張秀敏，趙昌東，李 雪，盧學(xué)峰，劉維忠，王淑芳

(南京醫(yī)科大學(xué)康達(dá)學(xué)院附屬連云港市第二人民醫(yī)院 消化內(nèi)科，江蘇 連云港 222000)

潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis, UC)作為慢性非特異性腸道炎癥性疾病，可導(dǎo)致患者出現(xiàn)腹痛、腹瀉等臨床癥狀，嚴(yán)重影響機(jī)體代謝功能[1-2]。正常機(jī)體中，腸道菌群異常侵入結(jié)腸后，固有的免疫系統(tǒng)可減輕腸道共生菌及膳食抗原產(chǎn)生的免疫反應(yīng)，但UC患者由于免疫耐受情況較差，CD4+等淋巴細(xì)胞過(guò)度抑制，導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)的炎癥因子表達(dá)水平升高[3-4]。CD4+作為機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)，被炎癥因子激活后可通過(guò)自身細(xì)胞的增殖活化穩(wěn)定自身免疫耐受[5]。有研究認(rèn)為[6]，血清吲哚胺2, 3-雙加氧化酶(IDO)可通過(guò)抑制T細(xì)胞的增殖活化，進(jìn)而抑制免疫反應(yīng)。本研究旨在探討UC患者血清IDO水平及其與外周血CD4+的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1病例選擇 收集本院2014年8月至2019年1月收治的72例UC患者進(jìn)行回顧性分析。將其作為觀察組，男性40例，女性32例，年齡28～49歲，平均年齡(36.12±2.36)歲，UC活動(dòng)期49例，緩解期23例?；顒?dòng)期中重度組12例，中度組16例，輕度組21例。另選同期于本院體檢的健康人群72例作為對(duì)照組，男性41例，女性31例，年齡28～49歲，平均年齡(36.03±2.41)歲。兩組受試者的性別、年齡等一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，此研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批。

入選標(biāo)準(zhǔn)：①均符合《炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見(jiàn)》[7]中UC的臨床診斷；②腹瀉病程≥4周； ③臨床病歷資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有血液性疾病或其他傳染性疾病者；②合并惡性腫瘤者；③伴有心臟系統(tǒng)疾病者；④伴有精神病或嚴(yán)重意識(shí)障礙者；⑤伴有全身感染或局部嚴(yán)重感染者。

1.2方法 根據(jù)梅奧評(píng)分法對(duì)患者疾病情況進(jìn)行評(píng)估[6]，其中<2分為緩解期，≥3分為活動(dòng)期，活動(dòng)期包括：11～12分為重度活動(dòng)；6～10分為中度活動(dòng)；3～5分為輕度活動(dòng)。兩組受試者均于清晨抽取空腹靜脈血3～4 ml，抗凝，于離心機(jī)(r=2 400 r/min，R=13.5 cm)中離心5 min，取上清，使用XF-1600型流式細(xì)胞儀(寰熙醫(yī)療公司)檢測(cè)外周血內(nèi)的Treg水平，檢測(cè)指標(biāo)包括CD4+等。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清IDO水平，IDO試劑盒購(gòu)自上海晶抗生物有限公司。

1.3觀察指標(biāo) (1)兩組血清IDO水平和外周血CD4+表達(dá)水平；(2)觀察組不同疾病時(shí)期血清IDO水平和外周血CD4+表達(dá)水平；(3)觀察組活動(dòng)期不同病情程度血清IDO水平和外周血CD4+表達(dá)水平。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清IDO水平和外周血CD4+表達(dá)水平比較 觀察組血清IDO水平高于對(duì)照組，而外周血CD4+水平低于對(duì)照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組血清IDO水平和外周血CD4+表達(dá)水平比較

2.2觀察組不同疾病時(shí)期血清IDO水平和外周血CD4+表達(dá)水平比較 觀察組活動(dòng)期血清IDO水平高于緩解期，而外周血CD4+表達(dá)水平低于緩解期，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 觀察組不同疾病時(shí)期血清IDO水平和外周血CD4+表達(dá)水平比較

2.3觀察組活動(dòng)期不同病情程度血清IDO水平和外周血CD4+表達(dá)水平比較 重度組及中度組外周血CD4+表達(dá)水平均低于輕度組，血清IDO水平均高于中度組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；重度組外周血CD4+表達(dá)水平低于中度組，血清IDO水平高于中度組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 觀察組活動(dòng)期不同病情程度血清IDO水平和外周血CD4+表達(dá)水平比較

2.4觀察組血清IDO水平和外周血CD4+表達(dá)水平的相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，UC患者血清IDO水平和外周血CD4+表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.801，P=0.000)。

3 討 論

相關(guān)研究表明[8-9]，IDO作為肝臟以外唯一通過(guò)催化色氨酸沿犬尿氨酸途徑分解代謝的限速酶，能夠降低微環(huán)境中的色氨酸濃度，抑制T細(xì)胞免疫，從而減輕UC患者病情。因此，明確血清IDO水平和外周血CD4+表達(dá)水平的相關(guān)性，對(duì)臨床研究具有重要意義。

本研究結(jié)果顯示，觀察組血清IDO水平高于對(duì)照組，而外周血CD4+水平低于對(duì)照組，表明UC患者較正常人群血清IDO水平顯著升高，而外周血CD4+水平顯著降低。胡明富等[10]研究發(fā)現(xiàn)CD4+等淋巴細(xì)胞能夠有效消除或抑制機(jī)體的炎癥反應(yīng)，維持機(jī)體的免疫穩(wěn)態(tài)，提高腸道內(nèi)的免疫耐受作用。UC患者較正常人群CD4+水平偏低，提示UC發(fā)病可能與CD4+淋巴細(xì)胞表達(dá)水平異常有關(guān)。IDO過(guò)表達(dá)時(shí)可使犬尿氨酸累積抑制CD4+淋巴細(xì)胞的分化，同時(shí)消耗色氨酸抑制CD4+淋巴細(xì)胞的增殖，因此，血清IDO水平與CD4+淋巴細(xì)胞的增殖和活化過(guò)程關(guān)系密切[11-12]。觀察組活動(dòng)期血清IDO水平高于緩解期，且外周血CD4+表達(dá)水平低于緩解期；重度組及中度組外周血CD4+表達(dá)水平均低于輕度組，血清IDO水平均高于輕度組，表明活動(dòng)期UC患者IDO水平更高，而外周血CD4+表達(dá)水平更低，且UC病情嚴(yán)重程度與血清IDO水平及外周血CD4+表達(dá)水平相關(guān)。張瑜鴻等[13]研究認(rèn)為血清IDO水平表達(dá)強(qiáng)烈時(shí)，將對(duì)外周血CD4+表達(dá)產(chǎn)生抑制作用，同時(shí)UC病情嚴(yán)重程度增加時(shí)，外周血CD4+表達(dá)將受到明顯抑制作用。與本研究結(jié)果一致。Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，UC患者血清IDO水平和外周血CD4+表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)，證實(shí)UC患者血清IDO水平和外周血CD4+表達(dá)水平存在密切關(guān)系。相關(guān)研究表明[14-15]，UC患者血清IDO水平過(guò)表達(dá)能夠?qū)ν庵苎狢D4+表達(dá)產(chǎn)生抑制作用，從而損傷腸道耐受功能，激活輔助T細(xì)胞分泌炎性介質(zhì)，誘導(dǎo)疾病進(jìn)展。

綜上，UC患者血清IDO水平升高，外周血CD4+表達(dá)水平降低，且兩者呈負(fù)相關(guān)。