長時間的枯草期，牦牛營養(yǎng)較匱乏，從而使巴氏桿菌在牦牛機體內滋生，導致發(fā)病。本研究在2019—2020年春防和秋防前，采集當雄縣主要牦牛養(yǎng)殖場和散養(yǎng)戶血清樣品進行多殺性巴氏桿菌檢測，旨在了解該縣牦牛巴氏桿菌病的流行特點及存在的風險因素，也為下一步更好地完善相關防控措施奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 待檢血清

本研究以牦牛養(yǎng)殖較為集中的5 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)為研究區(qū)域，以養(yǎng)殖規(guī)模在2 000 頭以上的2 個養(yǎng)殖場以及存欄30 頭以上的牧戶為抽樣群體。每個養(yǎng)殖場隨機采集血清180 份以上，存欄30 頭以上的牧戶采集血清10 份，50 頭以上采集15 份，100 頭以上采集30 份。2019年10 月—2020年4 月，共采集2 個規(guī)模養(yǎng)殖場及56 個牧戶未免疫牦牛血清1 124 份，置-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 檢測方法

采用上海滬鼎生物科技有限公司生產的牛巴氏桿菌抗體（Pm-Ab）ELISA 檢測試劑盒（批號D-80125），按照試劑盒操作要求進行試驗。

1.3 結果判定

試驗有效性判定：陽性對照孔平均值≥1，陰性對照孔平均值≤0.20。臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15。陰性判定：樣品OD ＜臨界值，為陰性；樣品OD ＞臨界值，為陽性。

1.4 統(tǒng)計分析

使用R 軟件對不同年齡、性別、飼養(yǎng)方式牦牛的巴氏桿菌血清抗體陽性率進行統(tǒng)計分析。判定標準：P＜0.05 為有統(tǒng)計學差異，P≥0.05 為無統(tǒng)計學差異。

2 結果

本次調查共在5 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的2 個規(guī)模養(yǎng)殖場及56 個牧戶采集1 124 份血清，檢出巴氏桿菌陽性血清130 份，個體陽性率為11.57%（95%CI：9.8%～13.6%）；共有50 個牧戶和2 個規(guī)模養(yǎng)殖場檢出陽性血清，巴氏桿菌群體陽性率為89.66%（52/58）。

通過R 軟件對飼養(yǎng)模式、性別、年齡等3 個因素進行統(tǒng)計分析。結果（表1）顯示：養(yǎng)殖場牦牛個體陽性率為12.96%（95%CI：9.6%～16.9%），牧戶為10.92%（95%CI：8.8%～13.3%），兩 種飼養(yǎng)模式下的個體陽性率無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；公牦牛個體陽性率為10.07%（95%CI：7.4%～13.4%），母牦牛為12.45%（95%CI：10.1%～15.1%），不同性別牦牛血清抗體陽性率無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；3 歲以下、3～6 歲和6歲以上牦牛的個體陽性率分別為5.08%（95%CI：2.4%～9.4%）、9.06%（95%CI：7.5%～12.0%）和22.81%（95%CI：17.5%～28.8%），3 歲以下牦牛血清抗體陽性率與6 歲以上抗體陽性率有統(tǒng)計學差異（P＜0.01，OR=5.52，95%CI：2.64～11.54）。

表1 當雄縣牦牛巴氏桿菌血清抗體檢測與風險因素分析結果

3 分析及與討論

青藏高原是世界上養(yǎng)殖牦牛最多的地區(qū)，而西藏的牦牛存欄量居世界第二。牦牛養(yǎng)殖作為西藏牧民賴以生存的支柱產業(yè)，其健康發(fā)展直接影響牧民的經濟收入。牦牛巴氏桿菌病是影響西藏牦牛產業(yè)綠色發(fā)展的主要疫病之一。本次調查發(fā)現，西藏牦牛巴氏桿菌病個體陽性率為11.57%，群體陽性率高達89.66%，說明巴氏桿菌病在該地區(qū)牦牛群中普遍流行。其主要原因：一是該地區(qū)牦牛存欄量大（常年保持在27 萬頭左右），而基層獸醫(yī)防疫力量薄弱，而該病又非強制免疫病種，因此未免疫現象較多；二是該縣有大量野生動物活動，野毒感染風險大；三是該病病原是條件致病菌，當雄縣海拔高、氣候多變、枯草期時間長，易導致牦牛營養(yǎng)狀況差，抵抗力弱，從而誘發(fā)巴氏桿菌病。因此，建議當地牧戶加強牦牛飼養(yǎng)管理，相關部門積極引導牧戶加強該病疫苗免疫。

本研究發(fā)現的當雄縣牦牛發(fā)病率（11.57%），與陳建春等[9]在2017年檢測的西藏（12.50%）與青海（12.91%）牦牛巴氏桿菌陽性率相近，但低于四川（23.95%）和甘肅（17.13%）的牦牛巴氏桿菌病陽性率。這可能是因為青海和西藏的牦牛飼養(yǎng)環(huán)境及飼養(yǎng)方式相似，而四川和甘肅的牲畜流動性大，交通便利，商販活動頻繁，為該病傳播提供了便利。通過R 軟件對比發(fā)現，6 歲以上老齡牦牛的血清抗體陽性率（22.81%）顯著高于3 歲以下幼齡牦牛（P＜0.001）。這是因為老齡牦牛抵抗力低下，感染巴氏桿菌概率高，且牧民對其管理較差，而3 歲以下的幼齡牦牛還在哺乳階段，感染概率低，且牧民為其提供了相對較好的生活和飼養(yǎng)環(huán)境。因此，建議及時淘汰老齡牦牛。這不僅可以降低老齡牦牛傳播疫病的風險，也能減輕草場生態(tài)壓力，從而保證幼齡和成年牦牛營養(yǎng)，增強其抵抗力，使本地的牦牛產業(yè)走上更加綠色、健康之路。

4 結論

調查發(fā)現，西藏當雄縣牦牛巴氏桿菌病流行較為普遍，其流行無飼養(yǎng)模式和性別差異，但老齡牦牛感染率較高。因此，需要加強牦牛飼養(yǎng)管理和巴氏桿菌病疫苗免疫，及時淘汰老齡牦牛。