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        萊菔頭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

        2021-09-01 13:31:58陽文武黃艷萍向春燕
        現(xiàn)代食品 2021年12期
        關(guān)鍵詞:黃酮

        ◎ 陽文武,黃艷萍,向春燕,周 濃

        (1.重慶市萬州食品藥品檢驗(yàn)所,重慶 404000;2.重慶三峽學(xué)院 生物與食品工程學(xué)院,三峽庫區(qū)道地藥材綠色種植與深加工重慶市工程實(shí)驗(yàn)室,重慶 404120;3.重慶市黔江食品藥品檢驗(yàn)所,重慶 409000)

        萊菔頭為傳統(tǒng)食藥兩用藥,使用歷史悠久,全國各地均有栽培,被收載于各地地方標(biāo)準(zhǔn),來源于十字花科蘿卜屬植物蘿卜(Raphanus sativusL.)開花結(jié)實(shí)后的老根,其新鮮根是大眾喜愛的蘿卜,具有行氣消積、宣肺化痰、利水消腫等功效,用于治療食積氣滯、腹脹痞滿、痢疾、咳嗽痰多、腳氣以及水腫等[1-6]。萊菔頭含黃酮、有機(jī)酸、維生素C以及氨基酸等化學(xué)成分[4]。目前,各類標(biāo)準(zhǔn)中萊菔頭的質(zhì)量控制指標(biāo)尚無顯微鑒別和成分含量測(cè)定等項(xiàng)目[4],為此本試驗(yàn)采集7批不同產(chǎn)地萊菔頭,考察其顯微特征、水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物以及總黃酮等指標(biāo),旨在確立萊菔頭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

        1 材料與方法

        1.1 儀器與材料

        島津UV-2501紫外分光光度計(jì);奧林巴斯BX53型顯微鏡;AB204S型萬分之一天平;KH-2000DB超聲波清洗器;ED53干燥箱;SDLA-B-1101型超純水機(jī);SX2-5-12電阻爐。

        水為超純水,其余試藥為分析純;蘆丁對(duì)照品(批號(hào):100080-201811,含量92.4%,中檢院)。

        試驗(yàn)所用萊菔頭樣品采集自重慶、湖北、河南、山東及安徽等地,均由重慶三峽學(xué)院周濃教授鑒定為蘿卜(Raphanus sativusL.)開花結(jié)實(shí)后的老根。樣品清洗后,切片,35 ℃烘干,粉碎過篩后備用。

        1.2 方法

        1.2.1 顯微特征分析

        取萊菔頭粉末置于奧林巴斯BX53型顯微鏡下觀察。

        1.2.2 水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物測(cè)定

        參照2020年版《中華人民共和國藥典》四部方法對(duì)萊菔頭的水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物進(jìn)行測(cè)定[7]。

        1.2.3 總黃酮含量測(cè)定

        (1)對(duì)照品貯備溶液的制備。取蘆丁對(duì)照品精密稱定21.43 mg,置于50 mL量瓶中,以70%乙醇溶解并定容至刻度,制成0.396 mg·mL-1的蘆丁對(duì)照品貯備液。

        (2)對(duì)照品溶液的制備。精密量取蘆丁對(duì)照品貯備液0.05 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL及0.8 mL,置于10 mL量瓶中,分別補(bǔ)加70%乙醇至4 mL,加入5%亞硝酸鈉溶液0.4 mL,搖勻,靜置6 min;再分別加入10%硝酸鋁溶液0.4 mL,搖勻,靜置6 min;最后分別加入4%氫氧化鈉溶液4 mL,用水定容至刻度,搖勻,靜置15 min。

        (3)供試品溶液制備。精密稱取萊菔頭粉末(過三號(hào)篩)1.0 g,置于錐形瓶中,加70%乙醇30 mL,超聲提取30 min,過濾,濾渣再重復(fù)提取1次,合并濾液,減壓回收至干,以70%乙醇溶解并定容至10 mL量瓶中,搖勻,精密量取4.0 mL,照1.2.3(2)項(xiàng)的方法,自“加入5%亞硝酸鈉溶液0.4 mL”起制備,即得。

        (4)測(cè)定。以相應(yīng)的試劑為空白,在510 nm的波長處測(cè)定各溶液的吸光度。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 顯微特征

        萊菔頭粉末為淺黃棕色,顯微特征如圖1所示。由圖1可知,導(dǎo)管多為具緣紋孔導(dǎo)管,較大,紋孔較密。木纖維呈長條狀或不規(guī)則長梭形,多彎曲,末端較尖,有的一端分枝,單斜紋孔或相交成十字形,稀疏。網(wǎng)紋細(xì)胞形狀不規(guī)則,具網(wǎng)狀紋孔,紋孔大,卵圓形或不規(guī)則形。

        圖1 萊菔頭粉末顯微特征圖

        2.2 水分、總灰分、酸不溶性灰分及浸出物檢測(cè)結(jié)果

        由表1可知,7批萊菔頭水分、總灰分、酸不溶性灰分及浸出物含量范圍分別為8.1%~11.1%、15.1%~19.0%、1.2%~3.4%和14.5%~19.8%。

        表1 萊菔頭中水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物的含量表

        2.3 總黃酮含量測(cè)定

        2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

        取1.2.3(2)項(xiàng)下的各對(duì)照品溶液依法測(cè)定,以蘆丁的濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程Y=10.351X+0.0218,r為0.999 8,蘆丁的線性范圍為0.001 98~0.031 68 mg·mL-1。

        2.3.2 方法學(xué)考察

        (1)精密度與重復(fù)性試驗(yàn)。取S6粉末約1 g,精密稱定,按照1.2.3(3)項(xiàng)方法制備樣品溶液,依法重復(fù)測(cè)定6次,得吸光度的平均值為0.155,RSD為0.05%,表明儀器精密度符合要求。精密稱取S6粉末6份,每份約1 g,按照1.2.3(3)項(xiàng)方法制備供試品溶液,依法測(cè)定吸光度,計(jì)算,即得。結(jié)果顯示總黃酮的平均含量為0.16%,RSD為1.6%,結(jié)果表明方法重復(fù)性良好。

        (2)加樣回收率試驗(yàn)。精密稱取已知含量的萊菔頭粉末6份,每份約0.5 g,分別精密加入濃度為0.396 mg·mL-1的蘆丁對(duì)照品貯備液2.0 mL,按照1.2.3(3)項(xiàng)方法制備供試品溶液,依法測(cè)定吸光度,計(jì)算,即得,結(jié)果見表2。

        表2 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果表(n=6)

        2.3.3 樣品測(cè)定

        按照1.2.3(3)項(xiàng)方法制備各供試品溶液,依法測(cè)定吸光度,計(jì)算,即得,結(jié)果見表3。7批萊菔頭中總黃酮含量為0.13%~0.47%,平均含量為0.26%。

        表3 萊菔頭中總黃酮的含量表

        3 結(jié)論與討論

        水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物是評(píng)價(jià)藥材品質(zhì)的重要指標(biāo)。由結(jié)果可知,7批萊菔頭水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物含量范圍分別為8.1%~11.1%、15.1%~19.0%、1.2%~3.4%、14.5%~19.8%,大部分不符合《四川省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》2010年版標(biāo)準(zhǔn)中水分不得過9.0%,總灰分不得過18.5%,酸不溶性灰分不得過1.5%,浸出物不得少于18.0%的要求[4],建議修訂其限量值。

        黃酮類化合物有多種藥理作用,具有止咳、祛痰、平喘及抗菌的活性,同時(shí)具有護(hù)肝,解肝毒,抗真菌,治療急、慢性肝炎等功效。該試驗(yàn)測(cè)定了7批萊菔頭中總黃酮含量,結(jié)果為0.13%~0.47%,平均含量為0.26%,這是首次對(duì)萊菔頭中的總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定,對(duì)其質(zhì)量控制有重要的意義。

        本試驗(yàn)通過研究不同產(chǎn)地萊菔頭,建議暫定萊菔頭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為水分不得過12.0%、總灰分不得過20.0%、酸不溶性灰分不得過4.0%、浸出物不得少于13.0%以及總黃酮以蘆丁計(jì)不得少于0.10%。

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