單祥保，方龍香，施羽露，邢路暢，裘麗萍，胡庚東,，宋 超,,4①，陳家長,,4②

〔1.南京農(nóng)業(yè)大學無錫漁業(yè)學院，江蘇 無錫 214081；2.中國水產(chǎn)科學研究院淡水漁業(yè)研究中心，江蘇 無錫 214081； 3.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部水產(chǎn)品質量安全環(huán)境因子風險評估實驗室(無錫)， 江蘇 無錫 214081；4.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部水產(chǎn)品質量安全控制重點實驗室，北京 100141〕

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

儀器設備：超高效液相色譜/質譜(Waters，美國馬薩諸塞州)，多管式渦旋振蕩器(Henry Troemner，美國)，高速冷凍離心機(GL-22MS，上海盧湘儀離心機儀器有限公司)，SiGMA離心機，固相萃取裝置(CNW Technologies，德國)，分析天平(AL104，梅特勒-托利多儀器上海有限公司)。

1.2 試驗方法

1.2.1試驗設計

1.2.2樣品前處理

養(yǎng)殖水樣品：參考黃銖玉等[18]的方法進行前處理。搖勻后每份量取200 mL試樣進行萃取濃縮。選取HLB固相萃取小柱，用5 mL甲醇和5 mL超純水依次進行活化，然后上水樣，水樣抽干后，再用5 mL甲醇分2次(3 mL+2 mL)進行洗脫，用10 mL離心管收集洗脫液。用甲醇稀釋洗脫液至一定刻度，搖勻后取部分過0.22 μm孔徑濾膜，轉移至進樣瓶中，待測。

其他樣品：參考張石云等[19]的方法進行前處理。稱取(2±0.01) g試樣于50 mL離心管中，加入10 mLφ=0.1%的甲酸乙腈振蕩混勻，以2 000 r·min-1轉速渦旋振蕩10 min，以10 000 r·min-1離心5 min(離心半徑為10 cm)。取5 mL離心后的上清液，加入用5 mL超純水活化后的增強型脂質去除凈化管中，以2 000 r·min-1渦旋振蕩5 min，以4 000 r·min-1離心5 min(離心半徑為16 cm)。將離心后的上清液全部轉入含有1.7 g MgSO4增強型脂質去除凈化管中，以2 000 r·min-1振蕩5 min，再以4 000 r·min-1離心5 min(離心半徑為16 cm)。將上層有機相過0.22 μm孔徑濾膜，轉移至進樣瓶中，待測。

若濾液中待測物濃度超出標準曲線的線性范圍，則需酌情濃縮或稀釋試樣溶液。

1.2.3儀器分析條件

1.3 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析

根據(jù)液相色譜-質譜定量檢測得出不同介質下各個時間段藥物濃度后，計算2種藥物在不同介質下的整體分布水平以及動態(tài)消解變化過程，使用多介質環(huán)境逸度Ⅲ級模型[20-21]模擬藥物在養(yǎng)殖環(huán)境中的歸趨行為。采用Microsoft Excel 2013和SPSS 25.0軟件整理分析數(shù)據(jù)，采用Graphpad Prism 5.01和Origin軟件作圖。

2 結果與分析

2.1 磺胺唑和恩諾沙星在羅非魚池塘養(yǎng)殖環(huán)境中的歸趨行為

表1 不同介質中磺胺唑濃度隨時間的變化

2.2 多介質環(huán)境逸度模型模擬磺胺唑和恩諾沙星的歸趨

表2 不同介質中恩諾沙星濃度隨時間的變化

表3 磺胺甲唑和恩諾沙星的物理化學性質

2.3 磺胺唑和恩諾沙星在羅非魚養(yǎng)殖環(huán)境中休藥期的模擬值與實際值比較

恩諾沙星在肝臟中代謝最快，經(jīng)過5.7 d恢復至初始水平，其次是腸道內(nèi)容物(10.3 d)。肌肉中恩諾沙星雖整體呈下降趨勢，但至最后一批樣品檢測時仍未恢復至初始水平，說明該藥物在羅非魚肌肉中出現(xiàn)一定程度的富集。試驗結果與標準規(guī)定休藥時間大體保持一致。

3 討論

3.1 磺胺唑和恩諾沙星在羅非魚各組織中的降解差異分析

3.2 磺胺唑和恩諾沙星在羅非魚養(yǎng)殖環(huán)境中的歸趨行為差異分析

恩諾沙星未在養(yǎng)殖水體和底泥中檢出，分析原因，一是羅非魚具有攝食快的特點，拌料投喂給藥影響了恩諾沙星在水體、魚體和沉積物中的分配比例；二是光照條件下恩諾沙星消解速率快，而且一定范圍內(nèi)隨著溫度升高，恩諾沙星消解速率加快[31]，野外試驗時池塘水溫較高，為28 ℃左右；三是從第1次拌料投喂至第2次采樣的時間間隔為6 d，抗生素已降解；四是模型分析條件下，不同介質占比不會為0；五是每種藥物在養(yǎng)殖環(huán)境中的分配系數(shù)具有差異，導致其在養(yǎng)殖水體中未達到檢測限，不利于數(shù)據(jù)分析。

3.3 磺胺唑和恩諾沙星在羅非魚養(yǎng)殖環(huán)境中的休藥期

4 結論