秦世新，王 成，秦 茂，田陸妹，王 銳，歐玉星，向成志

（1.湘西州畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心，湖南吉首 416000；2.鳳凰縣畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心，湖南鳳凰 416200）

布魯氏菌?。╞rucellosis，以下簡(jiǎn)稱布病）又稱地中海弛張熱、馬耳他熱，是由布魯氏菌引起的人獸共患傳染病。布魯氏菌是一種細(xì)胞內(nèi)寄生的小球桿狀革蘭氏陰性菌，能感染人和動(dòng)物，導(dǎo)致其出現(xiàn)發(fā)熱、無(wú)力、心內(nèi)膜炎、關(guān)節(jié)炎及不孕不育等癥狀[1]。2020年11 月，湖南省鳳凰縣畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心在對(duì)某牛場(chǎng)進(jìn)行布病常規(guī)監(jiān)測(cè)時(shí)，發(fā)現(xiàn)布魯氏菌抗體陽(yáng)性樣品，經(jīng)湘西州畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室復(fù)核，確診布病陽(yáng)性。為及時(shí)查清該起疫情的發(fā)生原因、來(lái)源，追蹤擴(kuò)散去向，湘西州聯(lián)合鳳凰縣組織相關(guān)專業(yè)技術(shù)人員趕赴現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查

采用現(xiàn)場(chǎng)問(wèn)詢、查閱檔案等形式，了解疫情養(yǎng)殖戶的飼養(yǎng)、發(fā)病、引種、調(diào)運(yùn)、免疫、人員流動(dòng)等情況以及周邊牛羊飼養(yǎng)和放牧情況。

1.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

采集疫情牛場(chǎng)存欄牛血清樣品及流行病學(xué)關(guān)聯(lián)場(chǎng)牛血清樣品，根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)》（GB/T 18646—2018）[2]進(jìn)行操作和結(jié)果判定。先用虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBT）初篩，再用競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（c-ELISA），對(duì)初篩陽(yáng)性樣品進(jìn)行復(fù)核確認(rèn)。

2 結(jié)果

2.1 現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查

2.1.1 飼養(yǎng)管理情況 該場(chǎng)2018年底啟用，周邊3 km 范圍內(nèi)無(wú)居民居住，無(wú)牛羊場(chǎng)；現(xiàn)存欄牛290頭，其中能繁母牛171 頭（安格斯81 頭、本地黃牛90 頭）、公牛13 頭（均為本地黃牛）、小牛97 頭（安格斯、本地黃牛、雜交牛）、準(zhǔn)備淘汰牛9 頭（本地黃牛7 頭、雜交牛2 頭）；共有9 棟?rùn)谏幔瑱谏嵬鈬遣輬?chǎng)（圖1），用鐵絲網(wǎng)作圍墻；在距離場(chǎng)區(qū)5 km 處有一棟隔離欄舍；飼養(yǎng)方式是圈養(yǎng)和放牧相結(jié)合，每年4—5 月、9—10 月將牛放牧到自家草場(chǎng)，其余時(shí)間圈養(yǎng)；有兩名專業(yè)技術(shù)人員負(fù)責(zé)牛群飼喂、免疫等管理工作。

圖1 疫情場(chǎng)區(qū)欄舍布局示意圖

2.1.2 飲水和飼料 飲水為自來(lái)水和山泉水，山泉水來(lái)自早齊村；育肥牛濃縮料和母牛濃縮飼料均購(gòu)自重慶金銀卡生物飼料有限公司；同時(shí)購(gòu)入稻草和酒糟飼喂牛群，其中稻草購(gòu)自常德市，酒糟購(gòu)自吉首市湘泉酒廠。

2.1.3 配種情況 大部分為人工授精，2018年底、2019年上半年、2019年底分別從鳳凰縣畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心、湘西州畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心、湖南省畜牧科學(xué)研究所采購(gòu)一批安格斯牛精液。少部分為本地公牛與本地母牛自然配種，承擔(dān)本地黃牛保種任務(wù)。

2.1.4 調(diào)入調(diào)出情況 2018年底、2019年上半年分別從本地養(yǎng)殖戶購(gòu)入母牛和小牛，均為本地黃牛。2019年5 月，從天津市購(gòu)入30 頭安格斯母牛，2020年有6 頭發(fā)生急性死亡，死亡原因不明。2020年6 月，從遼寧省遼中區(qū)某種牛場(chǎng)購(gòu)入50 頭安格斯母牛（28 頭母牛已在妊娠期，原產(chǎn)地新疆），養(yǎng)殖在3#棟舍，8 月2 頭母牛發(fā)生流產(chǎn)，原因不明。2020年2—3 月賣給牛販子約50 頭小牛（8～12 月齡），無(wú)牛販子聯(lián)系方式，牛販子到場(chǎng)內(nèi)看牛、買牛；8 月賣出2 頭安格斯母牛到山江鎮(zhèn)，買方開(kāi)車進(jìn)飼養(yǎng)區(qū)購(gòu)買。牛只購(gòu)入前和出欄時(shí)均未申報(bào)檢疫。

2.1.5 免疫情況 2020年4 月注射口蹄疫O型滅活疫苗（OS 株），9 月注射山羊痘活疫苗，10 月再次注射O型滅活疫苗（OS 株）。2020年6 月從遼寧省調(diào)入的牛群已經(jīng)進(jìn)行了布魯氏菌病、口蹄疫、氣腫疽、炭疽等疫苗免疫。

2.1.6 車輛、人員流動(dòng)及消毒情況 每半月1 次交替使用辛硫磷澆潑溶液、稀戊二醛溶液、消毒靈（二氯異氰尿酸鈉粉）等對(duì)場(chǎng)區(qū)進(jìn)行消毒；兩名牛群飼養(yǎng)和管理技術(shù)人員近期一直在場(chǎng)內(nèi)，未外出，場(chǎng)主曾在購(gòu)買牛時(shí)去過(guò)其他養(yǎng)殖場(chǎng)戶；有外來(lái)人員和車輛進(jìn)入飼養(yǎng)區(qū)買牛，進(jìn)入場(chǎng)區(qū)時(shí)，過(guò)消毒池停留消毒；人員進(jìn)入場(chǎng)區(qū)時(shí)，進(jìn)行噴霧消毒。

2.1.7 野生動(dòng)物死亡情況 近期場(chǎng)附近未發(fā)現(xiàn)有野生動(dòng)物死亡。

2.1.8 布病知曉情況 經(jīng)詢問(wèn)，場(chǎng)主及技術(shù)人員聽(tīng)說(shuō)過(guò)布病，但是不了解。

2.1.9 人員感染情況 鳳凰縣疾病控制中心對(duì)該場(chǎng)直接接觸和飼養(yǎng)牛的13 人以及流行病學(xué)關(guān)聯(lián)牛場(chǎng)的2 人進(jìn)行布魯氏菌病檢測(cè)，結(jié)果均為陰性。

2.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

2020年11 月，利用RBT 及c-ELISA 方法，對(duì)該場(chǎng)的240 份牛血清樣品進(jìn)行布魯氏菌檢測(cè)（妊娠母牛及未滿6 月齡小牛未采樣），檢出85 份陽(yáng)性，陽(yáng)性率為35.4%；陽(yáng)性牛大部分在3#棟舍，少部分在4#棟舍；對(duì)流行病學(xué)關(guān)聯(lián)牛場(chǎng)的16 份樣品進(jìn)行檢測(cè)，檢出3 份陽(yáng)性；對(duì)鄰近村7 戶散養(yǎng)戶飼養(yǎng)的32 只羊和8 頭牛進(jìn)行采樣檢測(cè)，結(jié)果均為陰性。

3 疫情處置與防控

為防止疫情擴(kuò)散，在第一次采樣初篩檢測(cè)發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性樣品后，當(dāng)?shù)卣矮F醫(yī)主管部門立即封鎖相應(yīng)的村，并限制該場(chǎng)以及流行病學(xué)關(guān)聯(lián)場(chǎng)的人員及牛群流動(dòng)；及時(shí)對(duì)陽(yáng)性牛進(jìn)行撲殺和無(wú)害化處理；對(duì)陰性牛隔離飼養(yǎng)，不準(zhǔn)放牧，不得出售或者自行宰殺；對(duì)疫情牛場(chǎng)排泄物、墊料和飼料，以堆積發(fā)酵方式進(jìn)行無(wú)害化處理，對(duì)場(chǎng)內(nèi)及牧區(qū)進(jìn)行嚴(yán)格消毒，并設(shè)立警示牌，禁止放牧。在處理時(shí)，嚴(yán)格按照《動(dòng)物布魯氏菌病防治技術(shù)規(guī)范》要求，做好人員防護(hù)，凡進(jìn)場(chǎng)人員都必須穿防護(hù)服，戴口罩和手套，避免徒手接觸牛只，確保人員安全。對(duì)該場(chǎng)專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行生物安全相關(guān)培訓(xùn)，要求其在接產(chǎn)尤其是接觸流產(chǎn)母畜時(shí)，一定要做好個(gè)人防護(hù)。

2020年12 月，對(duì)該場(chǎng)和流行病學(xué)關(guān)聯(lián)場(chǎng)進(jìn)行第二次全群采樣檢測(cè)，分別檢出25 份和1 份陽(yáng)性樣品，同時(shí)對(duì)相關(guān)人員再次采樣進(jìn)行布病檢測(cè)，結(jié)果均為陰性；2021年1 月，進(jìn)行第三次全群采樣檢測(cè)，在疫情農(nóng)場(chǎng)檢出9 份陽(yáng)性，關(guān)聯(lián)場(chǎng)無(wú)陽(yáng)性；2021年2—3 月，進(jìn)行第四次全群采樣檢測(cè)，在疫情農(nóng)場(chǎng)檢測(cè)出10 份陽(yáng)性，關(guān)聯(lián)場(chǎng)無(wú)陽(yáng)性；2021年4 月，進(jìn)行第五次全群采樣檢測(cè)，在疫情場(chǎng)檢測(cè)出3 份陽(yáng)性，關(guān)聯(lián)場(chǎng)無(wú)陽(yáng)性。所有檢測(cè)陽(yáng)性牛均被隔離撲殺。

圖2 疫情病例數(shù)時(shí)間分布

4 討論

4.1 疫病來(lái)源

通過(guò)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，2020年6 月前，該農(nóng)場(chǎng)及周邊農(nóng)場(chǎng)未有牛群出現(xiàn)流產(chǎn)等布病疑似癥狀，也無(wú)人員及家畜感染。2020年8 月從遼寧省購(gòu)入的2 頭安格斯母牛發(fā)生不明原因流產(chǎn)。該批牛來(lái)自布病一類地區(qū)，且購(gòu)入時(shí)未進(jìn)行檢疫；檢出陽(yáng)性的牛場(chǎng)均與疫情農(nóng)場(chǎng)存在流行病學(xué)關(guān)聯(lián)。因此，綜合判斷此次疫情可能是由引種造成的。由于該場(chǎng)場(chǎng)主及技術(shù)人員對(duì)布病的危害及防治不知曉、不了解，調(diào)入的妊娠母牛發(fā)生流產(chǎn)時(shí)，也未引起重視，從而導(dǎo)致疫情擴(kuò)散。

4.2 擴(kuò)散途徑

據(jù)調(diào)查，疫情農(nóng)場(chǎng)放牧?xí)r未完全按照要求將安格斯牛與本地牛分開(kāi)放牧，存在混群放牧現(xiàn)象，同時(shí)也存在本地牛與安格斯牛雜交現(xiàn)象，使得布病病原由3#欄舍傳入4#欄舍。所有牛在同一處放牧，布病陽(yáng)性牛在放牧區(qū)可污染牧草，增加了疫情擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)。感染牛的調(diào)出也導(dǎo)致疫情出現(xiàn)擴(kuò)散。2020年8 月，疫情農(nóng)場(chǎng)賣出2 頭2020年6 月調(diào)入的安格斯母牛到山江鎮(zhèn)一養(yǎng)牛戶。對(duì)該關(guān)聯(lián)養(yǎng)牛戶的牛進(jìn)行采樣檢測(cè)，有1 份樣品為陽(yáng)性，而該樣品就來(lái)自于疫情農(nóng)場(chǎng)賣出的安格斯母牛。

4.3 疫情警示

4.3.1 加強(qiáng)聯(lián)防聯(lián)控 頻繁交易和大量流通導(dǎo)致動(dòng)物疫病防控難度進(jìn)一步增加。布病防控涉及面廣、執(zhí)行難度大，需要各部門加強(qiáng)合作，做好聯(lián)防聯(lián)控，建立健全信息通報(bào)制度，實(shí)現(xiàn)資源共享，確保聯(lián)合聯(lián)控機(jī)制有效運(yùn)行。

4.3.2 加強(qiáng)日常監(jiān)測(cè) 此次疫情是由縣級(jí)畜牧獸醫(yī)部門主動(dòng)監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)的，因此日常監(jiān)測(cè)在動(dòng)物疫病防控中極為重要。早發(fā)現(xiàn)、早上報(bào)、早處理可避免疫情擴(kuò)散，減少經(jīng)濟(jì)損失，保障公共衛(wèi)生安全。而且只有進(jìn)行連續(xù)性監(jiān)測(cè)，才能更有效地評(píng)估布病流行狀況及防控效果。

4.3.3 加強(qiáng)監(jiān)督執(zhí)法 本次疫情是從外省引牛造成的。牛群調(diào)運(yùn)過(guò)程中未按要求進(jìn)行落地報(bào)檢是導(dǎo)致疫情引入的主要原因。動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督部門要進(jìn)一步加強(qiáng)活牛的調(diào)運(yùn)檢疫監(jiān)管，嚴(yán)防病畜及其產(chǎn)品流入市場(chǎng)；嚴(yán)厲查處落地不報(bào)檢、不隔離觀察等行為，嚴(yán)格禁止從一類地區(qū)引種。目前用血清學(xué)方法無(wú)法鑒別疫苗接種與自然感染抗體，且抗體陽(yáng)性長(zhǎng)期存在于體內(nèi)，也會(huì)影響布病的常規(guī)監(jiān)測(cè)[3]；同時(shí)布魯氏菌是一種胞內(nèi)寄生菌，疫苗活菌可長(zhǎng)時(shí)間存活在動(dòng)物體內(nèi)。鑒于以上原因，國(guó)家對(duì)布病實(shí)行分區(qū)管理，執(zhí)行不同的防控措施。在布病非免疫地區(qū)，一旦發(fā)現(xiàn)布病陽(yáng)性，都應(yīng)撲殺、無(wú)害化處理。

4.3.4 加大政府投入力度 部分養(yǎng)殖戶為了減少經(jīng)濟(jì)損失而偷售或私自屠宰染疫病畜，使得布病防控難度加大。政府應(yīng)加大財(cái)政投入力度，將撲殺補(bǔ)貼、無(wú)害化處理經(jīng)費(fèi)等納入財(cái)政預(yù)算，形成長(zhǎng)效機(jī)制，保障養(yǎng)殖戶的利益，從根源上防止疫情蔓延。

4.3.5 加強(qiáng)布病宣傳及生物安全相關(guān)知識(shí)培訓(xùn)本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，很多養(yǎng)殖場(chǎng)戶對(duì)該病不認(rèn)識(shí)、不了解，更不清楚此病為人獸共患病。應(yīng)加大有關(guān)布病的法律法規(guī)、個(gè)人防護(hù)、布病危害與防治等的宣傳力度，提高養(yǎng)殖戶防護(hù)意識(shí)。